患者男,70岁,多关节疼痛1+月,就诊于我院风湿免疫科,入院考虑诊断:类风湿关节炎,累及其他器官和系统。为明确病因开具一系列检查,检查发现:该患者血常规仪器的CRP结果与生化仪器的CRP结果相差一百倍以上。
生化仪器结果如下:CRP 108.1mg/L。
血常规仪器结果如下:CRP 0.37mg/L。
当出现两种差异过大的结果时,到底哪个结果才是准确的?带着疑问,我开始寻找原因以及做一系列实验。
首先核对样本及病人信息等,排除人为的原因;查看两台仪器当日质控以及其他样本结果,排除仪器原因;检查人员操作以及科室环境,均无异常。这个时候就可以开始寻找样本本身原因。
查看病例,发现该患者考虑为类风湿关节炎患者。有文献表明,RF可能会干扰CRP的结果,并且该患者RF结果高达2080IU/ml。
免疫结果如下:
案例总结
该患者的CRP生化仪检测使用的是免疫透射比浊法,而hs-CRP检测使用的是乳胶增强免疫散射比浊法。
RF是目前最常报道的干扰免疫透射比浊法的内源性干扰物质。RF对免疫透射比浊法的干扰机制主要为RF与试剂2中包被抗体的胶乳颗粒发生非特异聚集反应,造成反应体系的浊度增加。研究显示,RF对血清CRP检测有正干扰;患者样本中的RF、M蛋白、嗜异性抗体会干扰基质金属蛋白酶3(MMP-3)的检测;RF会干扰CysC的检测,使结果异常升高。
在免疫透射比浊法试剂中,一般在试剂2中含有包被检测抗体的胶乳颗粒,嗜异性抗体可结合该检测抗体,发生聚集反应,使浊度升高,对检测造成正干扰。RF对免疫测定系统的干扰具有随机性,其原因可能是由于RF的自身特异性和同系的特异性,导致只有RF的抗原决定簇与IgG的Fc段有互补性才可能结合[3]。
当怀疑有内源性干扰时,可以采取以下措施进行确认和纠正:
0.9%氯化钠溶液倍比稀释,观察待测物浓度是否呈线性。但即使稀释后结果呈线性,也不能完全排除内源性抗体或Ig的干扰。
采用不同检测系统进行复检,但当检测结果一致时,也不能完全排除,有可能都受到干扰。
直接检测可能产生干扰的内源性Ig,如RF、M蛋白等。
在样本中加入待测物,进行回收实验。
采用相应的抗体阻断剂,如检测前在样本中加人动物血清、动物源lg或商品化封闭剂等。
采用聚乙二醇对样本进行前处理,去除沉淀后再进行检测。
经验总结
因为RF对免疫测定系统的干扰具有随机性,RF对免疫测定系统干扰程度与其浓度无关,无论是高浓度还是低浓度都可能会对检测系统产生干扰[3]。所以,在今后的检验工作中,当我们再次遇到此类病人需要审核结果时,需注意结合临床其他检查结果进行判断,提高检验结果的可靠性和准确性,发出一份客观、准确的报告。
【参考文献】
[1] 陈曦, 崔丽丽, 张然, et al. C反应蛋白检测与应用的研究进展[J]. 检验医学与临床, 2023, 20(8): 1139-1142.
[2] 冯晖, 赵进, and 马晶. 3种C反应蛋白检测方法的比较[J]. 国际检验医学杂志, 2014(11): 1470-1470,1473.
[3] 谢良才, 刘天春, 范文, et al. 类风湿因子对免疫测定干扰的研究进展[J]. 医学综述, 2015(19): 3495-3497.
[4] 贾珂珂, 孙文苑, 聂睿, et al. 免疫透射比浊法常见干扰因素的识别与应对策略[J]. 检验医学, 2021, 36(4): 362-368.
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