参考文章:Labcorp:Blood Specimens: Chemistry and Hematology等.
血液学(Hematology)是研究、诊断和预防血液相关疾病的医学分支。它包括治疗影响血液再生的疾病和主要成分,如血细胞、血红蛋白、血液蛋白质以及凝血机制有关的内容。
血液学检测主要使用的是全血样本。有关不同动物的采血方法,可点击下文查看:
【实操】怎样给不同动物进行采血(Blood Sampling of Different Animals))
为了防止血液凝固,需要将血液收集到含有特定抗凝剂的采血管中,并轻微颠倒混匀,避免剧烈晃动导致溶血现象进而干扰正常的检测结果。
血液的主要成分包括:
血浆 Plasma(55%)
红细胞 Red blood cells(41%)
白细胞 White blood cells(3%)
血小板 Platelets(1%)
血浆 与血清 Plasma
血细胞悬浮在血浆中。血浆由水和溶解在其中的物质组成,包括被运送到组织的激素(Hormones)、抗体(Antibodies)、酶(Enzymes)、蛋白质(Protein)、维生素(Vitamin)、脂类(Lipid)、盐(Electrolyte)等,以及被运送到肺部和肾脏的细胞废物。
血浆或血清(Serum)都可以通过离心从血细胞中分离出来。注意血浆和血清是有区别的,本质区别在于血浆保留了纤维蛋白原(凝血成分),血清是不含纤维蛋白原(Fibrinogen)的血浆。凝血过程中,血浆中的可溶性纤维蛋白原转化为不溶性的纤维蛋白。
血浆与血清的差异
图片来源:宠医客
血清是从未与抗凝剂(Anticoagulant,一种防止血液凝结的化学物质)混合的凝血中获得的。凝血后将其离心,产生血清,其中主要含有两种蛋白质:白蛋白(Albumin)和球蛋白(Globulin)。血清通常收集在红色/灰色,金色,或樱桃红色采血管中,红色采血管也偶尔使用。
血浆是从在收集管中与抗凝剂混合的血液中获得的,因此,没有凝结。然后将混合的血液离心,产生主要含有白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原的血浆。
血细胞 (Blood Cells)
主要的血细胞分为红细胞(Red Cells / Erythrocytes),白细胞(White Cells/ Leukocytes),和血小板(Platelets)。
红细胞是精致的圆形凹体,含有血红蛋白(Hemoglobin),一种运送氧气和二氧化碳的复杂化学物质。
当包裹脆弱红细胞的薄保护膜破裂,使血红蛋白逃入血浆时,就会发生溶血(Hemolysis)。溶血可能是由于对血液标本的粗暴处理、使用止血带时间过长(导致血液淤滞)或在毛细血管收集过程中用力挤压、稀释、暴露于污染物、极端温度或病理条件下引起的。
白细胞的主要作用是抵抗感染。在健康动物体内,白细胞通过增加数量和消灭病原体来应对轻微感染。血小板是一种特殊细胞的小碎片,有助于血液凝固。
凝血过程中,有许多凝血因子(Coagulation factors)参与其中(如:凝血因子VIII, 凝血因子 IX等)。几种不同类型的抗凝剂干扰这些因素的活性,以防止凝血。血浆标本可能需要抗凝剂(Anticoagulants )和保护剂( Preservatives)。指定的抗凝剂或防腐剂必须用于指定的试验。抗凝剂是可以阻止或延迟血样凝结(凝固)的化学物质。选择这种化学物质是为了保存标本的某些特征,并作为化验的方法使用。用一种适用于所述试验的抗凝血剂收集的血液可能不被认为适用于其他试验。
由于添加剂(Additives)是不可互换的,具体抗凝剂的选择取决于所需要的检测方法。一些抗凝剂可能会影响检测结果,因此应该根据检测程序来选择合适的抗凝剂。
常用的抗凝药物
来源:宠医客
肝素 Heparin
绿头管 Green-top tube
抗凝原理:有钠盐、钾盐、锂盐、铵盐。通过加强抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)灭活丝氨酸蛋白酶的作用,从而阻止凝血酶的形成,并且有阻止血小板聚集等多种抗凝作用。
主要用途:适用于大部分应用血浆样本的检测的抗凝剂,特别是生化测定,还常用于血细胞比容、血pH、血气分析,是红细胞渗透脆性试验理想的抗凝剂。
