1、【单选题】使用超净工作台进行无菌操作实验前，至少开启紫外灯照射杀菌
A、5 min
B、15 min
C、30 min
D、10 min
2、【单选题】制作酒精棉球常用的酒精浓度为
A、50%
B、75%
C、80%
D、95%
3、【单选题】培养基灭菌的常用方法是
A、紫外线消毒
B、煮沸法消毒
C、高压蒸汽灭菌
D、干热灭菌
4、【多选题】关于溶液的配制，下列说法正确的是
A、配制溶液时，一般先调pH，然后定容。
B、称取微量药品时，一般用分析天平称量。
C、配制测活液母液时，pNPP在溶液中易分解，需要现用现加。
D、配制的溶液，可以不用调pH直接使用。
5、【判断题】使用离心机时，一定要将同样重量的离心管对称放入离心转子内让离心机的轴受力平衡。
A、正确
B、错误
6、【判断题】电子天平使用时一定要调水平，并依据称量需求选择不同精度和量程的天平。
A、正确
B、错误
7、【判断题】高压灭菌结束后，压力降到0 Mpa时就可以从高压锅内取出灭菌物品。
A、正确
B、错误
8、【判断题】使用酸度计pH时，由于pH电极泡一般是玻璃的，容易破裂，酸度计pH电极不要触碰到磁子，也不要触碰到容器如烧杯底部。
A、正确
B、错误
9、【判断题】核酸蛋白检测仪又称紫外检测仪，是生物化学实验或液相色谱实验中常用的一种紫外检测仪，常用于检测蛋白核酸的分离纯化。
A、正确
B、错误
10、【判断题】分离纯化碱性磷酸酶等生物分子时，常用一套完整的由层析柱、 梯度混合器、 恒流泵、核酸蛋白检测仪与记录仪、自动部份收集器串联组成的蛋白纯化系统，实现生物分子分离纯化过程的半自动化及其时时监控。
A、正确
B、错误
1、【单选题】以下测活方法中，最常用的是
A、分光光度法
B、荧光法
C、同位素测定法
D、电化学法
2、【单选题】测活时，需要测定酶促反应的初速率，其目的是
A、节约底物
B、尽快完成实验
C、减少其它因素影响
D、准确反映酶的真实催化能力
3、【单选题】乳酸脱氢酶催化的反应中，通过测定，得知在最适反应条件下，在0.1ml酶样品的作用下，每10分钟有0.3摩尔的丙酮酸分子被还原为乳酸，则1 ml酶样品所含的酶活力国际单位（IU）数为
A、3，000
B、30，000
C、300，000
D、3，000，000
4、【单选题】以下步骤中，连续法测活的正确顺序为何？①利用分光光度计连续测定吸光度的变化②将适量酶加入底物溶液中，快速混合③利用吸光度变化的动力学曲线计算酶活力 ④将酶与底物的混合液迅速转移入比色杯中，放入分光光度计
A、①②③④
B、②④①③
C、③④①②
D、②①④③
5、【多选题】在用终止法测定酶活力时，以下哪些物质可用于配制终止液
A、蛋白变性剂
B、酶抑制剂
C、酶激活剂
D、金属离子螯合剂
6、【多选题】下列关于酶活力测定的描述中，错误的是
A、酶活力的大小可通过测定反应物浓度的减少量或产物浓度的增加量来确定
B、1个酶活力国际单位是指在最适反应条件下，1 分钟内能催化1mol底物转化为产物所需的酶量
C、酶促反应速率越快，表明酶活力越高
D、酶活力测定的最适温度通常是37摄氏度
7、【判断题】在测定酶活力的实验中，将底物溶液加入酶溶液中。
A、正确
B、错误
8、【判断题】在测定酶活力的实验中，底物的数量与酶的数量相比是过量的。
A、正确
B、错误
9、【判断题】在测定酶活力时，通常测定产物浓度的变化，用于计算酶活力的大小。
A、正确
B、错误
10、【判断题】在利用分光光度法测定酶活力时，吸光度的值总是由小变大。
A、正确
B、错误
1、【单选题】下列对凝胶层析的称呼，错误的是
A、分子筛层析
B、凝胶过滤层析
C、凝胶渗透层析
D、疏水层析
2、【单选题】凝胶层析能够分离各组分的原理是
A、待分离组分的分子大小不同
B、待分离组分所带电荷数不同
C、待分离组分在流动相和固定相之间分配系数不同
D、待分离组分能够与某些相对应的专一分子特异识别和可逆结合
3、【单选题】本次凝胶层析中使用的介质是Sephacryl S-200 HR，其分离范围是
A、1-100 KDa
B、5-250 KDa
C、10-1500 KDa
D、20-2500 KDa
4、【多选题】凝胶层析中某一溶质在凝胶内部和外部的分配系数，也就是Kd值，与下面哪个因素有关
A、柱子长短
B、被分离物质分子的大小
