一、动物实验室相关问题：

1、问：实验室开放时间？

答：工作日：8：30-16：00

周 末：9：00—11：30；

其它节假日另行通知。

2、问：可否带相机或手机进动物实验室？

答：不可以。

3、问：酒精灯能否在动物实验室使用？

答：不可以，实验室内禁止使用明火。

4、问：动物部笼盒及水瓶可否外借？

答：不可外借，若取走动物需自备或提前购买运输盒。

5、问：可否同一天进入两个不同的动物饲养间？

答：需要提出申请并与负责老师协商后，确定是否符合要求，并按照级别顺序进入。

6、问：动物取走后还可以送回实验动物部吗？

答：不可以，带离的动物不能再送回。

二、模型动物饲养相关问题

1、问：小鼠的最佳繁育年龄？

答：雌鼠8周龄后可以进行交配，一般生5、6胎后就不建议继续使用了，雄鼠建议12周龄后开始交配，6—8月后繁育性能下降。

2、问：小鼠的离乳时间？

答：一般离乳时间为21天，若某些模型动物的体质较弱，离乳时间可延长至28天。

3、问：想要一定数量的模型动物，但种群数量有限（两对或4对），如何快速、经济的达到想要的动物数量？

答：体外受精扩群，具体信息详见技术服务内容。

4、问：实验大小鼠的一天摄食量和摄水量是多少？（转自清华大学网站）

答：以250克左右SD大鼠为例：饲料30-45克，水40-60毫升

以25克左右CD-1小鼠为例：饲料5-10克，水8-15毫升

5、问：一般需要几对小鼠用于品系繁育？

答：一般来说，至少需要2–4对育龄小鼠用来进行品系的繁育，若需要加快繁育速度或特殊品系的小鼠有生育缺陷，那么可以通过扩大交配数量，或采用体外受精(IVF, in vitro fertilization)快速繁育方法。如果采用IVF方式快速繁育，则只需要提供2–3只有生育能力的雄鼠即可。

6、问：新购入的模型小鼠如何保种？

答：引入小鼠为纯合子：动物到达交配年龄后可直接合笼开始繁育；

引入小鼠为杂合子：a.纯合致死：选择同窝杂合交配的方式保种；

b.纯合不致死，但繁育能力差：同纯合致死方式；

c.纯合不致死且繁育能力正常：筛选纯合子保种。

随着小鼠不断的繁殖传代，可能会出现遗传漂变（Genetic drift），小鼠的表型可能会发生变化。可以采用胚胎或精子冷冻进行保护。

7、问：我的动物为什么食仔？

答：这与母鼠的母性、带仔能力以及仔鼠的身体状况有关，相比较遗传工程鼠出现食仔的现象更多一些，出生一周内的仔鼠尽量不要移动，也不要过多的观察，一周后再更换垫料。在不影响实验结果的情况下可以适当的给与动物一些筑巢材料（如棉球等），提供适量的瓜子。

8、问：动物为什么躲在角落抱成团，是冷吗？还是状态下降？

答：小鼠喜居光线暗淡的环境，固定一处睡眠营巢，所以动物躲在角落里不一定是冷了或状态下降，要视具体情况而定。

9、问：实验中被鼠咬伤了怎么办？

答：实验中被鼠咬伤、抓伤或锐器伤均按下述方式处理：

1) 挤压创口，尽量将血液、组织液挤出，同时用大量清水、盐水或肥皂水冲洗伤口，如果动物组织液溅入眼睛应立即用清水冲洗；

2) 创口冲洗后用75%酒精或0.5%碘伏消毒，如创口较大或出血较多请立即就医；

3) 完成上述处置后及时与校医务处联系，在医生的指导下确定是否注射疫苗，如需注射尽量在24小时内完成。

三、动物健康问题

1、刚到货的裸鼠皮肤有很多小红点，是不是传染病？要怎么处理？

答：这是该品系小鼠并笼常见现象（打架/咬伤造成），尤其在较高周龄（如8周龄）进行并笼发生比例会更高，并非传染病。建议如要避免再次发生类似情形，请订购较低周龄小鼠、进行分笼运送。将较凶的动物适度分笼，可有效降低打斗发生。对于咬伤部位，可利用优点擦拭伤口，一天1-2次，约经一周应该可获得改善。

2、购买的裸鼠皮肤出现小细毛，这样正常吗？会不会影响实验？（转自广东省实验动物中心）

答：根据文献及我中心经验，部分裸鼠偶尔会出现这种情形，这是正常现象，并不影响实验。根据The Jackson Laboratory关於裸鼠的资料，文中提及这类裸鼠于5周龄会开始长出稀疏的毛，有些小鼠会在背部长出稀疏短毛，长毛的区域形状不规则，约8-9周龄便会消失，但也有文献指出这些细毛一直会到4月龄仍可存在。

