1、河北医科大学实验教学教材供中药学.中医学、中西医结合专业本科教学用中药药理学实验指导experiment and guidefor pharmacology of tradition chinese medicine河北医科大学中医学院二零零四年编写说明为适应我国高等中医药院校中药本科教育的改革和发展、满足市场竞 争和中医药管理体制对中药教育的耍求，我们在河北医科大学教务处领导 下，在中医学院领导及中药系领导的大力支持下编写了本实验教材。本教材是在充分总结我们教学中的经验，归纳当前中药学教育迫切需 要能体现本学科教学特点、需要补充一些教学内容的基础上编写的。本教 材编写宗旨是：中药学特色鲜明、

2、具有前瞻性、能体现现代重要科技水平 的高质量的中药学教材。也希望通过该教材的编写，帮助各位老师提高自 己的业务水平，促进我校重要本科教育再上新的台阶。尽管我们力图贯彻上述宗旨，但由于编写时间仓促及水平所限，难免 存在一些问题，甚至错误之处，希望本教材问世后，广大师生能不吝赐教, 提出批评指正，我们将在今后教学实验中不断完善，形成优秀合理的教学 实验构架。编者2004510目录第一章中药药理学实验须知1第二章中药药理实验基本知识与技术2第三章中药药理实验设计的基本知识6第四章 实验项目8实验一马钱子的急性毒性试验（改进寇氏法）8实验二柴胡对发热家兔的解热作用10实验三 生大黄对小鼠排便时间和数量

3、的影响（炭末法）12实验四 生大黄对小鼠小肠运动的影响（炭末法）13实验五 双黄连口服液对蛋清致大白鼠后足跖肿胀的影响14实验六 三金片对家兔的利尿作用（膀胱漏斗法）15实验七 木香对盐酸一乙醇致大鼠急性胃粘膜损伤的影响16实验八 延胡索对小白鼠的镇痛作用（热板法）17实验九 延胡索对小白鼠的镇痛作用（扭体法）18实验十 生三七粉对小白鼠凝血时间的影响（玻片法）19实验一 三七对小白鼠凝血时间的影响（毛细玻管法）20实验十二 复方丹参滴丸抗家兔血栓形成的作用21实验十三 川贝枇杷膏对小白鼠的止咳作用（潜伏期观察法）23实验十四 人参对小白鼠游泳时间的影响（抗疲劳实验）24实验十五 人参对小白鼠

4、耐常压缺氧的作用25实验十六党参对小鼠记忆获得性障碍的改善作用（跳台法）26实验十七生脉注射液对低血压状态家兔的升压作用28第一章中药药理学实验须知中药药理学实验课是中药药理教学的一个重要组成部分。在生理学和药理学实验 基础上，在讲授屮药药理的同吋，开展屮药药理的实验，它的口的和任务一方面是验 证理论、巩固并加强对理论知识的理解；另一方面是通过实验，进一步提高学生的动 手能力，培养学生能用现代科学方法从事中药理论研究和新药开发的初步工作能力， 为今后进行科学研究，打下初步基础。中纱药理实验包扌舌进行实验操作、整理实验结果和写出实验报告等环节，为提高 实验效果，必须做到：一、明确实验的口的要求：

5、实验前应作好预习，明确本次实验的口的、方法、步 骤和原理，作到心中有数，这样，才能在实验过程中避免出现忙乱和并错，并在教师 指导下，培养独立操作的能力。二、作好实验结果的处理：屮药药理实验结果有计量资料（如体温、尿量）及计 数资料（如动物死亡数）。要忠实地准确的对观察到的数据及时加以记录，决不可想当 然的用主观想象或书本理论代替实验观察到的客观事实。实验完毕，应对结果加以整 理：注明实验题口、实验日期、动物性别、体重、给药剂量等；计数资料和计量资料 应列表以便比较，使z目了然。三、写好实验报告：写实验报告是培养文字表达能力和概括、综合、分析问题能 力的重要训练方法。每次实验完毕以后，要求以统一

6、的实验报告纸写出实验报告，交 负责教师评阅。在实验报告中要求列出实验题目、实验方法和实验结果。有时要对实 验结果产生的原理或对实验结果杲常的原因略加讨论。讨论不可离开实验结果去抄书。 实验指导所列思考题或讨论题是为加深对实验的理解，与实验结果无关的内容，不必 写入实验报告。最后把实验结果加以概括性总结，写出结论。结论不是单纯重复实验 结果，也不应超过验证的范围任意外展，扩大结论。实验报告要求文字简练，书写工 整，措词注意科学性和逻辑性。第二章中药药理实验基本知识与技术(-)实验动物的选择、捉持及给约方法(1) 小白鼠小鼠是药理实验最常用的一种动物，常用于药物的筛选、550、ed50的测定、中

7、枢神经系统实验、抗炎免疫实验、避孕约、抗肿瘤约以及抗衰老药实验等。常用体重 1820g。 捉拿方法：右手抓住鼠尾，放在台上或鼠笼盖铁丝网上，轻向后拉其尾，用左 手拇指和食指扌呈住其头部皮肤及双耳，将小鼠固定在掌中，使其腹部朝上，然后以第 四指和小指夹住鼠尾。 给药途径：口服(po)：将受试药物放入饲料或溶于饮水中，由动物自由摄取的一种方法。 缺点是摄入剂量不够准确。灌胃(ig)：将小鼠固定好，右手持装冇灌胃针头的注射器，自口角插入口腔， 沿上腭插入食道。如遇阻力，可将针头抽出再另插，以免穿破食道或误入气管。灌注 量为0.10. 3ml/10g体重。皮下注射(sc)常在背部皮下注射。一手固定动物

