1.凡需要进行病理组织学检查的标本(器官或组织)，离体(活体或尸体)后，应尽快置放(浸泡)于装有足够量固定液的容器中固定。固定液量应为被固定标本体积的5～10倍。置放标本的容器大小视标本和固定液的体积而定，应适当大一些。临床科室切取的标本置放于容器中固定后，应尽快送交病理科继续固定。未能及时、充分固定的干涸或腐败标本不能再进行固定和用于制作切片。

2.常规固定液为4%中性甲醛(10%中性福尔马林)。应预先多量配制贮存，以备随时使用。小标本的固定时间为4～6h，大标本为18～24h或更久。

3.根据病理学特殊检查(特殊染色和组织化学染色、免疫组织化学染色和原位核酸分子杂交染色、电镜观察等)的需要，应选用其他适宜的固定液进行固定。

4.器官、组织固定的基本方法可参见本章第四节“病理标本的肉眼检查和组织学切片取材技术”。

(1)食管、胃、肠、胆囊、膀胱等空腔器官：依规范方法剪开后，按其自然状态平铺于硬纸板上(重点暴露黏膜面或内表面的病变处)，并用大头针将标本边缘处固定于纸板上，然后放入4%中性甲醛中固定(黏膜面或内表面朝向容器的液面，并覆盖薄层脱脂棉)。

(2)肝、脾：由器官背面，沿其长轴每间隔1.5～2.0cm纵向平行剖开，切成数片。将每片肝或脾轻轻地平放于装有4%中性甲醛的容器中，容器底面衬以脱脂棉。应避免标本弯曲和相互间的叠压。

(3)肺叶：放入固定液中的肺叶漂浮于液面，须在肺表面覆盖浸含固定液的薄层脱脂棉。必要时从支气管注入适量4%中性甲醛。

(4)肾：沿肾外缘中线朝肾门方向做一水平切面(深达于肾盏)，再行固定。

(5)淋巴结：先用4%中性甲醛固定1h后，再沿其长轴切开(肿大的淋巴结可切成数片,厚2～3mm),继续固定。

(6)骨组织：先锯成小片(若是长骨应做横向锯片)，在4%中性甲醛中固定24h 后，再进行脱钙。

(7)微小组织或液体沉淀物：先用拭纸或滤纸妥为包裹(须用大头针扎牢)，然后放入专用小盒内进行4%中性甲醛固定，以防检材遗失。

凡进入固定程序的标本必须连带其正确无误的病理检验号(病理号)。

5.多数固定液对人体有害，需要防护，必须在封闭的通风条件下进行操作。

6.组织块的切取和固定。

(1)由较大标本切取用于制作切片的组织块(取材)时，应与标本的断面平行，组织块厚度一般为0.3cm(不应>0.5cm),面积一般在(1～1.5)cm×(1～1.5)cm。

(2)切取组织块的形状，在充分包括肉眼所见病变的前提下尽量规则些(例如方形、矩形、三角形等)；由一个标本切取的多块组织的形状有所不同，便于蜡块与其相应切片的核对。

(3)固定组织块的固定液量，一般应为组织块总体积的5～10倍以上。

(4)室内常温(25℃左右)下的固定时间为3～24h；低温(4℃)下的固定时间应延长。

(5)固定组织块的容器要大一些。

(6)组织块固定期间需要间断地轻摇或搅动固定液以利于固定液的渗入。

7.常用固定液。

(1)4%中性甲醛(10%中性福尔马林)固定液：

甲醛(40%)             100ml

无水磷酸氢二钠          6.5g

磷酸二氢钠                4.0g

蒸馏水                    900ml

(2)乙醇-甲醛(酒精-福尔马林，AF)固定液：

甲醛(40%)              100ml

95%乙醇                 900ml

[说明]一般组织块经乙醇-甲醛固定1～2h后，即可移入95%乙醇内脱水。

(3) Carnoy固定液:

无水乙醇                              60ml

氯仿                                  30ml

冰醋酸                               10ml

[说明]本液是组织化学染色的常用固定液，组织经 Carnoy液固定1～2h后，即可移入95%乙醇中脱水。

(4) Zenker固定液:

升汞           5.0g

重铬酸钾     2.5g

硫酸钠         1.0g

蒸馏水(加至)  100ml

[说明]配制本液时，先将升汞溶于蒸馏水中，加温至40～50℃溶解后，再加入重铬酸钾，最后加入硫酸钠，贮存待用。使用前加入5ml冰醋酸，混合。组织块需要固定12～24h。切片染色前，需要进行脱汞沉淀处理。

(5) Bouin固定液:

饱和苦味酸水溶液(约1.22%)   75ml

甲醛(40%)                25ml

冰醋酸                      5ml

[说明]本液临用时配制。组织块置于 Bouin液固定12～24h即可(小块组织只需固定数小时)。经Bouin液固定的组织被苦味酸染成黄色，可用水洗涤12h后进入乙醇脱水(兼脱色)。不必将组织中的黄色除净(残存于组织中的苦味酸无碍染色)。

(6)过碘酸-赖氨酸-多聚甲醛固定液(PLP)：

A液：赖氨酸    1.827g

蒸馏水           50ml

0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)   50ml

B液：8%多聚甲醛水溶液      100ml

[说明]本液临用时配制：取A液3份、B液1份，混合后，加入过碘酸钠，使液体终浓度为2%。组织块在4℃下固定36～54h。本液对细胞结构和抗原性保存较好。

(7)B5(醋酸钠-升汞-甲醛)固定液：

无水醋酸钠     1.25g

升汞             6.0g

蒸馏水          90ml

[说明]将以上物质混合、溶解，使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴组织。染色前应进行脱汞沉淀处理。如不加甲醛称为 B4 固定液(蒸馏水为100ml)。

(8)丙酮固定液：冷丙酮(4℃)固定液用于酶组织化学染色。细胞标本的免疫组化染色也常用冷丙酮固定 10min。

---