细胞化学染色是目前各级临床实验室广泛应用的技术,主要用于血液病的诊断、分型与鉴别诊断,尤其是在基层医疗机构不能完整开展白血病形态学(Morphology)、免疫学(Immunology)、细胞遗传学(Cytogenetics)、分子生物学(Molecular biology)即MICM整合诊断模式的情况下,基于细胞形态学并结合化学或生物化学反应原理,对细胞内某些酶活性及物质成分进行定位、定性和半定量分析的细胞化学染色仍是有重要意义的检验方法。然而,目前细胞化学染色在操作流程、方法选择、结果判读标准等方面存在差异,直接影响检验结果的准确性及结果互认,在此背景下产生《细胞化学染色检验技术与结果报告专家共识》,以下简称“共识”。共识涵盖术语和定义、细胞化学染色标本要求、细胞化学染色方法、细胞化学染色结果判读、鉴别诊断的临床思维、细胞化学染色结果报告以及细胞化学染色质量管理等方面内容。旨在规范细胞化学染色操作流程,统一细胞化学染色结果的判定标准,确保结果报告能够有效辅助鉴别诊断,进而推动检验结果的互认。
本共识在国际实践指南注册与透明化平台( http://www.guidelines-registry.org)注册,注册号:PREPARE-2024CN1237。
一、共识制定的方法和过程
1.共识的提出:2024年中华医学会检验医学分会血液体液学组联合白求恩精神研究会检验医学分会细胞形态学检验诊断专委会向国内160家不同级别的医疗机构发出《细胞化学染色临床应用调查问卷》,共收到176位从事细胞化学染色的技术人员的反馈意见。问卷结果显示,普遍开展的细胞化学染色在方法选择、标本取材、染色操作、结果判读、报告规范、结果解释等方面存在差异,缺少可量化的质量指标与适宜性评价,细胞化学染色没有纳入质量管理体系等。为此,综合分析问卷反馈并认真讨论后,认为有必要解决细胞化学染色的标本要求、方法、结果判读、鉴别诊断的临床思维、结果报告以及质量管理等方面的不足,规范细胞化学染色全过程技术操作;有必要在目前尚无行业标准的情况下,就问卷中69个问题形成专家共识。
2.共识的形成:编写团队由来自23个省、5个自治区、4个直辖市的75家医疗机构从事细胞化学染色检查、血细胞形态学检查、骨髓细胞形态学检查、MICM整合诊断、临床血液病的87位专家组成,专家组分工包括执笔专家、讨论专家、审核专家。经过编写团队讨论分析、梳理并纳入共性问题,检索2001年1月至2024年12月期间本领域的相关文献,包括Pubmed、Medline、中国知网、中华医学期刊全文数据库等,检索词包括“Cytochemical staining”“Laboratory examination”“Grading standard”“Report”“Expert consensus”“细胞化学染色”“检验”“分级标准”“结果报告”“专家共识”等,文献类型包括行业标准、应用要求、共识、综述、论著、随机对照试验、队列研究等,编写团队对检索文献进行了质量评价,继续扩展检索及筛选,形成专家共识文献库。同时,编写团队借鉴专家们日常工作经验,在遵循伦理原则的基础上制定本共识。执笔专家按七个部分形成专家共识初稿;以线上会议的形式由执笔专家讨论、互审后,提出修改建议形成二稿;以函审的形式请审核专家审核、指导、提出修改意见,然后执笔专家根据审核专家提出的修改建议形成三稿;以微信群讨论、征集意见的方式征求讨论专家的意见,梳理讨论专家的建议后,由执笔专家再次修改形成四稿;再次发至讨论微信群讨论后,编写组长及执笔人以腾讯会议、电话沟通确认等方式修改审核后定稿;最后,按照编辑部稿件修回中审稿专家给出的修改建议成稿。共识形成历经1年,经不同层面认真讨论、反复修改、查新循证,旨在为各级医疗机构从事细胞化学染色的人员提供技术依据和工作参考,同时保证细胞化学染色报告的准确。
参照德尔菲法确定评审结果,将推荐等级分为4个级别。强烈推荐:该共识具有A级或B级证据支持且专家推荐率≥90%;积极建议:该共识具有A级或B级证据支持且专家推荐率≥80%,该共识具有C级证据支持且专家推荐率≥90%;一般建议:该共识具有A级或B级证据支持且专家推荐率≥70%,该共识具有C级证据且专家支持率≥80%;不推荐:该共识具有A级或B级证据支持且专家支持率<70%,该条共识具有C级证据支持且专家支持率<80%。
3.资助及利益冲突声明:本专家共识未受任何形式资助且其形成过程中未受到资助影响。共识团队全体成员均声明不存在与共识撰写内容直接相关的利益冲突,并全员签署了《作者利益冲突公开声明表》。
4. 传播与实施:(1)在相关学术期刊发表专家共识;(2)在相关学术会议中进行推广解读;(3)为细胞形态检验医师/技师及临床医师能正确理解并充分运用本专家共识,拟在不同区域进行专家共识推广;(4)在网络、微信及其他媒体进行同步推广。
二、术语和定义
1.细胞化学染色:是以细胞形态学为基础,根据化学或生物化学反应原理,选择不同化学试剂对细胞内不同成分进行染色,光学显微镜下依据呈色反应细胞的百分比与积分值判断细胞来源与发育阶段的一种检查方法,通常选用骨髓涂片或外周血涂片作为被检标本。细胞化学染色有助于了解各种细胞的化学变化和新陈代谢活动,从而推测其病理生理改变,为形态学诊断提供有力的证据,是血液病及相关疾病实验诊断的重要手段。
2.骨髓小粒:骨髓涂片中骨髓小粒为肉眼可见的,晶亮、细小的颗粒样物质,多位于骨髓涂片的尾端及两侧。光学显微镜下可见骨髓小粒由少量条索状纤维搭成网架,其间分布造血细胞和/或非造血细胞。
3.干抽:在骨髓穿刺过程中,未能抽出骨髓液的现象。其原因包括技术性因素如针头定位不准确、穿刺技术不熟练和病理原因[如原发性骨髓纤维化(primary myelofibrosis,PMF)、骨髓增生异常性肿瘤(myelodysplastic neoplasms,MDS)、恶性肿瘤、骨髓坏死等病理变化]。此外,干抽可能与骨髓细胞减少或增多有关,需结合骨髓活检进一步明确诊断。