8、，另一手注射，注射量为0. 1 0. 3ml/10g 体重。肌肉注射(im)多注射于后肢股部肌肉，每侧不超过0.51/只。腹腔注射(1p)左手固定小鼠，右手持注射器，从下腹部外侧进针约35mm,呈 45度角刺入腹腔,注射量0. 10. 2ml/10g体重。静脉注射(iv)将小鼠置于固定筒内，使尾部露在外面，用7075%酒精棉球擦 尾部，或将鼠尾浸入4550°c温水屮。待尾部左右侧静脉扩张后，左手拉尾，右手进 针。注射量不超过0.5ml/只。(2) 大白鼠用途于小鼠相似，常用作抗关节炎药物实验、血压测定、利胆药实验、子宫药实 验和长期毒性实验等。常用体重150200go 捉拿方法：基本

9、上同小鼠。将其放在粗糙物上，右手轻拉其尾，左手中指和拇 指放到大鼠左右前肢腑下，食指放入颈部，使大鼠伸开两前肢，便能将其握住。 给药途径：灌胃、腹腔注射、皮下注射、静脉注射均同小鼠，给药量为小鼠的2 3倍。大鼠尚可用舌下静脉给药的方法。（3）兔用途丁小鼠相似，常用作抗关节炎药物实验、血压测定、利胆药实验、子宫药实 验和长期毒性实验等。常用体重150200go 捉拿方法：基木上同小鼠。将其放在粗糙物上，右手轻拉其尾，左手中指和拇 指放到大鼠左右前肢腑下，食指放入颈部，使大鼠仲开两前肢，便能将英握住。 给药途径：灌胃、腹腔注射、皮下注射、静脉注射均同小鼠，给药量为小鼠的2 3倍。大鼠尚可用舌下静脉

10、给谿的方法。（4）豚鼠用途于小鼠相似，常用作抗关节炎药物实验、血压测定、利胆药实验、子宫药实 验和长期毒性实验等。常用体重150200go 捉拿方法：基本上同小鼠。将其放在粗糙物上，右手轻拉其尾，左手中指和拇 指放到大鼠左右前肢腑下，食指放入颈部，使大鼠仲开两前肢，便能将其握住。 给药途径：灌胃、腹腔注射、皮卜注射、静脉注射均同小鼠，给药量为小鼠的2 3倍。大鼠尚可用舌下静脉给药的方法。（二）实验动物的编号方法白色家兔和小动物可用黄色苦味酸涂于毛上标号。如编号110,将小白鼠背部分 前肢、腰部、后肢的左、屮、右部共九个区威、从右到左为19号，第10号不涂黄 色。（三）实验动物的随机分组法数理统

11、计学上，根据随机抽样的原则，编制了随机数目表，应用随机数目代替抽 签法。表中的数字都各自独立，全部数字无论从横行、纵列或斜行的顺序都是随机的。 因此使用时可任口一个数目开始，可从左而右，亦可从右而左，可从上而下，也可从 下而上，按顺序取得需要的数目，英结果比抽签更为理想。（1）完全随机法（2）配偶设计随机分组法（3）随机单位组设计分组法（四）药物浓度表示法及剂量换算法纱物的重量以“克”为基木单位，容量以“毫升”为基本单位。这是衡量的公制, 现将公制列表如下：公制重量与容量表单位名称简写符号折算微克ug (r)1/1000毫克毫克mg1000微克克g1000毫克千克（公斤）kg1000 克毫升m

12、l1/1000 升升l1000毫升药物浓度是指一定量液体或固体制剂所含主药的分量。常用以卜几种表示法:1、百分浓度：是按每100分溶液或固体物质中所含约物的分数来表示浓度，简写 为。由丁药物或溶液的量可以用体积或重量表示，因而冇三种不同的表示百分浓度的 方法：（1）重量/体积（w/v）法：即每100毫升溶液中含约物的克数，此法最常用，不 加特别注明的药物%浓度即指此法。（2）重量/重量（w/w）法：即每100克制剂小含药物的克数，适用于固体、半固 体药物。（3）体积/体积（v/v）法：即每100毫升溶液屮含药物的毫升数，适用于液体药 物。如消毒用75%乙醇，即为100毫升屮含无水乙醇75毫升。

13、2、比例浓度：常用于表示稀溶液的浓度。3、克分子浓度（m）： 一升溶液屮所含溶质的克分子数称为该溶液的克分子浓度。4、克当量浓度（n）： 一升溶液小含有溶质的克当量数称为该溶液的克当量浓度。剂量换算：（1）动物实验所用药物的剂量，一般按mg/kg （或g/kg）计算，应用时须从已知 药浓度换算出相当于每公斤体重应注射的药液量51）,以便于给药。（2）在动物实验小有时须根据药物的剂量及某种动物给药途径的药液容量，然后 配制相当的浓度以便于给药o第三章中药药理实验设计的基本知识一、中约约理实验设计的重要性屮药药理研究首要的问题，就是对实验研究的周密设计，因为实验设计是实验过 程的依据，是实验数据处

14、理的前捉，也是捉高实验研究质量的一个重要保证。严密而 合理的实验设计，不但可对实验结果和误差有比较准确的估计，最大限度地获得丰富 而可靠的资料，而且还可减少人力，节省物力和时间，提高工作效率，避免因实验设 计不当，造成人力、物力的浪费，其至全功尽弃的不良结果。因此，实验研究设计， 从中约约理实验研究过程来看，具有非常重要的意义。二、实验设计的内容1、明确研究目的和意义：实验设计，首先应考虑研究目的和意义，根据研究的屮 心问题，进行实验内容设计，做到心中有数，有的放失。2、确定实验组和对照组：实验组和对照组之间除了处理不同，其他条件均应等同。 保持实验可比性的原则。在新药审批办法屮规定，新药的主

