作者：于秀羽

单位：石家庄平安医院检验科

生化反应曲线可以监控生化反应的整个过程，通过反应曲线可以反应试剂、仪器、标本是否有问题，来确定标本检测结果是否可靠。

一日在审核生化结果时发现儿科一位3天患儿肌酐检测值89.8
umol/L，根据国家卫健委发布的《儿童临床常用生化检验项目参考区间》中肌酐的参考区间：

虽然本案例中由于患者年龄较小无相应参考区间，但参照28天~2岁，13-33
umol/L，肌酐89.8
umol/L明显增高，血肌酐增高常见于各种原因引起的肾小球滤过功能减退，查询患儿病历临床诊断为新生儿高胆红素血症，这个结果可信吗？

笔者核对标本信息，信息无误；检查标本状态，有黄疸，无溶血，无絮状物；重新检测标本，检验结果一致；查看反应曲线如下：

本次使用生化仪器为迈瑞BS-850（以下简称A仪器），试剂为某国产B厂家试剂（以下简称B试剂），校准品为B厂家试剂，试剂与校准品均在有效期内，实验方法肌氨酸氧化酶法，反应类型两点终点法，反应方向为上升。

后将标本用A仪器的原厂试剂（以下简称A试剂）检测，校准品为A厂家试剂，试剂与校准品均在有效期内，实验方法肌氨酸氧化酶法，反应类型两点终点法，反应方向为上升，但检测为结果30.1umol/L。反应曲线如下：

为何两次结果会有如此大的差距？

终点法是指经过一段时间的反应，反应达到平衡，由于反应的平衡常数很大，可认为全部底物(被测物)转变成产物，反应液的吸光度不再增加(或降低)，并且吸光度的增加(或降低)程度与被测物的浓度成正比^[2]。

本实验所用仪器的试剂样本添加顺序是：先加R1试剂，再加样本，最后是R2试剂。采光周期共33个点，以加入第一试剂（R1）后的第1个采光点为第1点，5点加入样本，搅拌混匀，17点加入R2试剂，搅拌混匀。

空白时间是指加入样本至加入R2之间的时间，A试剂测光点在14-16，B试剂在13-15。

反应时间是指开始反应到反应结束的时间跨度。A、B试剂的测光点均在31-33。

正常反应曲线应在反应到达终点，即在时间-吸光度曲线的31-33点吸光度不再改变。正常的反应曲线：

单试剂两点终点法

双试剂两点终点法

本次检验中B试剂实验反应的吸光度如下：

由图可以看出在测光点31-33主-次波长的吸光度分别是415.84、424.15、433.92，为上升趋势，并未达到平衡。

那么是什么原因导致的呢？因反应曲线可将反应全程完整反应出来，其可综合反应设备状态、标本以及试剂有效性[3]，那这次的原因是仪器、试剂还是标本？

标本的因素在前面已排除，那来看一下仪器，查找A试剂实验反应在测光点31-33中主-次波长的吸光度，分别是252.24、254.02、255.00，由于两家试剂厂家不一样，无法直接从吸光度数值上进行比较，但却可以看出A试剂在反应终点处已达到平衡。由此可以排除是仪器的原因。

剩下就是试剂的原因，联系工程师更换试剂，更换试剂后没有标本再出现此类现象，由此可以确定此次两次结果相差如此之大，是由试剂导致的。试剂是保证检测试验结果质量的重要因素之一,当检测发生问题时,快速排除试剂问题是非常必要的^[4]。

那试剂又是哪部分出错了呢？笔者分析了一下，不对之处还请各位老师批评指正。B试剂的说明书中对试剂空白的要求是不大于0.600，上图中在加入样本前的吸光度是133左右，在正常范围，试剂空白符合要求，即是R1试剂的原因不大。但在加入样本和R2试剂的反应终点处未达到平衡，因此R2试剂发生变质的原因较大。

随着医学技术的不断发展，仪器自动化的程度越来越高了，但仪器只会按着设定好的程序运行，无法自动处理一些疑难问题，这时候就需要检验人对仪器及结果进行监督、核对及分析，而生化反应曲线就是一个很好的监控工具。不同的反应曲线可以反应仪器、试剂、校准、质控、标本等问题，及时有效的发现失控或错误发生的原因，但也有反应曲线不能解决的问题，例如样本含有少许纤维蛋白吸样量少影响结果等，在实际工作中要综合其他因素分析问题，减少一些不必要的错误，提高检验质量，更好地为患者服务^[5]。

参考文献

[1]WS/T
780-2021 儿童临床常用生化检验项目参考区间

[2]迈瑞BS-850全自动生化分析仪使用说明书

[3]章雅峰.浅析临床生化检验结果反应曲线发生异常的相关因素[J].临床医药文献电子杂志,2015,2(27):5588+5592.

[4]陈燕,康熙雄,黄泽玉,等.临床生化实验室测试过程中分析生化反应曲线对于试剂质量评估作用的探讨[J].标记免疫分析与临床,2017,24(04):456-459.

[5]郗志华.浅谈西门子生化仪反应曲线[J].山西职工医学院学报,2017,(04):25-27.

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