4.阳性率:在进行某种细胞化学染色检查时,呈现阳性结果的细胞数量占总检查目标细胞数量的比例。细胞化学染色阳性率可以反映特定细胞在某种染色方法下的特征表现情况,对于疾病的诊断、鉴别诊断以及研究细胞的生物学特性具有重要意义。
5.阳性强度:是指染色反应中目标化学成分与试剂结合后显色的深浅或沉淀物的多少(半定量表达),反映该成分在细胞内的相对含量或活性。阳性强度的评估是染色结果判读的核心指标之一,阳性强度的评估对于病理诊断和治疗决策具有重要意义。
6.中性粒细胞碱性磷酸酶积分值:中性粒细胞碱性磷酸酶(neutrophilic alkaline phosphatase,NAP)存在于中性粒细胞胞质中,在不同疾病情况下其酶的活性会出现变化,可以辅助疾病的鉴别诊断。NAP积分值是在油镜下计数100个成熟中性粒细胞,将细胞染色的阳性强度(-)、(+)、(++)、(+++)和(++++)分别计为0分、1分、2分、3分和4分,累计计数100个细胞中阳性细胞积分的总和即为积分值。其他细胞化学染色项目的积分值计算方法同NAP。
7.铁粒幼红细胞:红细胞内含有的Fe2+,经铁染色后呈蓝绿色、有折光性、点状结构的铁颗粒,含有铁颗粒的幼红细胞称为铁粒幼红细胞。
8.环形铁粒幼红细胞:又称环形铁粒幼细胞,是铁染色后,胞质内普鲁士蓝染色阳性的铁颗粒≥5个且环绕核周1/3及以上的幼红细胞。
9.氟化钠抑制试验:在非特异性酯酶(non-specific esterase,NSE)染色基质液中加入氟化钠(NaF),观察NSE阳性细胞被NaF的抑制情况。原始及幼稚单核细胞NSE阳性反应可被NaF抑制,且抑制率在50%以上。
10.优片率:总体上,优片是指取材、制片、染色满意的标本涂片。将染色效果良好、细胞形态完整、核结构清晰、染色特异性强、背景清晰且无明显杂质或干扰,能准确用于观察和分析细胞化学染色特征的涂片定义为细胞化学染色的“优片”。优片占总染色片的比例称为优片率。
三、细胞化学染色标本要求
(一)标本采集和涂片制备
使用一端有磨砂区的洁净、无油污载玻片,推片前在磨砂区标注患者姓名和标本号(唯一识别号)等。骨髓液采集应由具备专业资质并受过专业培训的临床医生操作,涂片制备可由临床医生或实验技术人员完成。训练有素的实验技术人员协助骨髓液采集和涂片制备可提高标本质量。对于干抽或高凝状态的骨髓标本,需尽快涂片并在载玻片上标注涂片顺序。极度干抽时可考虑采用骨髓活检组织进行滚片或印片。
一般采用静脉血或末梢血直接制片,蘸取或滴加混匀的血液1滴(约0.05 ml)至载玻片一端1/3处,用推片以30°~45°夹角匀速推成头、体、尾分明的血膜。可依据血细胞比容、白细胞数量调整推片的角度和速度,制备的血膜长度为玻片长度的1/2~2/3。如应用骨髓液制片,应尽量蘸取骨髓小粒丰富的骨髓液进行制片,尤其对于铁染色,否则影响细胞外铁的结果判读。涂片制备方法与外周血涂片制作方法基本相同,可根据目测和首张推片时手感估计有核细胞的多少,调整推片角度以控制涂片厚薄。
共识1:建议采集新鲜的外周血或非抗凝骨髓液制备涂片进行细胞化学染色。外周血涂片适用于NAP染色。如选用骨髓涂片进行NAP染色,需考虑外周血和骨髓涂片两者积分差异。推荐强度:积极建议。
外周血涂片适用于NAP染色和外周血中存在较多需要鉴别观察的目标细胞时。部分病例外周血中原始细胞可能与骨髓中原始细胞存在分化发育差异,故使用外周血涂片进行细胞化学染色时,应予以注意。有文献报道使用EDTA-K2抗凝的外周血或骨髓液进行NAP染色、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)染色等细胞化学染色,但EDTA-K2抗凝剂对细胞内酶的活性影响说法不一,如NAP染色中多数专家认为EDTA-K2可使NAP活性降低。故采用非抗凝标本进行细胞化学染色,以便不同临床实验室的结果互认和比较。
NAP染色若遇到外周血涂片成熟中性粒细胞过少时,亦可使用骨髓涂片,但应注意外周血涂片NAP阳性率和积分高于骨髓涂片,故用于观察再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)、慢性髓性白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)等疾病疗效时,应前后标本种类一致。
共识2:一次骨髓穿刺制作6~8张或更多张涂片,操作应连贯、迅速,高凝状态时建议标注制片顺序。涂片完成后应保证尽快自然干燥。推荐强度:强烈推荐。
一般疾病骨髓涂片6~8张,疑似白血病患者8~10张或更多,确保有足够的涂片进行多种细胞化学染色。因骨髓液中的纤维蛋白原含量较高,易凝固,故制作骨髓涂片时要求操作连贯、迅速。制备完成的骨髓或外周血涂片应尽快自然干燥,不宜用吹风机加热。空气湿度大或寒冷环境中,可置于37 ℃恒温箱中保温促干。
(二)标本运送及保存
共识3:建议使用专用玻片盒进行标本运送,未及时送检标本可参照适当保存方法并按实验室文件规定存放,并防止污染。对于可能含有传染性病原体的标本,应严格按照生物安全法规和标准进行包装和运输。推荐强度:强烈推荐。
涂片标本彻底干燥后运输和送检。涂片可放置于专用标本玻片盒中,运输过程中小心轻放,避免叠放和摩擦。标本运送途中防止涂片被水汽侵袭或淋湿,冬季室外运送标本注意保温。勿将涂片与骨髓活检标本一同放置运送,以防福尔马林污染。
运送过程中注意生物安全,对于可能携带传染性病原体的标本,采用专用的生物安全包装材料及其他必要的防护措施进行包装和运输,确保整个流程符合规范要求,以防止病原体的泄露与传播。同时,包装上设置明确的标识,以便于识别和区分。
未能及时送检的标本应室温存放于环境干燥、清洁的密闭玻片保存盒内,避免阳光直射、有机溶剂污染、虫咬及水汽侵袭等对标本质量的影响。也有将骨髓涂片于染色前在空气中彻底晾干后,在潮湿环境中长期存放。未经抗凝的骨髓液涂片后,可将骨髓液放入含有EDTA-K 2抗凝液的试管中混匀保存。