C、凝胶颗粒孔隙的大小分布
D、柱的粗细
5、【多选题】在实际工作中，我们通常使用Kav，也就是有效分配系数来代替Kd。计算Kav的话，需要测定出哪些参数
A、内水体积Vi
B、外水体积Vo
C、基质体积Vg
D、柱体积Vt
E、洗脱体积Ve
6、【多选题】影响凝胶层析柱选择性的因素有
A、层析介质
B、柱长
C、待分离样品的形状
D、流速
7、【判断题】凝胶层析中，比凝胶孔径大的分子最先被洗脱出来。
A、正确
B、错误
8、【判断题】对于某一型号的凝胶，在一定的分子量范围内，各个组分的Kav与其分子量的对数成非线性关系。
A、正确
B、错误
9、【判断题】实际工作中，我们经常使用操作压来装柱和平衡。操作压是指层析柱内液面与出水口的高度差，或者是贮液器内液面与出水口的高度差。
A、正确
B、错误
10、【判断题】凝胶层析柱中有肉眼可见的小气泡，对分离效果影响不大。
A、正确
B、错误
1、【多选题】外源蛋白可以通过下列哪种途径表达
A、大肠杆菌
B、啤酒酵母
C、昆虫细胞
D、哺乳动物细胞
2、【多选题】T7 表达体系里面包括什么
A、T7 启动子
B、T7 RNA 聚合酶
C、T4 DNA 连接酶
D、lac 启动子
3、【多选题】如果蛋白在37°C下无法可溶表达，可以从采取如下步骤
A、低温表达
B、高温表达
C、溶解包涵体
D、加入过量IPTG
4、【多选题】LB培养基成分包括什么
A、酵母提取物
B、胰蛋白胨
C、NaCl
D、琼脂
5、【多选题】培养过夜的菌液扩大培养后，等OD600到达如下什么值时比较适合诱导
A、0.1
B、0.8
C、1.0
D、3.0
6、【判断题】从肝脏中直接提取的蛋白其来源属于天然来源。
A、正确
B、错误
7、【判断题】使用IPTG诱导外源基因表达时，应该预先筛选IPTG浓度。
A、正确
B、错误
8、【判断题】使用T7表达系统的原因是因为T7RNA聚合酶保真性好。
A、正确
B、错误
9、【判断题】在T7表达系统中，T7RNA聚合物本身的表达无需诱导。
A、正确
B、错误
10、【判断题】如果蛋白无法可溶表达，有时候可以加上一个标签使它以融合蛋白的形式表达可以得到可溶的表达产物。
A、正确
B、错误
1、【多选题】 细胞破碎的正确方法包括
A、超声破碎
B、高压挤压
C、加入噬菌体
D、激光
2、【多选题】下面哪种层析技术中蛋白是先被吸附到了介质上
A、分子筛层析
B、离子交换层析
C、亲和层析
D、疏水层析
3、【多选题】下面哪种层析方法不会稀释产物
A、分子筛层析
B、离子交换层析
C、疏水层析
D、亲和层析
4、【多选题】下面哪种方法是常用浓缩蛋白的方法
A、超滤
B、盐析
C、真空冷冻干燥
D、蒸发浓缩
5、【多选题】在pH 7.0的缓冲条件下，下面哪种等电点的蛋白可以用阴离子交换树脂分离纯化
A、4.0
B、5.0
C、7.0
D、8.0
6、【多选题】蛋白的哪种特性可以用来粗纯化
A、热稳定性
B、等电点
C、是否结合金属
D、疏水性
7、【多选题】蛋白哪种性质可以用来设计层析实验对其进行纯化
A、与特定抗体结合
B、分子大小
C、热稳定性
D、等电点
8、【判断题】如果蛋白可以利用亲和层析分离纯化，那么通常会首先考虑亲和层析。
A、正确
B、错误
9、【判断题】设计纯化实验时，尽量不要利用相似原理的纯化步骤进行多步纯化。
A、正确
B、错误
10、【判断题】在超声破碎时，可以连续超声5分钟，这样可以快速完成细胞破碎。
A、正确
B、错误
1、【多选题】下面哪些是我们需要评估的指标
A、蛋白纯度
B、蛋白回收率
C、提纯倍数
D、蛋白分子量
2、【多选题】我们进行了如下提纯，纯化步骤顺序为从A到D，每步我们都列出了其产物所测到的比活力（单位为 U. mg-1）。那么哪几步纯化是有效的
A、1000
B、15000
C、40000
D、39000
3、【多选题】下面哪种方法能够评估蛋白的样品均一性
A、SDS-PAGE
B、Native PAGE
C、分子筛层析
D、酶活测定
4、【多选题】下面哪种方法不能够评估蛋白的纯度
A、SDS-PAGE
B、酶活测定
C、质谱
D、离子交换层析
5、【多选题】如果有一个蛋白A， 其分子量为40 KD。 它在Native PAGE上产生两条条带，下面哪种说法有可能具有合理性
A、两条条带分别为单体和二聚体
