生化怎么通样本针肿瘤标志物检测结果异常？问题究竟出在哪里？
作者：许强
指导老师：李剑华 郭晓英
单位：大庆油田总医院检验科
肿瘤标志物在临床上用于肿瘤高危人群的筛选、治疗效果的评价以及肿瘤复发监测等，工作在临床检验一线，每一天在做检验、审核发送报告，具有从质控、检验报告审核中识别出异常的能力非常重要，这样才能避免相对个性化案例的发生，为临床诊断提供有价值的帮助。
周末值班，检验科正在紧张有序的工作着，常规检查试剂及耗材，开机维护，加入质控，查看曲线，质控在控，患者标本开始检测，上午9点半左右，肿瘤标志物检测岗开始结果审核：ME26号标本，AFP值>2000 ng/mL，查看患者信息：肿瘤科，靶向治疗住院患者，乙肝大三阳，符合病史。ME27号标本，AFP值417.9 ng/mL，为消化内科门诊患者，临床诊断：肝占位病变，结果与临床相符。
仪器输入命令，执行ME26号标本10倍自动稀释复查，同时，ME28号标本因为Lis询问指令超时，AFP没有检测结果，直接排序在ME26号需要稀释标本后，一同进行AFP检测，结果如下：
ME26号标本稀释复检后结果>20000ng/mL，ME28号标本为44岁男性健康体检患者，AFP值143.94ng/mL。这个结果引起审核者注意，查询体检指标AST：52.9 U/L↑（9.0-50.0），r-GGT：103.0 U/L↑（10.0-60.0），乙肝五项HBsAg(-)，HBsAb（+），样本的临床信息与AFP值不相符合，于是重新复检ME28号标本，复检后检测值为2.25ng/mL（参考值0-7）。2次结果不符，问题出现在哪里？紧邻高值稀释标本，是出现了携带污染？肿瘤标志物检测平台已经使用多年，未遇到过此种情况。
值班的2位高资质检验技师，对检测过程进行分析梳理，如果是携带污染，发生在哪里？那么最初未稀释检测ME26号标本时，紧邻的ME27号标本是否也发生污染，赶紧召回已审核ME27号标本检测单，重新对ME27号 标本复检，检测值为3.30ng/mL，检测分析见下图。
接下来，制定方案，验证携带污染的发生并寻找原因。
根据文献报道，采用临床高浓度样本评估携带污染的方法，以生理盐水为空白浓度样品，按照高、高、高、低、低、低的方式排序，在分析仪上进行测试，共进行5批次这样的测试，避免单次测定的偶然误差，在每一组的测试中，第4个样品的测试值为I4，第6个样品的测试值为I6，按照共识K=(I4-I6)/(I原-I6)，计算每组的携带污染率K，携带污染率应≤10^-5，每组的携带污染率均应符合K值应≤10^-5。
存在携带污染，联系工程师。对仪器管路及清洗站进行清洁保养维护，样本针进行了更换，仪器更换新加样针后携带污染的检测：
为寻找具体的携带污染发生的原因，重新更换旧的加样针，进行检测，结果如下：
至此确定为加样针携带污染，导致结果异常。患者结果发送如下：
携带污染按照来源，分为样本携带污染，试剂携带污染及反应液携带污染。样本携带污染，为前一个分析物浓度较高，对下一个检测的同样分析物产生不同携带，样本携带污染的来源为样本探针的磨损，管路清洗维护不佳等。当测定高浓度标本时，携带污染成为导致假阳性的潜在问题。在日常工作中，携带污染不易通过室内质发现，常在检测结果与临床不符时发现，而且携带污染的发生与检测项目排布顺序直接相关。
本例携带污染的发现为AFP高值标本稀释复查时，紧随在其后的一个体检标本AFP检测结果出现偏高，与临床资料不符，复查结果正常，提示存在携带污染。追踪其在原倍检测时是否存在对后一个标本的携带污染，但是标本临床诊断为肝占位病变，与临床相符，并未识别出携带污染的发生。本案例通过检测平台加样针更换，进行验证，表明污染来自样本针。
存在以下情形时，容易导致样本针产生携带污染的发生：
1. 样本针脏污或破损：当样本中含有大颗粒物，细胞碎片，纤维蛋白时，堵塞样本针，造成脏污或结晶；当保养用的液体内含有大颗粒物或杂质，刮伤样本针内壁涂层；或样本针使用时间较长，内壁涂层脱落也会造成携带污染的发生。
2. 探针保养液配制不当：0.5%次氯酸钠溶液可以去除吸液针上的蛋白残留，探针保养液可以防止针内壁产生非特异性结合，日保养维护不到位或保养使用的0.5%次氯酸钠溶液配置时，其浓度未达到标准，会导致产生吸液针脏污或结晶或堵塞等风险。
3. 样本针在清洗站位置偏移：样本针在日常工作使用，周保养，人为碰撞等原因下可能会对针的垂直度，清洗位置等产生一定的偏移，导致样本针清洗不到位，进而导致携带污染。
携带污染往往发生在仪器设备老化，未及时维护、更换配件等情况之下。按要求完成日保养和周保养，日保养使用的液体耗材符合要求，周保养按时完成。按需定期校准样本针，观察样本针在清洗站或加样位置是否有喷溅并及时处理。重要的是学会发现，细致严谨。
生化分析仪发展至今天，检测精密度和检测效率都达到很高的标准，但是检测设备、试剂涉及影响以及样本情况的诸多因素，携带污染仍然是每个实验室都会遇到的最大挑战。实验室工作人员正确识别、评估携带污染，才能有效降低由于携带污染带来的结果偏差对患者诊疗的影响。
学习更多的案例，提升认知，踏实做好日常工作，掌握携带污染的验证排查程序，才能发现及初步解决携带污染的问题。
参考文献：
1. YY/T0654-2017《全自动生化分析仪》
2. 2.YY/T 1155-2019《全自动化学发光免疫分析仪》
3. 中华医学会检验医学分会临床化学学组. 《生化分析仪携带污染的分析评估及处理方法专家共识》,中华检验医学杂志，2020,43(07) : 712-717.
4. 4.ARCHITECT甲胎蛋白测定试剂盒（化学发光微粒子免疫检测法）说明书