保存标本时要注意未染色标本严禁放置在甲醛超标和酸碱污染的柜子或盒子中,避免细胞被固定或退化影响识别。
(三)染色前标本处理
共识4:染色前应对标本进行唯一性标识及染色项目标注。收到标本后及时固定。如不能及时进行细胞化学染色,建议对标本先进行固定处理并在规定时间内完成染色操作。推荐强度:强烈推荐。
标本应有唯一标识,防止混淆。各实验室可根据自身条件制定,如采用条码机打印条码,内容可包括标本编号、姓名、住院号/门诊号、采集时间、标本类型及染色项目等。
收到骨髓涂片和外周血涂片后,当天进行瑞特-吉姆萨染色预览判断需要选做的细胞化学染色项目。如不能及时进行下一步细胞化学染色操作,可先选取新鲜未染色涂片进行固定。不同细胞化学染色方法对标本新鲜度要求不同,为方便日常工作,未能及时染色标本可先统一在规定时间内固定,然后放冰箱冷藏保存,待染色时平衡至室温,以确保各种酶活性能够满足各种细胞化学染色要求。
用于不同细胞化学染色的涂片经固定处理后,各种酶活性维持时间不同。如用于MPO染色涂片在3 d内固定,固定后酶活性可保持90 d;NAP涂片应迅速固定,固定后2天内酶活性没有变化;酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)染色涂片经固定后需放冰箱(2~8 ℃)保存,在2 d内酶的活性无明显下降。
四、细胞化学染色方法
(一)染色目的
细胞化学染色在细胞形态学诊断中可辅助判断白血病细胞类型,可用于血液肿瘤、贫血和感染等疾病的诊断和鉴别诊断。流式细胞术分析血细胞免疫表型是目前急性白血病(acute leukemia,AL)诊断必不可少的检验技术,但也会存在干扰与系别难以判断的情况。2022年,世界卫生组织更新的第5版造血与淋巴组织系肿瘤诊断和分类(The 5th edition of the World Health Organization Classification of HaematolymphoidTumours,WHO-HAEM5)指出,MPO染色可与流式细胞术免疫分型相结合来鉴别AL原始细胞的系别,MPO染色等是对免疫表型分析的补充;铁染色对于MDS伴低原始细胞和SF3B1突变(MDS-SF3B1)、MDS/MPN-SF3B1-T的诊断是对除SF3B1基因突变检查之外的补充,是铁粒幼细胞贫血(sideroblastic anemia,SA)诊断的重要检查方法。因此,尽管血液病诊断技术在不断发展,但细胞化学染色仍是诊断血液系统疾病不可缺少的手段之一。
(二)项目选择
根据骨髓细胞形态学检查结果和临床信息初步判断疾病类型的可能性,以疾病为导向选择不同的细胞化学染色,常见疾病细胞化学染色项目的选择见 表1。
共识5:根据疾病的不同类型和诊断目的选择相应的细胞化学染色项目:诊断特定疾病时用能显示疾病特征的染色;鉴别诊断时选择可区分不同疾病或亚型的染色;复杂疾病采用多种方法联合染色。推荐强度:强烈推荐。
细胞化学染色在细胞类别识别、血液病诊断和鉴别诊断中发挥重要作用,是细胞形态学诊断中重要辅助检验项目。对于已知特定疾病特征的病例,选择能够明确显示这些特征的染色项目,比如MPO为识别粒系成分的首选。在疾病鉴别诊断中,选择能够区分不同疾病或疾病亚型的染色方法,例如,铁染色用于鉴别缺铁性贫血和铁利用障碍性贫血,前者细胞内、外铁均减少;后者细胞内铁减少,外铁正常或增加。同时铁染色也是贫血时必检项目。对于复杂疾病或需要综合评估的情况,选择多参数联合染色方法。例如,急性白血病的诊断中,可以联合使用MPO、氯乙酸AS-D萘酚酯酶(naphthol AS-D chloroacetate esterase,NAS-DCE)、α-醋酸萘酚酯酶(alpha-naphthyl acetate esterase,α-NAE)等多种染色方法,根据染色结果是否阳性、阳性强度和阳性反应物的分布特征评估细胞的酶活性和细胞类型。
细胞化学染色方法选择同时兼顾实际需求和实验室条件。对于急需快速诊断的情况,应挑选操作简便、耗时短的染色方法。此外,还需依据实验室的设备与资源状况来确定染色方法,设备有限时,优先选择无需复杂设备的染色方式,以保障诊断工作顺利开展。
共识6:贫血首选骨髓铁染色,感染性疾病选择NAP染色,MPN、MDS可分别选择NAP染色、铁染色辅助诊断,AL需借助MPO等多项染色,对于少见疾病选择相应特定的染色方法。推荐强度:强烈推荐。
1.贫血:骨髓铁染色是诊断铁缺乏的“金标准” ,也是评估红系细胞铁利用障碍的常用手段,是用于贫血诊断与鉴别诊断的首选细胞化学染色项目。过碘酸希夫(periodic acid-Schiff,PAS)染色主要用于红系发育异常的识别,根据幼红细胞阳性率及阳性产物分布特征可鉴别相关疾病。NAP染色对于AA的诊断及阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)的鉴别有一定价值。
2.感染性疾病:细菌感染,尤其是化脓性感染引起类白血病反应时,NAP染色阳性率及积分常显著增高。病毒、支原体、衣原体、立克次体及寄生虫感染时,NAP染色阳性率及积分常无明显改变或略低。NAP染色主要用于白细胞增高时感染与CML的鉴别。
3.骨髓增殖性肿瘤:NAP染色不仅可辅助骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms,MPN)的诊断及鉴别诊断,对MPN的疗效观察、缓解与复发的监测也有一定的参考意义。CML慢性期时NAP阳性率和积分减低,如经治疗有效时NAP上升;而原发性血小板增多症(essential thrombocythemia,ET)、真性红细胞增多症(polycythemia vera,PV)、慢性中性粒细胞白血病(chronic neutrophilic leukemia,CNL)的NAP阳性率和积分常较治疗前降低,且与骨髓的缓解程度呈一定的相关性。