参考文献: The nude mouse skin phenotype: the role of Foxn1 in hair follicle development and cycling. Exp Mol Pathol. 71(2):171-8, 2001.The Jackson Laboratory

网站资料: http://jaxmice.jax.org/strain/002019.html

3、我的B6小鼠为什么经常有咬伤？如何避免？

答：好斗是C57BL/6小鼠的天性，尤其是雄性动物到了性成熟之后，领地意识的增强加剧了动物之间的相互打斗。避免措施主要包括：

1) 分笼时尽量避免将不同饲养笼的动物分到同一个饲养笼中；

2) 更换垫料时，可以留取一点原来的废旧垫料放在新换垫料的表面；

3) 尽可能降低动物的饲养密度

4) 如果发现笼中有打斗现象，请将最强者（身体无伤、胡须完整）挑出，单笼饲养；同时对受伤的个体，每日用75%的酒精或碘酒消毒，一般5-7天可以痊愈；

5）如果有可能，在垫料中增加筑巢材料（例如纸屑），也是一种比较好的方法。因为这种筑巢材料可以促进动物个体之间的团结协作，从而减少彼此之间的争斗。

四、动物实验操作相关问题

1、不同体重范围内一定频率下可采集的血液量

答：

参考文献: Guidelines for Survival Bleeding of Mice and Rats

2、小鼠不同给药方式的给药量分别是多少？（转自清华大学网站）

答：

3.实验动物常用麻醉剂及注射剂量（转自广东省实验动物中心）

答：常用麻醉剂主要分为注射用麻醉剂以及吸入式麻醉剂：

注射性麻醉剂：

注：IM：肌肉注射；IP：腹腔内注射；IV：静脉注射；SQ：皮下注射；PO

吸入性麻醉剂

吸入性麻醉剂作用迅速、恢复快。对大多数动物的麻醉深度的可控性和麻醉作用稳定是其优点。该类麻醉剂需要专门的设备，并持续监测动物状态。常用的吸入性麻醉剂包括氟烷（halothane）, 异氟烷（isoflurane）, 七氟烷（sevoflurane）等。

乙醚(Diethyl ether)

乙醚具有易燃易爆性，曾是广泛使用的麻醉剂和动物安乐死药物，被吸收后会广泛抑制中枢神经系统，为高度易挥发性液体，对呼吸系统有刺激性，可增加呼吸道分泌物。 乙醚麻醉过深，可抑制呼吸中枢导致动物死亡。 由于其对实验动物的造成有害作用及可能造成的人员操作危险等原因，目前已不推荐使用。

七氟烷(Sevoflurane)

七氟烷为无色透明、芳香无刺激的液体，对呼吸系统刺激小，不易燃易爆，也不与金属发生反应。七氟烷血气分配系数低，诱导期短，麻醉维持期平稳，苏醒快，是一种较为理想的吸入麻醉剂。 七氟烷对心血管影响小，且未见明显的肝损伤，有良好的肌松作用，随着麻醉的加深会加重呼吸抑制。

异氟烷(isoflurane)

异氟烷是目前广泛使用的吸入麻醉药，是无色透明的液体，不易燃烧，化学性质稳定，诱导、恢复和麻醉快速，吸入后 80% 以上以原形随呼气排出， 体内代谢少，因此，对药物代谢和毒理学实验的干扰小。 麻醉时有一定的肌松作用，不影响心肌收缩力，对肝、肾、脑也无不良影响。 深麻醉时，能引起呼吸抑制。

局部麻醉药

局部麻醉药能局部阻断神经传导，而不破坏神经组织。实验中使用的局部麻醉药有酯类和酰胺类。酯类局麻药包括普鲁卡因、氯普鲁卡因等，酯类局麻药在血浆中水解，其代谢产物对氨基苯甲酸可引起过敏反应；酰胺类局麻药有利多卡因、布比卡因等，酰胺类局麻药在肝脏内水解。

1)普鲁卡因（Procaine）：短效局麻药，起效时间1-3分钟，时效约50分钟

2)利多卡因（Lidocaine）：中效局麻药，推荐浸润浓度为0.5% - 2%，小鼠最大剂量为17.5mg/kg。起效时间1-5分钟，时效1-1.5小时。扩散和穿透力较强。

