医用染色架 怎么用你问我答145：如何进行染色（瑞氏染色和吉姆萨染色）？
写在前面：
今天回答的问题是：如何进行瑞氏染色、如何进行吉姆萨染色？染色的状态又怎么判断？今天就来说说这个问题，看看是不是你要的答案。
PART01：瑞氏染色法
★原理：瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(MethyleneBlue)组成的复合染料，各种细胞成分化学性质不同对各种染料的亲和力也不一样，如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料结合后，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质；原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。本染色液经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色，细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。
★染液的配制：略。有现成的试剂，用的效果也不错，如果需要自己配制的话请参考相关资料。
★染色步骤：
★注意事项：
▼血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，必须充分干燥，否则在染色过程中容易脱落，以免影响染色效果。
▼染色时间须视何种标本、涂片厚薄、有核细胞多少及温度等而定。
▼pH值对染色有一定影响，载玻片应清洁、无酸碱污染，以免影响染色效果。
▼涂片染色中请勿先去除染色液或直接对涂片用力冲洗，不能先倒掉染液，以免染料沉着于涂片上。
▼染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。
▼染色过深可用甲醇或酒精适当脱色，最好不复染。染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液浓度。
▼瑞氏染液用前应充分摇匀，保证染色的均一性；染色液用量应充足，勿使染色液蒸发干。
PART02姬姆萨染色
★原理：姬姆萨染色液由天青，伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质，细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质，中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。
★步骤
▼滴加姬姆萨染色液A液（0.5〜0.8ml）于涂片上，并让 染液覆盖整个标本涂片染色1分钟；
▼将姬姆萨染色液B 液滴加于A液上面（滴加之量为A液的2 ~3倍）以洗耳球吹出 微风使液面产生涟漪状，使两液充分混合，染色3〜10分钟；
▼水洗（冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲去，以防有沉渣 沉淀在标本上）；
▼干燥，镜检。
★和瑞氏染色优缺点：
▼瑞氏染色：是最常用最经典的染色方法，对细胞质及中性颗粒的着色效果好，对细胞核着色不如吉姆萨染液。
▼吉姆萨染色：改进了噻嗪类染料的质量，对细胞核和寄生虫的着色较好，对细胞质和中性颗粒的着色较差。
▼瑞氏-吉姆萨染色：兼备二者优点，现在的实验室基本都是很瑞吉染色。
PART03：血涂片的观察方法
★染色标本的肉眼观察：正常血是粉红色，白血病患者细胞密度增高会呈现蓝色。
★中倍镜下观察：首先在低倍镜下观察染色是否良好。显微镜下细胞显色均匀，色泽鲜明，颜色正，红细胞呈浅红色，细胞核呈紫红色，淋巴细胞质浅蓝色，原始细胞胞质呈蓝色，细胞颗粒和染色质结构清楚，背景无染料沉渣。（具体判断后面附录有相关说明和文献报道）。同时在低倍镜下观察有没有大细胞存在，比如戈谢细胞、尼曼匹克病细胞、巨核细胞和肿瘤细胞等。
★外周血涂片油镜观察（观察方式和观察位置简图如下）
★观察内容简介
▼红细胞：有无人为造成的变形，红细胞的大小（大红细胞、小红细胞）、形状（棘形红细胞、椭圆形红细胞、泪滴样红细胞等）、染色的变化（嗜多色红细胞）、红细胞内有无异常（嗜碱性点彩颗粒豪焦小体、帕彭海姆小体、疟原虫等）、有无大小不均。
▼血小板：通过对红细胞的比较判断是否增加减少（正常情况下红细胞15-20个中有1个血小板）、血小板大小变化（巨大血小板）、血小板聚集性等。
▼白细胞：对比红细胞判断白细胞多少（正常红细胞/白细胞约500/1）、白细胞种类以及异常白细胞。
司南说：染色的过程是以说明书染色过程为主，然后根据染色液的情况（开瓶使用时间）、室内温湿度、标本的类型进行适当的调整，这个不是一个固定的模式，需要不断的去摸索，最后还是那一句：对于临检工作是细节决定成败，检以求真，验以正德！
说明：由于笔者知识储备有限、经验有限，本文主要是整理以往的资料与实际应用中的经验，仅供交流、学习与分享使用，内容不作为临床诊疗依据，如有错误请私信笔者，非商业用途，仅供专业人士参考与交流，如有侵权请与笔者联系进行删除操作，谢谢！
参考资料：
1. 尚红主编.全国临床检验操作操作规范（第四版）
2.临床检验基础实验指导（第三版）
3.临床血液及血液实验指导（第三版）
4.图片来源于网络搜索