注意:肝素抗凝血会影响白细胞的染色,因此不适于血涂片检查。因其在瑞氏染色时会出现背景偏蓝,不适全血液学一般检查,也不适合凝血因子的检查。
EDTA (乙二胺四乙酸盐)
紫头管 Lavender-top tube
抗凝原理:与血液中的钙离子结合形成螯合物。有钠盐和钾盐2种,分为液体和粉末 ,液体管对样本有一定的稀释作用,一般加入1-2mg/ml的EDTA来防止凝血,过量的EDTA会导致细胞收缩,并会使自动分析仪的大多数细胞计数检测失效。
主要用途:首选抗凝剂,收集EDTA全血或血浆。
在采样后不久开始分析的样本中,适当比例使用不会改变细胞形态,因此适用多项血液学检查,尤其是血小板计数,EDTA-K2最适用于全血细胞分析及血细胞比容测定,国际血液学标准化委员会(ICSH)建议血细胞计数使用EDTA-K2作为抗凝剂。
注意:EDTA可抑制血小板聚集,不适用于凝血检查及血小板功能试验。因含有钠离子或钾离子,因此也不适用于生化的血浆。
枸橼酸盐 Citrate
蓝头管 Blue-top tube
抗凝原理:又名柠檬酸盐,含钠盐和锂盐2种,与血液中钙离子结合形成螯合物,从而阻止血液凝固。确保只使用含有3.2%柠檬酸钠浓度的管。
主要用途:用于凝血(与血液的抗凝比例为1∶9)和红细胞沉降率(与血液的抗凝比例为1∶4)的检查。因其毒性小,也是输血保养液的成分之一。
注意:不同实验室可能有不同浓度的枸橼酸钠采血管,可能影响凝血。另外也会干扰钠离子的检测,不适用于许多常用的生化试验。
氟化钠 Sodium Fluride
灰头管 Gray-top tube
特点:含有氟化钠(Sodium Fluride,一种保护剂Preservative),以及草酸钾(Potassium Oxalate,一种抗凝剂Anticoagulant)。
主要用途:
用于采集氟化钠全血或血浆。
氟化钠被称为血糖保护剂,也具有抗凝血特性。作为抗凝剂,它的用法是6 ~ 10mg /mL血样。含有适量氟化钠的真空收集管有商业化产品。即使存在其他抗凝血剂,氟化钠也可以作为血糖保护剂添加到样本中。血糖保护剂的用法是2.5 mg/mL的血液。氟化钠可干扰血清中的许多酶的检测。(参考:宠医客)
草酸盐 Oxalate
抗凝原理:草酸根与血液的钙离子形成草酸钙沉淀使钙离子失去凝血作用而阻止凝血。
注意:因草酸盐与血液中钙离子结合生成草酸钙沉淀,可使血细胞形态发生变化,故不宜制作血涂片检查。同时草酸盐也影响血液中某些成分的生物活性,故血液学中很少应用。双草酸盐抗凝剂是以草酸钾和草酸铵按一定比例(通常4∶6)混合而成,适于血细胞比容测定。
普通管
红头管 Red-top tube
特点:不含抗凝剂或者保护剂。
主要用途:血清或凝血全血。血清必须在45分钟至两小时内从细胞中分离出来,具体时间取决于测试结果。可参阅商家相关测试的样本要求。用塑料管(EP管)输送血清。
促凝管
金头管 Gold-top tube
特点:含有凝血激活剂(Clot activator)和凝胶( Gel ),可将血清从细胞中分离,但不含抗凝剂。请勿使用凝胶管获得用于监测治疗性药物的标本。
主要用途:可用于需要血清的检测,除非另有说明。根据测试结果,在45分钟至2小时内将血清从细胞中分离出来。血清可以在细胞和血清之间有完整屏障(离心后正确分离)的离心管中输送,也可以在塑料输送管(EP管)中输送。如果在凝血完成前将标本离心,细胞顶部会形成一个纤维蛋白凝块。这一发现在溶血标本中很常见。此外,凝胶可能与血样接触不完全,导致血清和细胞分离不当,也可能影响测试结果。
另外该管也可用于采集用于细菌培养的标本,如关节液、腱鞘囊积液、腹水等。
为了确保准确的检测结果,所采血样必须在含有抗凝剂或防腐剂的试管中混合均匀。试图通过施加压力迫使更多的血液进入试管,就像用注射器收集一样,将会导致红细胞的损伤(溶血)。真空管偶尔会失去真空度。如不能正确采集标本,可选择其他部位,使用新的无菌采集设备进行标本采集。采集血样后,若无条件立刻检测,应冷藏保存尽快送检。
图 文 写 作: 红蜻蜓
审 核 校 对: Carly Liu
编 辑 排 版: 红蜻蜓
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