15、耍药效作用各项实验均应 有空口对照和已知约物对照。约理试验结果需经统计学处理。3、确定实验方法、项目和指标：要有明确的规定和说明，要注意选择能反映被研 究问题的本质的关键指标。药理作用及英机理能用客观方法定性地加以测量，取得准 确可靠的数拯。4、确定实验对象的数量：中药药理实验研究对象包括正常动物、麻醉动物及病理 模型；既冇整体体内试验，也冇离体器官、组织或细胞体外试验等。尽量研究各种接 近中医临床证候的动物病理模型，按中医药治则，观察中药药理与疗效，但也不排除 对正常动物或离体器官等的作用分析。由于动物实验和临床观察毕竞有一定差别，因 此考虑用不同动物多种方法测试，往往是必耍的。耍根据实验目

16、的、方法的指标的要 求决定实验动物、样本及数量、计量资料，一般小动物（大、小鼠）每组8-12只， 较大动物（兔、狗）每组58只是基本的，总量应符合统计要求。5、资料整理和统计：将纪录的资料作为必要的分析、整理，经过恰当的统计分析, 作出结论。三、实验设计的原则实验设计的三大原则：对照、重复和随机。1、对照：比较研究是科实验不可少的条件，没有比较，不难以鉴别，也就缺乏科 学性，所以实验设计必须设立对照组。而对照组与实验组z间除用以实验的药物，处 理的区别之外，其他条件如实验动物、方法、仪器、环境及时间等应相同。动物的种 屈、品系、性别、窝别、年龄、体重、健康状况等方而尽量一致以减少谋差。一般将“

17、齐同对比”归纳为“同时、同地、同环境、同种、同重、同批号”等几个方面。根据实验研究的内容不同，可选用不同的对照形式，常用的方法冇下列4种：（1）空白对照：指在不加任何处理的条件下进行观察对照。（2）假处理对照：即除不用被研究的药物外，对照组的动物要经受同样的处理， 如给予生理盐水或不含药物的溶酶。又称“阴性对照”。（3）标准对照：指以己知经典药物在标准条件下与实验药进行对照。又称“阳性 对照”。必要时可设两个作用机制不同的阳性对照药。（4）组间对照：系在实验组间分几个剂量组互为对照进行对比，以便说明量效关 系或药效的剂量依赖性。一般设23个剂量组。另外，也可用口身作用给约前后对比者，但最终还是

18、需要作组间对照來说明问题。2、重复：能在类似条件下，把实验结果重复岀来，才算是可靠的实验，重复实验 除增加可靠性外，也可了解实验变异情况。3、随机：就是按照机遇均等的原则来进行分组。其目的是使一切干扰因素造成的 实验误差减少，而不受实验者主观因素或英他偏性误差的影响。随机化的手段可采用 编号卡片抽签法，随机数字表或采用计算器的随机数字键。近年来提倡“均衡下的随 机”，即先将能控制的主耍因素（如体重、性别等）先行均衡地归类分档，然后在每一 档屮随机地取出等量动物分配到各组，使那些难控制因素（如活泼、饥饱、疲劳和度 及性周期等）得到随机化的安排。第四章实验项目实验一 马钱子的急性毒性试验（改进寇氏

19、法）【目的】1、学习中药急性毒性试验的方法，掌握ld50的测定方法。2、观察马钱子的毒性反应。【原理】急性毒性试验是指受试动物在一次大剂量给药后所产生的毒性反应和死亡情况。 药物毒性的大小，常用动物的致死量来表示，因为动物生与死的生理指标较其他指标 明显、客观、容易学握。致死量的测定也较准确。在测定致死量的同时，还应仔细观 察动物是否出现耸毛、倦卧、耳壳苍白或充血、突眼、步履蹒跚、肌肉瘫痪、呼吸困 难、昏迷、惊厥、大小便失禁等不良反应。致死量的测定常以半数致死量为标准。半数致死量是指能够引起试验动物一半死 亡的剂量，即药物致死量对数值，用符号ld50表示。由于ld50的测定较简便、可靠， 而且

20、稳定，现已成为标志动物急性中毒程度的重要常数。ld50测定的方法有多种，如 bliss法、改进寇氏法、简化机率单位法、累积插值法、机率单位-加权直线加归法等 等。以上方法虽齐有特点，但都有共同的要求：（1）动物：均选用体重1722g健康小鼠（同次试验体重相差不得超过4g）,或 选用体重120150g （同次试验体重相差不得超过10g）健康人鼠作实验动物。性别相 同或雌雄齐半。（2）给药途径：要求采用两种给药途径，其中必须有一种与临床所采用的相同。 溶于水的药物尚须测定静脉注射的ld50o值得提出的是，临床上虽然不用腹腔注射， 但动物实验因腹腔注射给药方便，吸收迅速，颇为常用。若供试药物在腹腔内

21、不引起 强烈刺激或局部变化（如纤维性病变等），那么啮齿类动物腹腔注射的ld50,参数很接 近于静脉给药的ldsoo 口服制剂无法通过注射给药途径吋，口j只用胃肠给药。（3）试验周期和观察指标：给药后至少观察7天。观察期间应逐fi记录动物的毒性 反应情况和死亡动物的分布o（4）正式试验前，均须先用少量动物进行预试试验，大致测岀受试药物引起0% 和100%死亡率的致死量范围，然后安排正式试验。一正式试验组数不得少于三个剂量组, 一般选用45个剂量组，每组动物数为1020只。（5）报告ld50时需注明实验动物的种屈及品系、性别、体重范围、给药途径及 每个剂量组动物数等，述需注明受试药物的配制方法、给

22、药剂量、各组剂量间的比值（一般以0.650.85为宜）、给药容积、观察时间及计算方法。还须标出ld50的95% 可信限。【动物】小鼠【药品】马钱了水煎液【器材】注射器、灌胃针头、鼠笼【方法】1、预试实验：预试实验目的是为了找出引起动物0% （dn）和100% （dm）死亡的 剂量，以便安排正式实验。预试实验一般采用少量动物（69只小鼠）进行，将动物 随机分为3组，组间剂量比值一般以1： 0.5或1： 0.7为宜。灌服或腹腔注射量以 0. 2ml/10g体重为度。预试实验应进行到找出dn和dm后方可安排正式实验。2、正式实验：在预试实验测得dn和dm的剂量范围内设46个剂量组，最多10 组。最理