五、其他问题

1、小鼠喂食瓜子注意事项（转自清华大学实验动物中心网站）

答：最近发现同学们喂养动物时，每次会加很多的瓜子，期望动物生仔更好等。其实，这种做法是不科学的。实验动物饲料是经过科学配方的，现在用的和LabDiet_5K52是一样的最终配方，完全符合国家标准，满足动物对营养的需要。此款饲养的原料和美国不可能一样，但是最终各成分含量基本一致。LabDiet_5K52大多数JAX小鼠均饲喂这个品种，只不过饲料的灭菌方式不同，JAX是高温高压灭菌，我们是C60辐照灭菌。假如喂养过量瓜子（大于10颗/天/只）后，可能会有喂食高脂饲料的作用，容易发生肥胖，造成小鼠5-6月龄后生育力下降，影响您的实验结果。

希望同学在喂瓜子时，限量给予。另外，也不推荐同学们喂鸡蛋黄等自带饲料。

2、为什么要使用哨兵鼠？

答：哨兵鼠主要是指将背景健康的外源小鼠引入重要的繁殖饲养群体，通过直接接触目的鼠或间接接触脏垫料的方式对饲养区域进行病原微生物的检测，并替代重要饲养群体进行健康体检的一类小鼠。通常未受特定病原污染的大于4w以上健康小鼠（免疫缺陷鼠除外）可选作哨兵鼠。哨兵鼠的品系可根据需要选择，如：ICR（CD1）、BALB/c、FVB、C57BL/6等等。哨兵鼠一般2–3只一笼，放置于所在笼架的最后一个回风位。一般一笼哨兵动物监控60–100笼的饲养架。哨兵鼠所用的垫料为这些饲养笼中其它小鼠生活过的脏垫料大约每笼30–50g，且必须在脏垫料内至少持续生活4周以上。一般国标规定三个月为一个检测周期，通过对哨兵鼠的检测，可以在不影响实验动物的情况下，实监控环境中病原体的状况，保证实验动物健康和质量标准化，保障实验研究获得可重复的结果。哨兵动物检测也有局限性对于通过空气传播的，非接触性传播的病原微生物会漏检。如仙台病毒，嗜肺巴斯德杆菌等。因此建议对于随机动物也要进行检测。

六、专题-小鼠脱毛问题

小鼠脱毛的原因有很多种，主要分为2大类：

生理因素：生活习性、营养不均衡、遗传缺陷、激素紊乱、机械损伤、环境因素等。

病理因素：寄生虫感染、真菌感染及肿瘤等疾病原因。

第一类：生理因素（常见案例）

1、生活习性（典型常见案例）

引起原因：小鼠群体间有严格的阶梯等级制度，笼养的雄性小鼠常通过激烈的打斗和撕咬来巩固自己的领头鼠地位，轻者仅见脱毛，皮肤无损伤；重则表皮损伤，甚至死亡。等级确立后，小鼠们还要通过咬毛和嚼须的行为来维持相互间的关系［1］。

咬毛位置根据小鼠品系又分为2种情况：

.

咬面毛和须毛：常见于C57BL/6和C3H小鼠及其杂交一代小鼠；

.

.

咬颈毛和背毛：颈毛和背毛被咬掉仅见于C57BL/6小鼠（下图）。

.

典型特点：地位高的小鼠被毛完好，地位低的背部和颈部出现脱毛；一般是背部毛发局部整块脱落，但是皮肤无损伤。

C57BL/6领头鼠咬伤颈部和背部毛发[1]

应对措施：一般对实验无太大影响，切记不可处死小鼠。多数情况下，失毛小鼠在几周内能够重新长出被毛，可提供适当的玩具和做窝材料，以减少打斗。

2、营养不均衡（典型常见案例）

引起原因：饲料营养物质或者微量元素达不到小鼠日常摄入的需要，就会引起小鼠出现消瘦，被毛干枯、脱落，免疫力下降，甚至会影响的小鼠的生殖繁育。如一些特殊品系或品种的小鼠：免疫缺陷小鼠（NOD），糖尿病模型小鼠，或是转基因小鼠等。

典型特点：大批小鼠出现毛色暗淡、脱落、甚至出现食仔现象。如下图所示：

C57BL/6J营养不良鼠（红色箭头）与健康鼠对比（来自网络）

应对措施：营养不良会严重影响实验结果，当出现此类状况时，可适当增加瓜子花生或鸡蛋等营养、油脂含量较高食物。

3、遗传缺陷（典型常见案例）

引起原因：如一些特殊的品系的小鼠，如C57BL/6小鼠，在成长到一定周龄时，会出现脱毛现象。研究表明C57BL/6近交系小鼠毛囊结构不完整，毛囊结构出现中空，毛囊与皮肤组织之间连接松散，激活蛋白AP-1在正常皮肤毛囊中的表达强于脱毛小鼠皮肤中的毛囊［2,3］。