4.骨髓增生异常性肿瘤:WHO-HAEM5强调MDS的肿瘤性变化,MDS可出现铁摄入与代谢紊乱,幼红细胞中铁颗粒增加,环形铁粒幼红细胞可增多,当不能进行SF3B1突变分析时,可参照环形铁粒幼红细胞≥15%提示或考虑MDS-SF3B1的可能。PAS染色幼红细胞的阳性程度反映了MDS的恶性增殖。因此,疑似MDS病例可选择铁染色、PAS染色。如果有原始细胞或原始细胞等同细胞增多需要鉴别其系列时,可选择MPO染色等其他染色。
5.骨髓增生异常/骨髓增殖性肿瘤:骨髓增生异常/骨髓增殖性肿瘤(myelodysplastic/myeloproliferative neoplasms,MDS/MPN)是一组同时具有骨髓增生异常肿瘤与骨髓增殖性肿瘤特征的克隆性造血系统肿瘤。慢性粒单细胞白血病(chronic myelomonocytic leukemia,CMML)、骨髓增生异常/骨髓增殖性肿瘤伴中性粒细胞增多(myelodysplastic/myeloproliferative neoplasms with neu trophilia,MDS/MPN-N)一般不需要做细胞化学染色,当细胞发育异常导致粒系、单核系较难鉴别时,可选择做MPO染色、PAS染色、NAS-DCE染色、α-NAE/α-丁酸萘酚酯酶(alpha-naphthol butyrate esterase,α-NBE)染色+NaF抑制试验等。红系发育异常伴有环形铁粒幼红细胞增多是MDS/MPN-SF3B1-T的重要形态学特征,故铁染色可显示细胞内铁增多,环形铁粒幼红细胞增多;PAS染色可见幼红细胞呈弥散阳性。
6.急性白血病:细胞化学染色用于AL原始细胞的系别鉴别时,MPO染色是识别髓系成分的首选染色项目,并需结合其他多项染色结果(PAS染色、α-NAE/α-NBE染色+NaF抑制试验、NAS-DCE染色等)综合分析。WHO-HEAM5中明确提出MPO染色可与流式细胞术免疫表型分析相结合为原始细胞的髓系来源提供依据,而NSE染色可为单核系来源提供依据,NAS-DCE染色可为粒细胞来源提供依据。苏丹黑B(Sudan black B,SBB)染色阳性率高于MPO染色,有时可见SBB染色阳性而MPO染色阴性的细胞,有条件的实验室可选做SBB染色,与MPO染色结果互相补充。PAS染色在观察阳性反应物分布特征方面对区分细胞系别类型具有提示作用。
7.淋巴细胞增殖性疾病(lymphoproliferative disorders,LPD):某些特殊的LPD可用细胞化学染色鉴别。如毛细胞白血病(hairy cell leukemia,HCL)细胞的ACP染色呈中等强度至强阳性,且抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色阳性[不被L(+)-酒石酸抑制];其他LPD的ACP染色阳性,并可被L(+)-酒石酸抑制。T细胞大颗粒淋巴细胞白血病(T-cell large granular lymphocyte leukemia,T-LGLL)的NAS-DCE染色阳性,而其他LPD均为阴性。
8.当疑似肥大细胞和嗜碱性粒细胞相关疾病时,可选择甲苯胺蓝染色。
9.戈谢病(Gaucher disease,GD)与尼曼-匹克病(Niemann-Pick diseae,NPD)鉴别时,可选择PAS染色、ACP染色方法进行鉴别,戈谢病时PAS染色和ACP染色均阳性,尼曼-匹克病时ACP染色阴性。
(三)操作规范
细胞化学染色试剂可分为商品化试剂盒和实验室自配试剂。商品化试剂盒的试剂配制及染色步骤应按试剂说明书规范操作。自配试剂的配制及染色步骤应有文献支持,并做好质量评估和监控。细胞化学染色过程一般包括:固定、显色及复染。各临床实验室应建立自己的细胞化学染色标准操作程序(standard operating procedure,SOP),并严格按照SOP进行操作与质量管理。
共识7:建议临床实验室建立本室的细胞化学染色标准操作程序,并严格按照标准操作程序执行。推荐强度:强烈推荐。
细胞化学染色SOP内容可包括试剂配制、固定和染色时间、pH测试,以及冲洗步骤、时间、方式等;应对实验环境做出规定,确保实验条件稳定、环境清洁、温度适宜、湿度适中等;应根据不同染色特点,对试剂、标本、染缸进行前处理,并规范处理流程。
1.使用试剂盒依据说明书要求,所有试剂使用前应恢复至室温,用前摇匀试剂,工作液配制时要充分混匀,并于使用前新鲜配制,在10 min内使用。若工作液配制后液体颜色改变,说明工作液没有充分混匀或试剂可能失效,这可能会导致染色失败。一些细胞化学染色的复染液最好于常温储存,如NAP染色、PAS染色、NAS-DCE染色、α-NAE染色和α-NBE染色等;一些细胞化学染色试剂应避光保存,如NAS-DCE染色试剂盒中的氯乙酸AS-D萘酚溶液、铁染色试剂盒中亚铁氰化钾溶液等。
2.使用自配染色试剂时,同一细胞化学染色可能有多种染色方法,应注意选择结果稳定、操作简便、阳性结果明显的方法,如MPO染色常用二氨基联苯胺法。配制试剂时,应确保使用的容器干净,无污染。一些细胞化学染色的基质液和/或染色液需要临用前新鲜配制,配好后立即使用,如MPO染色的H 2O 2溶液、铁染色的亚铁氰化钾溶液等。
3.染色过程中,所有染色水洗时均应使用流动水冲洗,但水流不宜过大过急,防止血膜被冲掉。染色架及染缸使用后需要消毒、冲洗,干燥后备用。细胞化学染色后的涂片应及时镜检观察,若放置时间过长,阳性反应开始逐渐褪色;必要时可进行封片处理,以减缓褪色。
五、细胞化学染色结果判读
共识8:不同细胞化学染色项目的判读结果各不相同。判断是否阳性时,依据胞质内有无特定颜色沉淀或颗粒;判断阳性程度分级,从无阳性表现到颗粒数量、分布模式及颜色深浅等不同程度划分。各染色项目涉及不同方法,颜色表现有差异,判读时应严格按照对应标准执行。推荐强度:强烈推荐。
同一种细胞化学染色因实验方法学(包括底物、重氮盐选择)不同,其染色后所呈现的颜色也有所差异。细胞化学染色的结果判定和阳性分级见 表2。