23、想的结果是使ld50的上下各有23组。组数愈少，准确性愈差。各剂量组 的动物要求相等，至少10只动物（分组时应注意分层随机均匀化的原则）。本实验要 求最大反应率为100%,最小反应率为0%,或至少反应率接近100%或0%。组间剂量比 值（1： k）,常用1： 0.8或1： 0. 75o如实验中出现相邻剂量有重复的100%和0%反应 率时，应将靠边的组弃去不计，使大剂量组只有一个100%的反应率，小剂量组也只有 一个0%的反应率。分组完毕和齐组剂量算出后，分组灌服或注射不同剂量的受试药物。为能得到理 想的结杲，实验最好从中间剂量开始，以便从最初几个剂量组动物接受药物后的反应 来判断两端剂量是否合

24、适，便于调整剂量和组数。为了捉高实验的精确度和节省药物, 受试药物可按“低比稀释法”配置。即使每只动物的用药体积相等(0. 2ml/10g),而 溶质不等。给药后逐口观察并记录中毒反应、死亡率和死亡情况。【结果】按表填写数据马钱子水煎液对小鼠死亡率的影响组别 剂量g/kg(d) logd(x) 死亡数 死亡率(p) p2p-p21234公式 1:(logld50)x50=xm-i (工 p-05)则 ld50二logt x50公式 2：sx50=i* j(工一工pl)心一 1)公式 3： ld50 的 95%可信限二igt (x50±1.96s x50)ld50的平均可信限二ld50

25、± (ld50高限- ld50低限)/2xm：最大剂量组剂量的对数值i：相邻两组剂量(d)对数值z差，或相邻两组高剂量与低剂量z比的对数。p：各组动物的死亡率，用小数表示。sp：为齐组动物死亡率的总和。n：每组动物数。sx50： logld50 的标准误。实验二柴胡对发热家兔的解热作用【目的】观察柴胡注射液对发热兔体温的影响；了解柴胡解热作用的特点。【原理】木实验采用伤寒副伤寒二联菌苗作为致热原作成实验性动物发热模型, 并以止常兔作为对照，观察柴胡注射液的解热特点。【器材】数字式肛温计、磅秤、兔固定架、注射器、棉球【方法】取健康兔2只，标记称重，兔架上固定。分别测肛温两次，以均值作为

26、 正常体温。从甲、乙两兔耳缘静脉注射伤寒副伤寒二联菌苗lml/kg体重,待体温升高超过1°c 后（约需0.5lh）,分别按以下安排给药。甲兔（发热兔）：肌注生理盐水0. 5ml/kg；乙兔（发热兔）:肌注柴胡注射液0. 5ml/kgo给药后30、60、90、120min分别测试肛温。【结果】将所得实验数据，经统计处理后，参见表记录。柴胡对家兔体温的影响°c （ x 土sd）组别动物数（只）正常致热后给药后（min）lh306090120甲乙丙【注意】（1）兔应健康，雌性无孕，体温正常（38.539.5°c）。（2）每次测温前应在肛温计前部涂以少许液体石蜡，测温时操

27、作应尽可能轻柔。（3）使用测温计时，先按下开关按钮，插入肛门深度为45cm。当显示器上的“°c” 标记停止闪烁时（约需lmin）取出。记录体温后关闭电源。（4）木实验是最常用的方法，其特点是致热快，维持时间短。家兔体温较恒定。 此外近年来冇直接用内生性致热源作为致热剂进行实验，效果较好。【思考题】分析实验结果后，说明柴胡解热作用的特点。实验三 生大黄对小鼠排便时间和数量的影响（炭末法）【目的】观察生大黄对小鼠肠道炭末推进时间、数量的影响。【原理】运用色素流动法，以黑色炭末为指示剂，以排黑便的时间、性状和数量 为指标，可直接观察生大黄对肠道推进功能的影响。生大黄泻下通便，可使肠蠕动加

28、速，炭末推进快，排黑便时间短，次数多，成形差。【器材】小鼠灌胃针头、1ml注射器、钟罩、滤纸、鼠笼、台秤、棉签、记吋钟、 银了。【药品】生大黄水煎液lg/ml （含炭末0. lg/ml）炭末生理盐水混悬液0. lg/ml【动物】小白鼠【方法】取禁食2024h体重和近的小鼠6只（腹泻者剔去），随机分成2组，标 记。2组分别灌服上述两种炭末混悬液0. 5ml/只。各鼠分置于铺有滤纸的钟罩内进行 观察，记录小鼠出现黑便的时间、性状和数口，以及稀粪沾染肛门情况。连续观察4h, 每组3只小鼠取平均值，然后综合全实验室结果，进行比较。【结果】按表记录分析。生大黄对小白鼠排便的影响（乂土sd）组別开始黑便时

29、间（min） 4h内排黑便数（粒）黑便性状生理盐水组 生大黄组【注意】（1）吸药液前，应将药液摇匀，以保证药量及炭末量准确。（2）排黑便的记数和记时，以开始排出黑便为准。（3）记数黑便时应随时将小鼠排出的已记数的黑便清除，以免影响记数的准确性。（4）实验小鼠在禁食与实验过程屮应让其饮水，否则影响实验结果。附生大黄制剂的制备：取生大黄100g,砸成小块后，以水浸没。冷浸24h后， 过滤（三层纱布），40°c水浴浓缩至lg/ml.【思考题】观察生大黄泻h的作用，临床应用大黄致泻时应注意什么？实验四 生大黄对小鼠小肠运动的影响（炭末法）【口的】了解生大黃对肠蠕动的影响。【原理】利用黑色炭末

