（1）将涂片依次放入90%、80%、70%、50%酒精及蒸馏水中各2分钟；

（2）用苏木精（Harris Hematoxylin）染10分钟，取出后用自来水冲洗两遍；

（3）在1%盐酸酒精过1～2下，取出后在自来水中冲洗，然后置稀碳酸锂液2分钟，此时涂片转成蓝色；

（4）将涂片置入50%、70%、80%及90%酒精中各2分钟；

（5）置入橘黄G⁶染液中两分钟，取出后分两次置入90%酒精中各2分钟；

（6）在EA³⁶染液中染两分钟，取出后分两次置入90%酒精中各2分钟；

（7）分两次置入无水乙醇脱水10～15分钟。若非急需可多置一段时间；

（8）分2～3次置入二甲苯中各2分钟，取出后用树脂及盖玻片封固待用。

整个染色过程约需1小时左右。

巴氏染色法试剂的配制：

（1）苏木精系常用染料，其配制方法不做介绍，并有成品可买到。

（2）橘黄G⁶（Orange G⁶）以橘黄G⁶0. 5克溶于5ml蒸馏水中，待完全溶解后加入无水乙醇100ml及磷钨酸0. 015克，用时过滤。

（3） EA³⁶，又称亮绿，由三种染料配制而成。

淡绿（light green SF yellowish） 0. 1克加95%酒精至100ml；

俾士麦棕（bismark brown） 0. 5克加95%酒精至100ml；

黄色曙红（eosin yellowish） 0. 5克加95%酒精至100ml。

然后取上述淡绿45ml、俾士麦棕10ml和黄色曙红45ml混合，再加入磷钨酸0. 2克、碳酸锂饱和液一滴即可备用。

（4）稀碳酸锂液：100ml蒸馏水加碳酸锂饱和液一滴制成。