结果判定过程中,使用统一的分级标准。
共识9:部分细胞化学染色参考区间没有统一规定,建议各临床实验室结合自身实验条件及染色方法建立本实验室参考区间并进行验证。推荐强度:积极建议。
不同细胞化学染色方法因所选试剂不同、方法不同,会出现参考区间的不同。实验室可依据染色项目试剂说明书的要求或文献报道验证后确定本实验室的参考区间;或依据不同试剂、不同方法来建立本实验室的参考区间。
1.NAP染色常用偶氮偶联法,不同文献报道的NAP染色参考区间不同,阳性率多为30%~70%,阳性积分多为35~100分或30~130分。因各实验室采用的方法及实验条件不同,参考区间也有差异。
2.MPO染色包括复方联苯胺法、二氨基联苯胺法、四甲基联苯胺法、改良的Pereira染色法等,国际血液学标准化委员会推荐使用二氨基联苯胺法。
3.PAS染色应用过碘酸希夫反应。
4.铁染色常用普鲁士蓝反应。细胞外铁至少观察3个骨髓小粒,参考区间(+)~(++)。由于各临床实验室的实验条件不同,细胞内铁即铁粒幼红细胞的百分率的参考区间存在差异,有文献报道细胞内铁参考区间25%~90%、12%~44%、27%~94%,选择使用前需进行验证。
5.NAS-DCE染色常用方法为偶氮偶联法。
6.α-NAE染色(α-NBE染色)+NaF抑制试验常用方法为偶氮偶联法。NaF抑制试验大多数文献均采用抑制率超过50%为抑制试验阳性。
7.ACP染色与TRAP染色常用方法为偶氮偶联法。
六、鉴别诊断的临床思维
细胞化学染色鉴别诊断是通过多种染色方法,根据染色结果的阳性与否、阳性强度及阳性反应物的分布特征,对细胞进行系别判断,从而为形态学诊断提供重要补充和支持。
有诊断意义的染色包括MPO染色、NAS-DCE染色、NSE染色和NaF抑制试验、甲苯胺蓝染色、铁染色等。染色阳性强度有意义的染色主要有MPO染色、NAP染色等。阳性反应物分布特征有意义的染色有α-NAE染色和PAS染色等。
(一)贫血的鉴别诊断
1.通过铁染色可了解体内铁的储存和利用情况,如细胞外铁减少或消失表示骨髓储存铁已耗尽。若患者为小细胞低色素性贫血,而细胞内、外铁正常至增多,除地中海贫血外提示铁利用障碍。
铁染色可用于鉴别铁缺乏和铁利用障碍:(1)IDA细胞外铁消失,细胞内铁减少或缺如;(2)铁利用障碍性贫血如SA、MDS、急性红白血病等细胞外铁增多,细胞内铁增多,可见环形铁粒幼红细胞;(3)铁代谢异常性慢性贫血为细胞外铁增多或正常,细胞内铁减少。铁染色鉴别缺铁性贫血与非缺铁性贫血见 表3 。
2.PAS染色可用于辅助MDS、AEL及贫血类疾病的鉴别诊断:MDS和急性红白血病的幼红细胞PAS染色常呈阳性,且研究发现急性红白血病时平均PAS阳性率高于MDS患者,其他类型贫血中的幼红细胞PAS染色大多数呈阴性,阳性率和阳性反应强度较低。
3.AA和PNH鉴别时,NAP染色在前者积分增高、后者积分减低。AA患者无论早期、晚期、典型、不典型以及治疗前后,其NAP酶活性均处于特异性和敏感性的高峰点状态,因此NAP染色可作为AA重要的特异敏感性诊断指标。AA在缓解期NAP积分有下降趋势,但很难恢复正常。
共识10:在贫血的诊断和鉴别诊断中,铁染色、PAS染色可提供重要信息。贫血病因的准确诊断,需综合评估病史、治疗史等临床信息和实验室指征(包括铁代谢、叶酸、VitB 12、溶血相关检查等),必要时需结合遗传学、流式细胞学检查。推荐强度:强烈推荐。
(二)骨髓增殖性肿瘤的鉴别诊断
NAP染色可为MPN各亚型的诊断提供线索。MPN通常具有特征性分子生物学异常和病理组织学特点,诊断和鉴别诊断应综合考虑。
细菌感染引起的类白血病反应,NAP染色阳性率和积分常增高。CML慢性期NAP染色阳性率及积分显著降低甚至为0,若合并感染、妊娠或发生急变等,NAP染色阳性率及积分可增高;CNL的NAP染色阳性率及积分常明显增高,大部分病例有CSF3R基因突变;PMF、ET及PV的NAP染色阳性率及积分常增高,这类疾病多具有MPN驱动基因。
共识11:在MPN的诊断和鉴别诊断中,NAP染色有一定的辅助诊断意义。推荐强度:积极建议。
(三)急性白血病的鉴别诊断
用于急性白血病的鉴别诊断的细胞化学染色有MPO、SBB、NAS-D CE、α-NAE/αNBE、α-NAE/αNBE+NaF和PAS,常见不同类型白血病的细胞化学染色结果见 表4。
1.MPO染色阳性的原始细胞鉴别:粒系原始细胞MPO染色一般为阳性或强阳性,α-NAE/α-NBE染色阳性或阴性,阳性不被NaF抑制。单核系原幼细胞的MPO染色呈阴性或弱阳性。
2.MPO染色阴性的原始细胞系别鉴别:MPO染色阴性的原始细胞,可能来源为单核系、红系、巨核系、淋系、分化差的粒系原始细胞、混合表型或系列不明原始细胞、母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤,以及非造血细胞来源的转移肿瘤。MPO染色阴性、形态特征倾向淋系来源的,还需要与具有原始细胞形态特征的成熟淋巴细胞淋巴瘤相鉴别。原始细胞MPO染色阴性时,主要依据PAS染色、NAS-DCE染色、α-NAE和α-NBE染色进一步鉴别系别来源。
(1)急性髓系白血病微分化型的原始细胞MPO染色阴性或阳性率<3%;NAS-DCE染色阴性;α-NAE染色阴性或弱阳性,阳性反应物不被NaF抑制;PAS阴性或阳性。
(2)急性单核细胞白血病的原幼单核细胞,PAS染色弱阳性或阴性,α-NAE/α-NBE染色阳性或阴性,阳性反应物呈有色沉淀,被NaF抑制。
(3)AEL的原始红细胞,PAS染色多呈阳性,阳性反应物多为粗颗粒状、珠状、块状,围绕核排列,不盖于核上;中、晚幼红细胞呈细颗粒弥散状阳性。α-NAE染色呈弥漫状阳性或阴性,不被NaF抑制。NAS-DCE染色阴性或弱阳性。
(4)急性巨核细胞白血病的原始巨核细胞,PAS染色阴性或阳性,阳性反应物多呈粗颗粒、珠状、块状,散在分布,可覆盖于核上;部分原始巨核细胞的阳性反应物可呈细颗粒弥散状。NAS-DCE染色阴性。