30、作为指示剂，观察炭末在肠道的推进距离。口服生大黄可 刺激肠蠕动加速，有泻下作用，故对胃肠实热有“釜底抽薪”之功。大黄久煎或炮制 后，致泻成分分解，作用减弱。故选用生大黃作为实验用药。【器材】手术剪、眼科银、直尺、注射器、灌胃针头、天平、烧杯、搪瓷盘。【约品】生大黄水煎液lg/ml （含炭末0. lg/ml）炭末生理盐水混悬液0. lg/ml【动物】小白鼠【方法】取禁食2024h体重和近的6只小白鼠，随机分为2组，每组3只，标 记。分别用上述2种炭末液0. 3ml/10g体重灌胃。给药30min后脱颈椎处死，打开腹 腔分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至冋盲部的肠管，置于托盘上。轻轻将小肠拉 成直

31、线，测量肠管长度作为“小肠总长度”。从幽门至炭末前沿的距离作为“炭末在肠 内推进距离”。取各组小鼠平均值，用公式计算炭末推进百分率；并观察各组小肠容积 是否增大。炭末推进率二炭末在肠内推进距离（cm） /小肠全长（cm） *100%【结果】按表记录分析生大黄对小白鼠小肠蠕动的影响（x土sd）组別小肠总长度（cm）炭末推进距离（cm） 炭末推进率（）生大黄 生理盐水【注意】开始给约至处死动物的时间必须准确，以免时间不同而造成实验误差。【思考题】大黃致泻的主要成份及作用机理是什么？实验五 双黄连口服液对蛋清致大白鼠后足跖肿胀的影响【目的】学习用鸡蛋清引起大鼠足跖急性炎症的方法，观察双黄连口服液的抗

32、炎 作用。【原理】以鸡蛋清（异种蛋白质）作为致炎剂，注入大鼠足跖内，可引起局部急 性炎症，使局部组织肿胀，该致炎作用可持续6小时。通过测量致炎前后大鼠足跖容 积的变化来观察双黄连口服液的抗炎作用。【器材】天平、鼠笼、足容积测定装置、注射器、大鼠灌胃器【药品】双黄连口服液、100%蛋清液、生理盐水【方法】取大鼠4只，称重，标记，分为2组。将大鼠右后肢用手固定，在其探 关节处用圆珠笔作一标记，动物的右后肢浸入足容积测量装置内，浸入深度以标记处 为界。从该装置的刻度吸管处所读取的数值即为动物右后足的止常体积（nil）连测两 次，求其平均值为正常值。给2组动物分别灌服以下药物：双黄连口服液、生理盐水,

33、 容量均为lml/100go 30min后在每鼠右后肢足掌心向踝关节方向进针，皮下注射100% 蛋清液0. 1ml/只。其后每半小时分别测定大鼠右后足跖的容积，连续5次。综合全实验室结果，按下式计算药物在给药后的不同时间内足肿抑制率及足肿浮 肿率：足肿抑制率二（对照组足跖容积-药物组足跖容积）/对照组足跖容积*100%足肿浮肿率二（致炎后足容积-致炎前足容积）/致炎前足容积*100%【结果】按表记录双黄连口服液对蛋清致人鼠后足跖肿胀的影响（x 土sd）组別动物数（只）右足跖容积51）正常 致炎后 30min 60mir) 90min120min150mi n生理盐水对照组双黄连口服液组【注意】

34、(1) 测定足容积吋应有专人负责，以减少误差；实验吋每次均重复测定2次。(2) 本实验测量方式也町用软尺量关节周长，但误差较大。(3) 可采用坐标图表示药物的足肿浮肿率，横坐标为时间，纵坐标为足肿浮肿率, 直观比较各组的情况。(4) 本实验时间根据情况可在36h内完成。实验时间过短，不易比较药物作用 的特点。(5) 本实验亦可用lg/dl角叉菜胶、lg/dl琼脂或lg/dl右旋糖酹生理盐水液作 为致炎剂，皮下注射0. 1ml/只。实验六 三金片对家兔的利尿作用(膀胱漏斗法)【目的】学习膀胱漏斗法以观察三金片的利尿作用。【原理】三金片为治疗泌尿系统感染的特效屮药，文献报道有利尿作用。【器材】兔手

35、术台、注射器、针头、剪刀、手术钳、导尿管、量筒、烧杯、婴儿 秤。【药品】三金片水溶液、葡萄糖盐水、生理盐水【动物】家兔【方法】取家兔背位固定在兔台上，耳缘静脉注入5g/dl葡萄糖盐水10ml/kg,造 成水负荷。耳缘静脉注射25%乌拉坦麻醉，进行手术，在耻骨联合上方沿腹屮线作一个 长约34cm的皮肤切口。沿腹白线切开腹壁，将膀胱移出体外。在其顶部用两把止血 钳提起，在止血钳之间作一长约lcm的切口，把膀胱漏斗放入膀胱，漏斗底要罩在两 侧输尿管的膀胱入口上，用线将膀胱及漏斗柄结扎固定。收集正常'尿量2次，1次10mino 一只兔通过灌胃管灌入三金片水溶液10ml/kg,另一只兔灌入同容积

36、生理盐水，60分 钟后开邕收集尿液。每隔30min收集1次，连续3次。【结果】按表填写数据实验七木香对盐酸一乙醇致大鼠急性胃粘膜损伤的影响三金片水溶液寻家兔的利尿作用组别剂量(ml/kg)给跖后尿量（nil）60min90min120min对照组给药组【口的】 观察木香对盐酸-乙醇致大鼠急性胃粘膜损伤的影响，了解木香的理气 及调和肝脾的作用。【原理】 急性胃粘膜损伤常有或肝脾不和等病理改变。木香有理气作用，常用 于治疗气滞证。胃酸升高或内服高浓度酒精均可导致胃粘膜急性损伤，故可采用盐酸 乙醇引起大鼠胃粘膜急性损伤，以此观察木香的理气及调和肝脾的功效。【器材】2nd及5ml的注射器、大鼠灌胃器、

