病理技术作为病理学的支撑,是病理诊断的基础。病理技术是病理工作中的重要组成部分,它贯穿从接收标本到发放病理报告整个诊断流程的始终。病理技术工作的质量直接影响到患者的诊断治疗效果,因此高质量的病理技术工作就显得尤为重要。其中的关键是组织的处理,组织处理的好坏,直接决定了之后无论是常规HE染色还是免疫组化,原位杂交还是基因检测的可靠性和准确性。因此组织取材显得极其重要。
组织的取材
1.病理检查申请单和送检标本的接收
病理检查申请单是临床科室向病理科送达的会诊单,是病理医师作出病理诊断必备的临床文字资料,是具有法律性意义的文书档案。因此,临床医师应认真逐项填写申请单内的有关项目,并由管理该病员的本院医师签名后随同检查标本送往病理科。病理科在接收申请单及送检标本时,应对二者进行第1次认真核对。
凡有下列情况之一者,病理科应及时作出反应,包括与送检科室联系或退回:
(1)申请单与送检标本不符,包括盛标本的容器上未贴标记者
(2)申请单中有重要项目空缺未填写,或病史及临床检查(包括术中检查)过于简单者;
(3)送检标本因未及时固定而致严重自溶、干缩、腐败,或被错误地使用非固定液(如消毒液等)浸泡者;
(4)送检标本的主要病灶被事先挖取,或一件标本分送两个单位者对符合送检要求的标本,由接收标本者在相关科室的标本送检簿上签收,或发放收到标本通知单。
2、申请单、送检标本的编号与登记
病理科工作人员于标本收集的当天,及时对申请单与标本同时编号,经第2次核对无误后进行登记。登记簿和(或)微机记录、申请单、送检标本容器上的编号应完全一致。
3、大标本的补充固定
对送检的大标本,病理医师应在不影响主要病灶定位的情况下,作适当的剖面,并添加10%中性福尔马林,以补充固定。固定至取材的间隔时间宜超过12h以上。
4、巨检、取材与记录
本项操作,原则上应有医生和技术员2人参加,技术员为记录者。记录者应详细记录取材者的口头描述,同时承担申请单编码、病人姓名、主要病史、术中所见、送检标本的件数等的宣读任务,并把临床对病检的特殊要求告知取材者,对取材者放置小号码进行监督。
取材者应在记录者宣读上述内容时,对标本容器上的编号、姓名及标本件数作第3次核对。如发现标本的件数不符,应将该标本另置,待与临床联系后再作处理。经反复检查,仍未发现送检标本内有临床所提到的病变时,应将标本另置,待与临床联系后再作处理;必要时邀请手术者共同参与取材。
有下列情况之一者,应在标本编号后编写小序码号,并将编号与相应的组织块连同放置和固定:
(1)一位病员被送检一件以上的标本;
(2)申请单中注明有特殊标记的标本;
(3)一个大标本多处取材;
(4)根治术标本的基部及切缘,检出或送检的淋巴结;
(5)补充取材。
在放置小号码(打码)时,应严格按编号顺序进行,切勿放错。小号码应放在组织块的包埋面。每件标本取材完毕后,应冲洗取材台及取材用具,防止标本间的组织碎屑污染。取过材的标本应按序另行放置,并加足固定液。当日取材全部结束后,移至标本存放架内,按照取材日期先后存放。
自报告发出之日保存2周后,统一清理。当日取材全部结束后,取材者与记录者共同清点当天取材总块数,记录于当天最后一张申请单的反面或日取材记录单上,以备技术员核对。取材者与记录者分别在有关记录下签名。
意 义:
取材的好坏,直接影响切片的质量。在一个规范的实验室,大部分的切片质量问题都是因为取材不好造成的。医生在取材时,首先要有一把锋利的取材刀,在切割组织时要避免取材刀来回拖拉,切取的组织块厚薄要均匀,一般厚度以0.2—0.3cm为适,大块癌组织、脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌癌等致密的或试剂不易渗入的组织应取薄一些;淋巴结应修掉两侧球冠,并尽量剔除周围的脂肪组织。
在取材中还应十分注意组织内是否有缝线或骨组织,如碰到不可避免的钙化组织,应与技术室讲明,在切取纤维组织、肌肉组织、胃肠道时,应注意纤维及肌肉的走向,取材时尽可能按与纤维平行走向切取为佳。
小标本取材时要注意包埋纸的质量,尽可能选择透水性好的纸张,包时不要双层、多层或折叠层数太多,也不要把过多的组织放在一起,影响脱水液的浸透。特别要注意新鲜组织取材,组织容易粘在包埋盒壁上,导致固定、脱水不佳。如果有可能,应选择剖开固定24小时后再取材。
精准病理诊断一从标本固定开始,由于组织标本的前期处理一切开、固定、取材是各项病理技术工作的最重要、最关键的一步,也是免疫组化、分子检测质控的第一步,这一步做好了,后续的工作才能正常进行,这一步没做好,组织自溶、抗原丢失、DNA被破坏将造成不可重复,不可逆转的结果。所以,我们都应积极行动起来,尽快把组织标本处理规范化、标准化。
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