典型特征：一般是从靠近臀部那里开始掉毛，进而整个背部大面积逐渐脱落；并会影响同笼其他小鼠一起掉毛，但是皮肤组织完好，不会感染。

遗传因素导致的C57BL/6J小鼠脱毛

应对措施：一般这种脱毛不会对实验数据造成太大影响，可以忽略不计。

4、激素紊乱（较典型常见案例）

引起原因：当外部环境出现重大改变或者有激烈的刺激（疼痛，噪声等），小鼠出现持续的应激反应，肾上腺素分泌过量，小鼠就会出现脱毛。科学家曾通过小鼠实验，发现精神压力会使毛发生长提前结束，证明了压力会导致休止期脱发。

典型特征：先是像针一样一丛一丛掉，然后发展成一片。

应对措施：情绪紧张及焦虑等引起的脱毛，可在鼠笼里添加玩具，磨牙块等给它们减压。

5、机械损伤（较典型常见案例）

引起原因：小鼠在采食和饮水过程中肢体与食槽横杆上摩擦；或小鼠皮肤发炎出现红肿和瘙痒时，不断抹擦横杆会造成四肢脱毛；

典型特征：口鼻和头部的毛发掉落；或四肢脱毛，并且皮肤发红有伤口。

应对措施：一般可以不予处理，若出现伤口可以局部涂抹药膏。

6、环境因素（较典型常见案例）

引起原因：当屏障湿度过低会引起小鼠皮肤干燥、皮屑进而导致毛发脱落等现象；夏天温度过高或者是保育时增加了温箱内的温度，都会引起成年鼠和幼鼠毛发稀疏。

应对措施：调整动物房温湿度控制在合理范围。

第二类：病理因素（少见案例）

饲养中较为常见的的病理性因素包括了寄生虫感染、真菌感染、肿瘤等。病理性脱毛一般特征是成片脱毛，脱毛部位有皮屑，角质层增厚、并可能伴发皮炎、疱疹等症状。

1、寄生虫感染

寄生虫感染分为体内和体外，体内一般为蠕虫感染，体外一般为螨虫感染。脱毛小鼠一般表现为局部成片脱毛，表皮出现皮屑、角质增厚、结痂、抓挠引起的外伤等症状，怀疑感染螨虫，可直接刮片显微镜下判定。

显微镜下的疥螨形态

应对措施：出现此类情况小鼠直接扑杀，并且此间动物房需灭菌后方可使用；后期可在饲料中加驱虫药，定期镜检定期驱体内虫。

2、真菌感染

真菌感染表现为局部块状脱毛，断毛，脱毛表皮呈发红状，可刮片后培养判定。

图4.小孢子菌（皮肤真菌感染中较为常见的一种）

应对措施：出现此类情况小鼠直接扑杀（颈椎脱臼处死），并且此间动物房需灭菌后方可使用。

3、肿瘤等其他疾病

在实验过程，为了得到需要的实验结果，使用的药物、接种的肿瘤都有可能引起脱毛的可能，遇到这种情况时可通过查阅资料、重复实验来判定［4］。

根据经验，上述各种脱毛原因中，寄生虫感染和真菌性感染目前在我们的屏障环境中已经越来越难看到，较常见且典型的现象还是小鼠生活习性及营养失衡造成的各种脱毛现象。

Tips之应对小鼠脱毛

首先，明确是否为寄生虫感染和真菌性感染；虽这类情况在屏障中已很少见到，但我们的兽医人员和实验动物管理人员需时刻关注，防患于未然。一旦发现，要及时处置，如果发生在SPF环境中，要立即处理患病动物，并对环境实施严格的消毒。

其次，观察动物房温湿度是否在合理范围。进一步排除由小鼠的生活习性、遗传因素所引起的脱毛。检查饲料成分，如果是营养不均衡引起，可适当补充一些瓜子、花生类坚果；如营养缺失较严重，影响到了生殖繁育可以适当补充一些鸡蛋。

.

.

在实验前一周，应将所需使用的实验小鼠购入，让小鼠提前适应新环境，可减少应激对小鼠及实验结果的影响；同时，新购入小鼠需在观察室生活一周左右，以防新购入小鼠出现疾病影响其他健康小鼠。如在实验过程中，实验小鼠出现了脱毛现象，就需要考虑实验所使用药物的副作用。

.

总而言之，小鼠脱毛与人类毛发脱落一样，并非重大疾病，一般是可以缓解和恢复的，所以当实验小鼠出现脱毛现象时，不需要太着急，可以按着步骤一步一步排查，看看是上述哪种原因，若对实验结果无影响可忽略脱毛现象。

参考文献：

［1］曲平，仇志华；浅谈实验小鼠非病理性脱毛原因.

［2］王丽等；C57BL /6J近交系脱毛小鼠与正常小鼠

毛囊形态学观察及AP－1表达的差异.

［3］黄月玲等；近交系C57BL/6J小鼠的脱毛特征.