37、手术剪、银子、夹子、尺子。【药晶】0. 4g/ml的木香水溶液、150mmol/l盐酸一60%乙醇混合溶液（以15ml 盐酸加无水乙醇600ml,再加蒸馆水至1000ml,即得）。【动物】大白鼠。【方法】 取同一性别、体重为180200g的大鼠4只，随机均分为二个组：第 一组为对照组，第二组为木香组。禁食48h （不禁水）后，灌胃给予生理盐水或-药液 10ml/kg, lh后每只大鼠灌胃盐酸一乙醇混合液（1. 5ml/只），再过lh后用过量乙醞麻 醉大鼠致死，开腹取胃，用夹子夹紧贲门，由幽门注入1%甲醛溶液5ml,夹紧幽门， 将全胃置于1%甲醛溶液中固定lomino沿胃大弯剪开，将胃外翻，用清

38、水轻轻洗去胃 内容物。将胃平铺于玻璃板上，用尺子测量胃粘膜损伤长度，以损伤长度（损伤宽度 大于1mm者加倍计算）总和作为胃粘膜损伤指数，进行统计学处理，并按下式计算抑 制率：抑制率（）=（对照组损伤t度一用药组损伤t度）一对照组损伤t度x100%【结果】对照组大鼠胃粘膜表面可见明显条索状和点状损伤，而木香组损伤较少。将实验数据填入表内。木香对盐酸-乙醇所致大鼠急性胃粘膜损伤的影响组别剂量（g/kg）胃粘膜损伤指数（mm） （x ±sd）抑制率（%）对照组木香组【注意】 禁食期间，大鼠笼内不得存留大便，以保证充分禁食。实验八 延胡索对小白鼠的镇痛作用（热板法）【目的】【原理】了解热板法

39、筛选镇痛约的实验方法；观察延胡索的镇痛作用。延胡索能活血行气止痛。热板法是筛选镇痛药的经典方法：小鼠的足部受热板刺激而产牛疼痛时，就发牛舔足的特殊反应。以接触热板到舔后足所需的吋间作为痛阈值,【器材】【药品】【动物】【方法】以此为观察指标。恒温水浴箱、大烧杯（500ml）.秒表、天平、注射器（1ml）、鼠笼。延胡索水溶液4g/ml.生理盐水、苦味酸。雌性小白鼠。调节热板仪温度，水温恒定在55±0.5°co每次取小鼠2只，放入热板仪内。记录自放入热板仪至出现舔后足所需吋间（s）,作为该鼠的痛阈值。凡30s内 不出现舔后足者，弃z不用。依次测量各小鼠的痛阈值。取预选合格的小鼠8

40、只，随 机分为2组，毎组4只，编号、再重测痛阈1次，将两次痛阈的平均值作为该鼠给药 前的痛阈值。然后，第一组腹腔注射延胡索液0. 2ml/10g,第二组腹腔注射等容量的生 理盐水作对照。给约后的15、30、45、60、90min测定各鼠痛阈值。若小鼠在热板上 60s仍无痛觉反应，应取出，按60s计。将结果记入表内，按不同时间测定的各鼠痛阈 平均值计算用药后痛阈提高的百分率。痛阈提高率=（给的后平均痛阈值一给的前平均痛阈值）/给的前平均痛阈值x100%【结果】按表进行记录。延胡索对小鼠的镇痛作用组别 给药前痛阈平均值（s）给药后痛阈值（s）痛阈提高百分率1530609015306090minmi

41、n对照组延胡索组【注意】（1）室温以1520°c为宜，过低则小鼠反应迟钝，过高则过于皱感，而引起跳跃， 影响实验的准确性。（2）正常小鼠一般放入烧杯后1015s内出现不安，举前肢，踢后肢，跳跃等显 现。这些动作均不作为疼痛指标，只有舔后足才作为疼痛的指标。（3）-般不选用雄鼠，因雄鼠阴囊可触及烧杯底部，易呈现敏感反应，影响结果。 【思考题】 试述延胡索镇痛的有效成分及机理。实验九 延胡索对小白鼠的镇痛作用（扭体法）【口的】 观察延胡索的镇痛作用。【原理】 延胡索能活血行气止痛。小白鼠腹腔受化学药物刺激，表现为扭体反 应，以此作为指标、观察金铃子散的镇痛作用。【器材】 注射器、烧杯、鼠

42、笼、计吋器等。【约品】 延胡索水煎液lg/ml. 0.6%醋酸溶液、生理盐水。【动物】小白鼠。【方法】 将小鼠称重、标记后随机分组。给药组灌服延胡索水煎液0. 3ml/10g, 对照组灌服等量生理盐水。给药后30min,各鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0. 2ml/只。观 察并记录注射醋酸溶液后1530min内出现扭体反应（腹部收缩内凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行）的次数及时间。计算延胡索的镇痛百分率。镇痛率=（对照组平均扭体次数一金铃了散组平均扭体次数）一对照组平均 扭体次数x100%【结果】将实验结果填入表内。延胡索对小鼠的镇痛作用（乂土sd）组别鼠数（只） 扭体出现时间（mih）扭体次数镇痛率

43、（）对照组延胡索组【注意】（1）0.6%醋酸溶液必须临用前配制。（2）若延胡索为生品，煎煮时可加入0.1 %醋酸或食用醋适量，以助生物碱成分 溶岀。（3）小鼠对疼痛刺激的反应差异甚大，据药理学惯例，镇痛百分率须大于50%才 认为冇镇痛作用。（4）也可用0.01%酒石酸铸钾溶液0.加1/只致痛，作扭体实验。实验计生三七粉对小白鼠凝血时间的影响（玻片法）【目的】 学习用玻片法测定小鼠凝血吋间；观察生三七对小鼠凝血时间的影响。【原理】 三七属止血药，有明显止血功效，常用于治疗咯血、鲍血、崩漏、尿 血等症。【器材】 注射器、载玻片、大头针、秒表、眼科弯银、棉花、鼠笼、天平。【药品】 生三七水浸液0.