(5)母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤的原始细胞PAS染色可呈阳性,阳性反应物多为珠状、颗粒状或大块状阳性。
(6)急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)的原淋巴细胞PAS染色可呈阳性,阳性反应物多为粗颗粒、珠状,粗颗粒时多绕核排列,胞质背景清透无色;α-NAE染色呈阴性或颗粒状阳性,不被NaF抑制。
(7)急性嗜碱性粒细胞白血病与肥大细胞白血病的肿瘤细胞甲苯胺蓝染色均为阳性,NAS-DCE染色在前者阴性、后者阳性,有助于二者鉴别。
3.细胞化学染色用于急性白血病的鉴别诊断思路:(1)急性白血病的鉴别诊断,首先应选择MPO染色对原始细胞进行初步的系别来源判断,再进一步分析NAS-DCE、NSE、PAS等其他染色结果,结合细胞形态学对原始细胞系别作出初步判断。(2)MPO染色阳性的原始细胞,可能为粒系或单核系来源。MPO染色阴性的原始细胞亦不能排除粒系或单核系来源,发育异常或缺乏MPO的粒系细胞(包括原始粒细胞、幼稚粒细胞和成熟阶段粒细胞),其MPO染色可以是阴性,如MDS和CML急变时的原始粒细胞其MPO染色可为阴性,发育异常的成熟阶段粒系细胞其MPO染色可为阴性或弱阳性。(3)部分淋系肿瘤的原始细胞MPO染色偶见呈弱阳性,而其免疫表型分析无其他髓系抗原表达,此时单纯形态学和细胞化学染色应谨慎得出诊断倾向,最终诊断结论需整合瑞吉或瑞氏染色细胞形态学和细胞化学染色、流式细胞学、骨髓病理组织学、细胞遗传学和分子生物学等检查结果。(4)NSE染色包括α-NAE染色和α-NBE染色,区别在于酶反应的底物不同。NSE染色单核系细胞的阳性反应可被NaF抑制,而粒系细胞及其他系细胞的阳性反应则通常不能被NaF抑制。
共识12:MPO染色是判断髓系细胞分化的敏感的指标,但并非所有髓系来源原始细胞均呈阳性,如果形态与系别特征不明显,仅MPO染色阳性,特别是弱阳性或阳性率较低时,不建议直接诊断为急性髓系白血病,建议结合免疫表型、细胞遗传学和分子生物学检查等更多证据,综合诊断。推荐强度:强烈推荐。
共识13:NSE染色阳性是单核系细胞分化的重要特征,在鉴定系别时,建议结合酶型及NaF抑制试验。推荐强度:积极建议。
共识14:在AL的诊断和鉴别诊断过程中,建议结合细胞形态学特征并选择多种细胞化学染色项目,以提高诊断准确性。推荐强度:强烈推荐。
(四)其他疾病鉴别诊断
1.尼曼-匹克病(NPD)和戈谢病(GD)的鉴别诊断:PAS染色和ACP染色可用于二者细胞的鉴别。戈谢细胞PAS染色和ACP染色强阳性;尼曼-匹克细胞PAS染色阴性或空泡壁弱阳性、空泡中心阴性,ACP染色阴性或弱阳性。铁染色时出现弥漫性铁摄取的巨噬细胞,应高度怀疑戈谢病,建议结合临床表现完善适当的相关检查。
2.PAS染色辅助鉴别胞内微生物感染:PAS染色新型隐球菌的菌体和荚膜均阳性;马尔尼菲篮状菌的细胞壁阳性,胞质弱阳性或阴性,部分菌体有清晰的紫红色横膈;荚膜组织胞浆菌的胞壁阳性呈红色且清楚连续,胞内容物不易着色,细胞壁外空晕(荚膜)阴性,不着色。杜氏利什曼虫无鞭毛体(利杜体)胞壁不着色或着色浅或细颗粒状而不连续,而胞内容物阳性呈红色,较胞膜着色深而清楚。胞内真菌感染的临床诊断较困难,菌种鉴别以真菌培养鉴定和分子生物学检测结果为准。
共识15:PAS染色可以在形态学基础上对戈谢细胞、尼曼-匹克细胞、胞内真菌及杜氏利什曼虫无鞭毛体(利杜体)的鉴别起到辅助作用,但明确诊断需要结合遗传学、真菌培养、血清学、分子生物学检查等多种检测手段。推荐强度:积极建议。
七、细胞化学染色结果报告
完整的检验诊断报告内容应包括检验信息、检测结果和检验诊断3个部分。
共识16:细胞化学染色报告内容要规范,至少涵盖细胞化学染色名称、选择的方法、染色结果和结论。结合骨髓细胞形态学与临床信息,尽可能报告出现阳性结果的结论,如可能的疾病或原因,必要时给出进一步检查的建议。推荐强度:强烈推荐。
1.细胞染色结果使用分级系统(如-、+、++、+++、++++),如果必要,提供每种染色细胞阳性率及积分值,NaF抑制试验需要报告抑制率。对于不能简单以数据表达的染色结果,例如染色特殊结果、异常染色处理等,可以文字表述,但不做结果评价,对于取材、涂片欠佳的标本如需采取让步检验,亦应在报告中给予适当描述说明。如实验室信息系统支持发布图文报告,建议每种细胞化学染色配以典型显微镜视野图片1~2张。
2.细胞化学染色结论应基于相关检验信息、骨髓细胞形态学和细胞化学染色结果,并结合临床综合作出结论。如MPO染色的强阳性,阳性率95%,提示急性早幼粒细胞白血病可能性大;若不能明确给出结论的,则应对染色结果作出描述,或提出进一步检查的建议。对于单独的细胞化学染色,不宜独立作出疾病诊断,建议给出描述性结论。细胞化学染色结果与骨髓细胞形态学为一体的结果报告,可提高形态学诊断的准确率。
3.重视细胞化学染色结果作出结论前与临床的沟通,充分了解患者临床信息,如病史情况,特殊体征(是否有肝、脾、淋巴结肿大,以及骨痛、齿龈肿胀)等,在综合多种证据的基础上,客观、全面分析后作出结论。
4.具有授权的人员出具细胞化学染色结果报告和结果分解释,如当细胞化学染色与骨髓细胞形态学结论不一致时、与临床诊断不符合时、无法做出疾病诊断定性或分型时,应充分讨论不一致的原因,为明确诊断可进一步选择实验室项目。
共识17:细胞化学染色报告格式由实验室设计,经与临床讨论确定,兼顾双方需求。推荐强度:强烈推荐。
细胞化学染色结果报告的格式应广泛征求临床科室意见,由实验室设计,结合自身的检验流程特点,应包含检验信息、检测结果和检验诊断各项内容,报告格式和填写栏目应具有简明、使用方便和重点项目有醒目标志的特质,既方便实验室的结果录入和发布,又方便临床查看报告,最终报告格式由实验室与临床讨论后决定。
八、细胞化学染色的质量管理