B、两条条带分别为单体和某个降解产物
C、两条条带分别为单体和四聚体
D、两条条带分别为二聚体和四聚体
6、【判断题】纯化蛋白时不一定是越多的纯化步骤效果就越好。
A、正确
B、错误
7、【判断题】如果在SDS-PAGE上看到一条条带，我们可以断定该蛋白的纯度已经达到100%。
A、正确
B、错误
8、【判断题】通过SDS-PAGE我们可以判断蛋白单体的分子量。
A、正确
B、错误
9、【判断题】Native PAGE不能用于判定蛋白的分子量。
A、正确
B、错误
10、【判断题】通过Native PAGE我们可以判定蛋白为几聚体。
A、正确
B、错误
1、【单选题】下面哪一物质是蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳所不需要的。
A、Tris
B、丙烯酰胺
C、醋酸
D、过硫酸铵
2、【单选题】SDS处理后蛋白在胶上的迁移率主要受何种因素影响。
A、分子形状
B、分子量
C、所带电荷
D、所有这些
3、【单选题】一个100KD的蛋白适合有T值为哪个的聚丙烯酰胺凝胶来分离。
A、4%
B、10%
C、15%
D、5%
4、【单选题】聚丙烯酰胺凝胶电泳四甲基乙二胺TEMED的作用是
A、催化剂
B、加速剂
C、凝固剂
D、交联剂
5、【单选题】聚丙烯酰胺凝胶电泳过硫酸铵APS的作用是
A、催化剂
B、加速剂
C、交联剂
D、凝固剂
6、【单选题】SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，蛋白样品的迁移率与下列哪个因素有关
A、所带电荷多少
B、分子大小
C、分子形状
D、蛋白浓度
7、【单选题】对不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳说法不正确的是
A、蛋白先进入分离胶再进入浓缩胶
B、主要用于蛋白质样品的分离与分析
C、包括2层凝胶（分离胶和浓缩胶）
D、凝胶孔径不连续
8、【单选题】不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳不具有下列哪些作用
A、浓缩效应
B、电荷效应
C、疏水效应
D、分子筛效应
9、【判断题】蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳必须使用SDS，如果没有SDS处理电泳结果毫无意义。
A、正确
B、错误
10、【判断题】SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，蛋白的迁移率与其分子量成线性关系。
A、正确
B、错误
1、【单选题】根据稳态理论，酶促反应开始后，在一定时间内可保持不变的是什么？（这是推导米氏方程的重要前提）
A、[S]
B、[P]
C、[ES]
D、[EP]
2、【单选题】对于遵守米-曼氏动力学的酶来说，当底物浓度等于2Km时，酶促反应速率与Vmax之比为
A、1/2
B、2/3
C、3/4
D、4/3
3、【单选题】为测定kcat值，首先需要测定
A、Ki
B、Vmax
C、Km
D、Vmin
4、【多选题】酶促反应的各动力学参数中，与酶浓度无关的是
A、Ks
B、Vmax
C、Km
D、kcat
5、【多选题】以下关于Km的描述中，正确的是
A、Km在数值上等于酶促反应速度为最大反应速率一半时的底物浓度
B、Km的大小与酶的浓度有关
C、同一种酶针对不同底物有不同Km值
D、Km值可用来精确地表示酶与底物之间的亲和程度
6、【多选题】测定底物浓度对酶促反应速率的影响作用时，需要注意的问题包括
A、底物浓度需要过量
B、 考虑酶溶液的加入对底物浓度的影响作用
C、严格控制反应条件（温度、pH值等）
D、严格控制反应时间
7、【判断题】酶促反应过程中，每一时刻的瞬时速率都不一样。
A、正确
B、错误
8、【判断题】如果酶促反应在刚开始的一段时间内反应速率保持不变，则此段时间内的平均速率就能代表反应初速率。
A、正确
B、错误
9、【判断题】测定底物浓度对酶促反应速率的影响作用时，需要保持酶浓度不变。
A、正确
B、错误
10、【判断题】对于遵守米-曼氏动力学的酶来说，在双倒数图中，其动力学曲线与横轴的交点的数值为1/Km。
A、正确
B、错误
