HPV是人乳头瘤病毒（Human Papilloma Virus）的缩写，属于乳多空病毒科乳头瘤空泡病毒A属，是球形DNA病毒，基因组长约8000碱基对（bp），分为3个功能区，即早期转录区（E区）、晚期转录区（L区）和非转录区（长控制区，LCR）。根据HPV病毒基因E6、E7和L1基因序列可对HPV进行基因分型。目前已发现超过200种HPV型别，根据致宫颈癌和癌前病变的相关性，可以把HPV分为高危型（high-risk）和低危型（low-risk）。

常见的有

高危型：HPV16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82, 83等;

低危型：HPV6, 11, 42, 43, 44, 81等。

      多项研究证实，低危型HPV主要引起皮肤表面的良性疣体，高危型HPV的持续感染则可能导致宫颈病变，是宫颈上皮内瘤变和宫颈癌发生的必要条件。从HPV感染到发展成宫颈癌，通常需要10-15年。如果在疾病进展中，早期检测发现，并在癌前病变阶段进行治疗，及时清除病毒，有98%的病例可以治愈！

      HPV以性接触为主要的传播途径，其他的途径如皮肤黏膜接触传播或母婴传播。日常生活中，约80%的女性感染过HPV，但大部分患者凭借自身的免疫力一到两年内可以自行消除，仅有少数的女性会存在HPV的持续感染。

     目前宫颈癌筛查策略包括传统细胞学检查、液基细胞学检查、醋酸染色肉眼观察法、HPV DNA检测等。宫颈细胞学检查是普遍应用的宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的筛查方法，可发现早期病变，但宫颈细胞学检查存在方法学局限性。精准、快速、高效的HPV筛查是全球消除宫颈癌战略的关键环节。

      20世纪70年代德国Hausen教授发现高危型HPV感染与宫颈癌的发生密切相关，直到1995年国际癌症协会确定人乳头瘤病毒是宫颈癌的主要病因，这一发现在宫颈癌防治中具有里程碑的意义。这不仅促进了HPV疫苗的问世，而且推动了应用HPV DNA检测作为宫颈癌筛查的方法。

      2021年7月6日，世界卫生组织（WHO）发布了宫颈癌预防中宫颈癌前病变的筛查和治疗指南，建议优化诊断工具与筛查选择，推荐以HPV DNA检测作为宫颈癌筛查的首选筛查方法。至此，宫颈癌筛查正式从细胞学检查时代进入HPV DNA时代。

     指南推荐所有一般女性从30岁起，都应该每5-10年进行HPV DNA检测。而针对HIV感染女性，指南推荐从25岁起，每3-5年进行HPV DNA检测。同时，指南建议，检测由医疗卫生专业人员采样或由女性经过专业指导后自行采样。

      目前国内临床上进行HPV DNA检测的主要方法有实时荧光定量PCR法、基因芯片法、杂交捕获法（Hybrid Caprure II，HC II）。

1. 杂交捕获法（HC II）

      HC II是全球第一款HPV检测产品，由美国Digene公司开发生产，已获美国药品食品监督管理局（FDA）批准用于临床HPV DNA检测和宫颈癌筛查。该产品的推出标志着宫颈癌的早期检测从单纯的细胞学检测跨入了细胞学与核酸共检测时代。该技术采用全长8000个碱基的RNA探针，靶DNA变性为单链后与RNA探针杂交，形成DNA RNA杂交体，再被包被了抗DNA RNA杂交体抗体的微孔板捕获，DNA RNA杂交体与标有多个碱性磷酸酶的第2抗体结合，通过酶化学发光测定信号强度，与标准品比较有软件计算出样本中靶核酸的浓度。HC II可检测13种高危型HPV病毒，但无法对病毒的型别做出区分。

2. 基因芯片法

      基因芯片法是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量DNA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后与标记的样本杂交，通过对杂交信号的检测分析，得出样本的遗传信息（基因序列和表达信息）。目前国内的基因芯片法HPV检测试剂都是采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的DNA芯片技术。

      目前国内的HPV基因分型检测试剂盒，均是利用HPV的基因特点设计特异引物，可以同时扩增出23种HPV基因型的目标片段，包括18种高危型和５种低危型，然后再将扩增产物与固定在膜条上的包括高危型和低危型在内的分型探针进行杂交，依据杂交信号的有无来对HPV的感染情况进行定性检测并加以分型。可检测的HPV型别包括18种高危型（HPV16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 83, MM4）以及５种低危型（HPV6, 11, 42, 43, 44）。基因芯片法的检测结果只能对样本进行定性分析，以检测位点出现信号与否来进行判断，信号点的强弱不能提供定量方面的参考。

3. 实时荧光定量PCR法

      实时荧光定量PCR技术在常规PCR基础上加入荧光标记探针，从PCR扩增到得出结果是在完全封闭的系统中运行，无需PCR后处理，从而避免了扩增产物污染和交叉污染的可能性。同时在扩增时结合了特异探针的杂交，进一步提高了实验的敏感性和特异性，而且可以实时荧光监测扩增过程，结果准确可靠，而且可一次同时检测多种HPV不同亚型的DNA，非常适合用于临床的大面积筛查。荧光定量PCR法检测为阳性即可对HPV阳性感染进行确诊，目前实时荧光定量PCR技术已越来越广泛的应用于HPV的临床检测。

      这３种方法作为临床宫颈癌筛查的手段各有优劣，以下我们从方法学的角度进行综合性分析和比较（表1）。

      当然，随着分子生物学技术的不断飞速发展，还有越来越多的HPV基因检测技术涌现出来。DNA测序，飞行时间质谱等也技术逐渐应用于临床。

1. HPV感染的确定和病毒类型的分型。低危型HPV感染一般不会导致宫颈癌或癌前病变，但是高危型HPV病毒持续性感染会直接导致宫颈癌和宫颈癌前病变，如CIN2-3级，即鳞状上皮细胞中到重度异型增生可发展为宫颈癌。

2. 宫颈病变及宫颈癌的筛查。不同型别致癌能力不同，通过分型检测，对患者进行个体化评估，预测宫颈病变发生的风险度，从而决定筛查的间隔、治疗方案的制定等。HPV DNA检测比传统的宫颈癌筛查方法更早发现宫颈癌前病变，有利于早发现、早诊断、早治疗。

3. 预测患者病变的发展或转归。对于非CIN的HPV检测阳性患者，根据病毒型别及载量的变化，可以预测患者病变的发展或转归。风险提示高病毒载量预示患者病情相对更严重以及潜在的病变风险更高，提示临床需进行更为积极的管理。

4. 未明确诊断意义的非典型鳞状细胞和腺细胞（ASC-US/AGUS）的分流。HPV DNA分型检测可排除可疑或低度病变，提高诊断的可信度，降低漏诊风险。HPV检测阴性，可列入常规筛查人群；HPV检测阳性，则考虑配合阴道镜检查。

5. 宫颈病变治疗后的追踪与随访。通过分型检测，预测病变进程及复发的风险，有效指导术后追踪与随访。治疗前后感染型别是否相同可作为手术成功与否的一个重要标志。

6. HPV流行病学调查研究和疫苗研制的重要依据。不同国家地区引起宫颈疾病的HPV型别分布有差异，据此结果可指导疫苗研制及应用。