质量控制措施主要包括:内部比对、人员考核与能力评估、仪器设备维护保养与校准、环境条件管理、质控对照与实验室间比对。
共识18:定期或不定期的人员比对、人员考核与能力评估,以保证细胞化学染色人员的能力水平;对仪器进行定期校准,以保证其准确性和可靠性;在没有室间质评的情况下进行实验室间比对,必要时定期对照细胞化学染色结果与骨髓活检、临床诊断或骨髓细胞形态学诊断的一致性,以保证实验室出具细胞化学染色结果报告的准确性。推荐强度:强烈推荐。
1.内部比对:细胞化学染色的内部比对主要包括人员比对、试剂比对,以确保细胞化学染色效果和结果判断的一致性。
(1)人员比对:如果两人以上从事日常细胞化学染色检查时,建议进行细胞化学染色操作及结果判读的人员比对,人员比对的目的是保证细胞化学染色结果报告的一致性。人员比对时,对不同染色项目如NAP染色、MPO染色、PAS染色、NSE染色、铁染色等各选择5份涂片标本,染色后由比对人员进行结果判读;以细胞化学染色授权签字人、形态学主管或其中一名资深检验人员的结果为标准,参与比对人员的镜检结果与其比较,阳性偏差不超过1个等级且阴性不能为阳性、阳性不能为阴性视为符合,人员比对符合率应≥80%,即5份标本中至少4份符合;人员比对至少每6个月比对一次,每次比对使用不同染色项目、不同染色结果的细胞化学染色标本。
(2)试剂比对:是对更换染液前、后细胞化学染色效果的比对,试剂比对的目的是评价新染液的染色效果。通常选择5份标本,每份标本制片2张,分别用新、旧染液进行染色,显微镜下观察染色效果,染色效果满意率≥80%,即5份标本中至少4份染色满意则可使用新染液。
2.人员考核与能力评估:人员考核是为保证细胞化学染色结果判读的准确性,定期或不定期的能力评估有助于从工作能力和表现方面保证结果报告质量。
人员考核通常选择不同细胞化学染色项目的50个形态学图像,识别染色结果,如呈色反应(阳性率、阳性程度)、铁粒幼红细胞、环形铁粒幼红细胞、细胞外铁及程度判断、抑制率等。人员考核合格分值至少应≥80分,合格率应≥80%。人员考核应每半年一次,人员能力评估每年一次,但新员工在最初6个月内应至少进行1次能力评估。离岗6个月以上,进行再培训、再考核和再评估。
3.仪器设备维护保养与校准:细胞化学染色所使用的仪器设备,如显微镜、水浴箱、天平、酸度计、加样器等,需定期维护保养与校准,以确保其准确性和可靠性。维护保养与校准的频率取决于仪器的使用频率和实验室的标准操作规程。
4.环境条件管理:细胞化学染色检查的环境控制是为保证染色、阅片的效果和涂片存储的质量。环境控制包括自然光线、照明、噪声等基本环境条件,以及适宜的温度、湿度,还包括空间条件如染色区、镜检报告区、资料(玻片、记录)储存区等。实验室宜参照染液说明书设置目标温度和允许范围并进行监控及记录,还应有温度失控时的处理措施及记录,记录形式可为电子温控系统。
5.质控对照:可采用外部对照(染色阳性和染色阴性的标本)和/或内部对照。尽量选择新鲜标本进行质控对照。判断对照标本中应该存在的阳性细胞与阴性细胞是否失控,如呈现阳性反应的细胞出现阴性,或阴性的细胞出现阳性,首先应考虑技术原因或试剂因素造成的失控。
6.实验室间比对:在目前细胞化学染色尚无室间质评的情况下,实验室间比对是细胞化学染色结果报告准确性的评价方法之一。
比对实验室的选择通常是中国合格评定国家认可委员会(CNAS)医学实验室质量与能力认可的实验室,且骨髓细胞学检查与细胞化学染色是认可项目的实验室。比对方法通常由被比对实验室选择附有报告结果的5份细胞化学染色标本,以盲法送给比对实验室,由比对实验室判读并出具报告结果。比较两个实验室间的报告结果,被比对实验室的报告结果与比对实验室的报告结果符合率(一致性)应≥80%,至少进行每年两次的实验室间的比对。
必要时,细胞化学染色结果的准确性评价也可参考骨髓活检、临床诊断或骨髓细胞形态学诊断,分析其结果是否一致。因此实验室应定期(建议每3个月至少一次)分析结果的符合率(一致性),以保证细胞化学染色结果报告的正确性。
共识19:建立细胞化学染色全流程质量指标,质量指标包括但不限于不合格标本率、优片率、人员比对符合率、人员考核合格率、实验室间比对符合率(一致性)、细胞化学染色阳性报告与阴性报告的复核率、细胞化学染色结果报告与病理活检或临床诊断或骨髓细胞学诊断的符合率(一致性),定期进行质量指标的适宜性评价。推荐强度:积极建议。
细胞化学染色过程中每一环节的质量关系到细胞化学染色结果,依据细胞化学染色结果有助于进行疾病的鉴别诊断如白血病类型的确定与鉴别、类白血病反应与CML的鉴别、IDA与非缺铁性贫血的鉴别等。因此建立的细胞化学染色全过程的质量指标是必要的。通常质量指标包括但不局限于:不合格标本率、优片率、人员比对符合率,人员考核合格率、实验室间比对符合率(一致性)、细胞化学染色阳性报告与阴性报告的复核率、细胞化学染色结果报告与病理活检或临床诊断或骨髓细胞学诊断的符合率(一致性) 。通常,质量指标的限值应满足行业标准的要求,在没有行业标准的情况下,实验室应与临床沟通,在满足临床需求、保证结果准确的前提下制定质量指标及限值,纳入质量管理体系中进行监测,并至少每年进行适应性评价。
综上所述,《细胞化学染色检验技术与结果报告专家共识》中对细胞化学染色的标本要求、项目选择、结果判读、鉴别诊断的临床思维、结果报告以及质量管理等方面的临床问题形成共识19条,旨在促使细胞化学染色检验技术应用规范化,促进细胞化学染色检验技术不断推广和应用。在共识制定过程中,虽已广泛收集检索文献,集思广益,但仍难达到面面俱到,还希望同道们在细胞化学染色检验技术应用的实践中,尽量做到细胞化学染色检验的规范化与一致化,同时紧密跟踪临床最新进展,综合兼顾临床需求,结合血液病MICM多学科综合诊断的建议,作出正确的疾病诊断与鉴别。
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要按耐得住,且干且珍惜,劝你再难都不要轻易离开公立医院!