44、15g/mk生理盐水、苦味酸溶液。【动物】小白鼠。【方法】 取小鼠68只，随机分为2组，给药组灌胃三七水浸液0. 3ml/10g,对照组灌胃生理盐水0. 3ml/10go 30min后，用眼科弯蹑迅速摘去一侧眼球，即冇血液 流出。于载玻片的两端各滴一滴血，血滴直径约5mm,立即用秒表计时。每隔30s用清 洁大头针自血滴边缘向里轻轻拨动一次，并观察有无血丝挑起。从采血开始至挑起血 丝止，所丿力时间即凝血时间。另一滴血供最后复验。记录凝血时间。【结果】按表记录数据。生三七对小鼠凝血时间的影响组别剂量（ml/10g）凝血时间(s) (x ±sd)给药组对照组【注意】（1）凝血时间可受室温等

45、因素影响，室温15°c左右较好。（2）每次挑血滴时，不应从齐个方向多次挑动，以免影响纤维蛋白的形成。 【思考题】（1）三七有何功效？止血用的主要方剂有哪些？（2）三七止血的主要成分是什么？实验计三七对小白鼠凝血时间的影响（毛细玻管法）【目的】 学习用毛细玻管测定凝血时间的办法；观察三七缩短凝血时间的作用。【原理】 三七是祛瘀、定痛、止血药，能诱致血小板释放止血和凝血活性物质, 增高血液屮凝血酶含量，从而缩短小鼠的正常凝血吋间，达到止血之效。采用小鼠给 纱后一定时间，取其血液在玻璃毛细管内折断时出现血凝丝所丿力时间为指标，即可判 明三七缩短凝血时间的作用。【器材】1迅注射器、毛细玻管（

46、内径lmm、长10cm）、灌胃针头、天平、秒表。【药品】生理盐水、三七水浸液0. lg/ml.苦味酸。【动物】小白鼠。【方法】 取小鼠6只，随机分为2组。2组均按0.2 ml / 10g剂量灌宵，分别 给予生理盐水、三七水浸液。2h后用玻璃毛细管插入小鼠内皆球后静脉丛，深约4 5mmo 口血液流进管内开始计时。血液注满后取出毛细管平放于桌上。每隔30s,折断 两端毛细管约0. 5cm,并缓慢向左右拉开，观察折断处是否冇血凝丝至血凝丝出现为止, 所历时间即为血凝时间。毛细管两端数据的平均值，即为该鼠的血凝时间。计算凝血 时间缩短百分率。凝血时间缩短百分率二（对照组血凝时间一给药组血凝时间）/对照

47、组凝血时间x 100% 【结果】按表填写数据。三七对小鼠凝血时间的影响（乂土sd）组别 剂量（mg/10g） 动物数 给药2h后凝血时间 凝血时间缩短百分率（） 对照组给药组【注意】（1）实验时室温最好在15°c左右。（2）测试用的毛细管内径应均匀一致。（3）毛细玻管采血后不宜长时间拿在手屮，以免影响凝血时间。 【思考题】 三七对凝血时间冇何影响？此作用临床意义何在？实验十二复方丹参滴丸抗家兔血栓形成的作用【h的】 观察复方丹参滴丸抗血栓形成的作用；掌握家兔体外颈总动脉-颈外静 脉血流旁路形成血栓的方法。【原理】 复方丹参滴丸为现今临床常用的心血管系统疾病药物。本实验利用家 兔体外颈

48、总动脉-颈外静脉血流旁路法形成血小板血栓。动脉血流屮的血小板，当接触 丝线的粗糙面时粘附于线上，血小板聚集物环绕线的表面形成血小板血栓，血小板的 粘附聚集功能受到抑制时，形成血栓的重量就较轻。因此，从血栓重量可测知血小板 的粘附聚集功能。【器材】 手术钳、丝线（4号、7号）、聚乙烯管（内径1価、2mm）.动脉夹。【药品】复方丹参滴丸溶液，12500u/ml肝素注射液，25%乌拉坦。【动物】家兔，雄性152kg。【方法】 取家兔，称重，静脉注射25%乌拉坦4ml/kg,气管内插聚乙烯管，并 分离右颈总动脉及左颈外静脉。在三段聚乙烯管的屮段放入一根长5cm的4号手术丝线。将肝素生理盐水溶液 （50

49、u/ml）充满聚乙烯管腔。当管的一端插入左颈外静脉后，从聚乙烯管注入肝素 50u/kg，夹住管壁。将管的另一端插入右颈总动脉。手术完成后立即灌胃给予药物（给 药组）或生理盐水（对照组）。给药容量为10ml/kgo 30min后开放血流，则血液从右 颈总动脉流经聚乙烯管，返回左颈外静脉。开放血流15min后中断血流，迅速取出丝 线称重，总重量减去丝线重即血栓湿重。按下列公式计算抑制率：抑制率二（对照组血栓重一给药组血栓重）对照组血栓重x100%【结果】按表记录数据。复方丹参滴丸对家兔血栓形成的影响 组别剂量（g/kg） 动物数（n） 血栓重量（mg）（疋土sd）抑制率（）对照组复方丹参滴丸组【注

50、意】（1）手术过程要求迅速，操作熟练。（2）注意及时吸出气管分泌物，保持呼吸道通畅。（3）严格控制并准确给予生理盐水肝素的剂量50u/kg,否则影响血栓的形成。【附】本法反映整体动脉血流屮血小板的粘附聚集功能，该实验条件控制较严。 血流速度、血小板数等均能影响血小板血栓的形成，本实验谋差较大。亦可取家兔或大鼠动脉血用体外血栓仪进行体外血栓形成试验，比较给药组与对 照组的体外血栓湿重和干重，并计算抑制率。【思考题】通过本实验，试讨论复方丹参滴丸抗血栓形成的作用和机理。实验十三川贝枇杷膏对小白鼠的止咳作用（潜伏期观察法）【目的】 学习氨水引咳法，观察川贝枇杷膏的止咳作用。【原理】 氨水为一化学刺激

51、性物质，其气雾吸入呼吸道后，刺激呼吸道上皮下 的感受器，可引起咳嗽。川贝枇杷膏有化痰止咳的功效，用于咳嗽气喘，咳痰不畅， 以及肺虚久咳等多种类型咳嗽。对这一实验性咳嗽有抑制作用。【器材】 广口瓶（250 ml）、注射器（1ml、10ml）、针头、灌胃针头、秒表。【一药品】 浓氨水（2528%）、生理盐水、紫苑水煎液（lg/ml）o【动物】小白鼠。【方法】 取健康小鼠，按体重均分2组，每组5只，第一组灌服川贝枇杷膏 0. 2ml/10g,第二组服同容积生理盐水,灌胃给药lh后,将小鼠放入250 ml的广口瓶 内，放入粘有浓氨水的棉球。观察小鼠咳嗽动作（腹肌收缩、张大嘴、有时可有咳声）, 记录小鼠

52、咳嗽的潜伏期（由放入棉球开始至发生咳嗽所需的吋间为潜伏期），并计算镇 咳率。镇咳率二（用药组咳嗽潜伏期一盐水对照组咳嗽潜伏期）/盐水对照组咳嗽潜 伏期x100%【结果】 川贝枇杷膏与生理盐水对照组比较，咳嗽潜伏期延长，表明有显著的 止咳作用。按表填写数拯。川贝枇杷膏对小鼠的止咳作用（x±sd）组別剂量咳嗽潜伏期（s）镇咳率（%）对照组给药组【注意】(1) 每次做完实验，小鼠取出后，广i瓶用湿抹布擦净，使余气散尽。否则会影 响下一只小鼠咳嗽潜伏期时间。(2) 放入粘有浓氨水的棉球后，广口瓶要迅速盖紧，否则会影响实验结果。【思考题】结合实验，讨论影响木实验的因素及实验结杲的意义。实验十四

53、 人参对小白鼠游泳时间的影响(抗疲劳实验)【目的】 学习小口鼠游泳实验方法，研究人参的抗疲劳作用。【原理】 人参有大补元气、益气生津之功效。人参促进机体对糖元和三磷酸腺 甘(atp)等能源物质的合成利用，并使剧烈运动时产生的乳酸转化为丙酗酸进入三竣 酸循环，为机体提供更多能量，因而人参可减轻体力劳动时的疲劳。本实验以小鼠游 泳吋间为指标观察人参的抗疲劳作用。【器材】 一定容量且深度为25cm的玻璃缸、负重物、温度计、1ml注射器。【药品】 人参水煎液lg/ml.生理盐水。【动物】小白鼠。【方法】 玻璃缸内加水，水深至20cm,水温保持在20±0.5°co取20只小鼠雌 雄各

54、半，分别称重、编号。按体重性别随机均匀分为两组。给约组小鼠腹腔注射人参 水煎液3g/kg (0. 3ml/10g),注射后立即计时,并在尾部束一个小鼠体重10%的重物。 对照组小鼠每只腹腔注射等容量的生理盐水，注射后立即计时，并在尾部束一个小鼠 体重10%的重物。注射后30min将小鼠分别放入玻璃缸内游泳，并重新计时。注意观察 当小鼠头部沉入水屮10s不能浮出水面者即为体力耗竭，即刻计吋为小鼠的游泳吋间。 与对照组小鼠比较进行统计学处理，测其显著性。【结果】按表记录。人参水煎液对小鼠游泳吋间的影响(尢土sd)生理盐水人参水煎液【注意】（1）最好是小鼠单独游泳。如果2只以上同时游泳，应注意观察，

55、不使小鼠彼此 靠近，否则会影响实验结果。（2）水温如果升高到2830°c或小鼠负重物较轻（5%体重）均会使小鼠游泳时间 明显延长。【思考题】 简要解释人参抗疲劳作用的机理及临床意义。实验十五人参对小白鼠耐常压缺氧的作用【口的】 学习小鼠耐常压缺氧的实验方法，研究人参增强机体耐常压缺氧能力。【原理】 缺氧对机体是一种劣性刺激，影响机体各种代谢，特别是影响机体的 氧化供能，最终会导致机体的心、脑等重要器官供氧不足而死亡。人参可提高机体的 血氧利用率，降低机体耗氧量。同吋人参可扩张血管（特别是冠脉和软脑膜血管），改 善微循环，增加供血供氧量，从而改善机体的缺氧状态，显示人参大补元气，益气生

56、 血之功效。本实验以小鼠在常压缺氧条件下呼吸停止死亡为指标，研究人参的耐缺氧 作用。【器材】200ml磨口广口瓶、1ml注射器、秒表。【约品】 人参水煎液0. lg/ml,钠石灰（或等量氢氧化钠或碳酸钙）、生理盐水、 凡士林。【动物】小白鼠。【方法】 取小鼠20只分别称重、编号，按体重、性别随机分为两组。给药组小 鼠腹腔注射人参水煎液3 g/kg （0. 3ml/10g）,对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水。注 射ju 30min将小鼠放入盛有10g钠石灰的广口瓶内（每瓶放1只小鼠），用凡士林涂抹瓶口盖严，使z不漏气，立即计时。以呼吸停止为指标，观察小鼠死亡的时间。与对 照组比较进行统计学处理。【结果】按表记录。人参水煎液对小鼠常压耐缺氧作用（x 土sd）组别剂量(g/kg)存活时间（min）生理盐水人参水煎液【注意】（1）每瓶内最好只放1只小鼠，以防互相扰动影响耐缺氧时间测定。（2）瓶盖一定要密闭封严，以防漏气。（3）广口瓶容积可选用150200mlo（4）具有镇静作用的药物也能延长缺氧的存活时间。【思考