校长雨中演讲,两学生撑伞式浇头,原来是这么个“双一流”!
医生绩效负750.81元,要付费上班?负绩效是怎么回事?
累计融资民币49亿元,丁香园要首次公开募股 IPO?
一附院工作人员上班期间玩游戏?市卫健委回复……
江苏门诊量第一的医院落地重庆,9月中旬全面投入运营!
女子身体不适退健身卡竟要被扣总费用的35%?法院如何判决?
“抗日战争”为什么不宜简称为“Anti-JapaneseWar”?英文该怎么说?
2025年九三阅兵完整视频!(收藏版)
工伤认定:“时间合理”才能认定为“上下班途中”
男子凌晨1点去急诊换药,医生果断拒绝!到底对不对?
吃瓜!知名药企的药学女博后“出轨”高管:开挂升级,年薪100万
中年男子,同房时发生“性猝死”,提醒:办事时避免四事
网传某大学肿瘤医院90后医生「过劳猝死」,年仅34岁……
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战友吐槽:医生直接被禁用中成药!这医生还怎么当?
看了这个,你还会觉得医生的收入高吗?
医务人员薪酬调整后,医生护士的工作热情还能保持吗?
患者车祸伤,医生查梅毒,遭家属举报过度医疗!?
卵子在等你,精子在等死!八成男性在拖垮备孕计划!
70岁老头,发热、头痛 5 天,降钙素原>100ng/ml!
刑罚后再次非法行医,陈某某被判有期徒刑!
为什么有贪官?这是我看到的最好回答!
打响第一枪!从“胶片”到“云端” ,全国首例数字化医用耗材集采落地贵州!
你和她/他都过七夕了,还不快来学学如何避孕?
在这个大三甲医院,当医生不互相帮助,当科室间不互相协作……
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虎门无犬子!都是心血管病领域杰出专家!院士张运之子张澄入选候选院士名单!
医务人员竟因服务态度不好被告上法庭
无偿献血被抹黑,造谣者被处罚(记者调查!视频解读!)
医科大学党委副书记、校长涉嫌严重违纪违法被查!
这样使用复方甘草片,刑拘!
护理专业学生被学院安排到电子厂实习???官方回应!
免疫检查点抑制剂相关肺炎诊治和管理专家共识 2025
医科大学附属医院,2年3次变更医院名称!
租下县人民医院后,原外科医生、县政协副主席、副县长非法集资近7亿!
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北京协和医院刘大为:临床医师的位置
女子住院期间从病房坠亡,家属起诉索赔47万被驳回!
医生拒绝按患者要求开处方,被投诉!
一家三甲医院突发大火,官方通报!起火原因正在调查中!
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痰培养对评估细菌性肺炎的作用
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抗微生物药物耐药性的基本概念:固有性耐药 vs 获得性耐药,组成型耐药 vs 诱导型耐药,异质性耐药
官方通报:首席科学家、遵义医学院党委书记石京山,搞权色交易、赌博
警示!疫情防控不力,三家医疗机构被立案!
某市某某医院多人共同伪造病历资料!
赣南医科大学第一附属医院发布《医院严正声明:呼吁当事人停止网暴》
“告官能见官”,湖南省卫健委主任李小松出庭应诉!
省卫健委发布《关于撤销王某某医师资格证的公告》!
文科生圆梦中医!中医有着天然的“文科基因”,文科生应享有学习中医专业的公平权益
四川大学华西第四医院被卫健部门立案调查
关于临床指南的觉悟:庄子“轮扁斫轮”的故事
这家二级康复医院发布公告,决定暂停运营!
这家医院成立21年,负债总计121.53万而被抛售,转让底价20万!
三甲医院发文:科主任男54岁、女50岁,须退出管理岗位,新任科主任年龄不得超46岁!
女子出差时被领导性侵,认定工伤获赔113万元!国内首例获工伤认定的职场性侵事件!
市第六人民医院党委书记涉嫌严重违纪违法,主动投案!
女医药代表给予2家医院33名医生回扣,共计192.6288万,法院判了!
钟南山在《人民日报》撰文:如果不做医生,或许会成为一名专业运动员
年仅30岁的于鸿庆医生不幸牺牲!市委批准同意追认为中国共产党党员!
四川省人民医院通报“弄错患者CT影像”!
天天抓考勤,每次上下班医务人员排队刷脸,成为一道亮丽的风景线!
网传大学41岁青年副教授跳楼身亡,官网照片已变黑白
医师节慰问1000元!壹仟元!
饶毅:很多人,特别是不不懂美国的海内外华人,高估美国在1940年之前的科学,包括长期错误地推崇1940年之前留美中国学生。
今天医师节,患有罕见病的刘先生向浙大一院捐赠100万元!
2000年-2021年伤医案件频发,粗略统计结果已超过400余起!
广东男子买避孕药被药店联系到妻子,导致婚外情败露,最终婚姻破裂?
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磁共振平扫无法确诊,医生建议做增强,患者竟投诉:为何最初不直接做增强?
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