如果你已经拥有了一台快速PCR仪,那么你就需要一个快速的酶来与之配对;而如果你只有普通的PCR仪,快速的PCR试剂也能让你增速不少。在PCR反应中,延伸阶段的持续时间主要取决于DNA聚合酶的延伸速率,提高聚合酶的活性,就可以缩短延伸步骤所需的时间,乃至整个PCR 反应所需的时间。这也就是说,大家可以通过挑选好的DNA聚合酶来提高pcr的效率。当然,在现在基本流行预混液的年代,挑选高效的DNA聚合酶就和挑选pcr预混液划等号了,那么应该怎么选购一款高效好用的pcr Mix呢?
首先我们先来了解下现行市场的pcr Mix类型:
常温运输、常温存储
较贵
常规的Taq酶DNA聚合酶
经修饰的高温才会被激活
虽然市场现行的各种PCR预混液看得人眼花缭乱,但是作为它们都有个核心技术点就是DNA聚合酶,只要瞅准了这个点就不会陷入迷茫了!
在我们了解了PCR预混液的类型后,我们还需要在选购的时候评估一些什么点呢?
产品稳定性评估
像pcr这种我们科研日常高频的实验动作,产品成熟度、稳定性是必须考量的。而我们可以通过评估一个品牌公司的历史、生产MIX的历史以及使用经验、paper引用量等来评估产品的稳定性。
自己的实验情况
在这里我们还要知道的是,高保真DNA聚合酶产物不能用于TA 克隆;染料也是我们需要注意的点,有染料虽然可以使我们后续的核酸鉴定变得轻松,但是染料也会影响后续的DNA复制等。所以,大家在选购PCR MIX的时候一定要结合自己的实际需求。
好的,上边说了这么多理论性的东西,为了让大家更好地理解,也随便种草一下三三自家的一个PCR MIX(哈哈),下边我给大家介绍一下我们家的Solis BioDyne PCR MIX系列,欢迎大家点评啦!
Solis BioDyne PCR MIX系列:
货号
名称
规格
单位
04-12-00S15
FIREPol PCR绿色预混合(7.5 mM MgCl2)
0.1mL
包
04-25-00S15
热启动FIREPol混合酶绿色预混液(7.5 mM MgCl2)
0.1mL
包
06-16-0000S
FIREScript逆转录预混液(含4种引物组合)
20rxn
包
08-17-0000S
FIREPol探针法qPCR预混液
0.2mL
包
08-36-0000S
FIREPol染料法EvaGreen定量PCR超级预混液
0.2mL
包
08-55-0000S
SOLIScript一步法多重探针法qPCR试剂盒
50rxn
包
24-22-0000S
SolisFAST 快速PCR绿色预混液(含UNG酶)
0.2mL
包
Solis BioDyne
Solis BioDyne来自欧盟-爱沙尼亚共和国,成立于1995年;欧洲PCR试剂生产领导者。所有产品都已通过ISO9001和ISO13485认证。增加多肽稳定性的配方和相关方法已申请欧盟、美国、韩国专利专利,高标准的生产标准和服务使Solis BioDyne成为全球值得信赖的首选PCR供应商。Solis BioDyne的DNA聚合酶,PCR Master Mixes,qPCR Mixes和其它试剂畅销110多个国家,深受各国研究者青睐,包括顶级研究机构和生物技术公司。
产品特点
1)独特性:常温下酶活性稳定。加上Stability TAG,使多肽在室温下更稳定,含稳定标签的FIREPOL DNA聚合酶活性更稳定;
2)5X预混液:有更大的空间加入样品、引物和探针;做多重实验更方便;
3)通用型Taq DNA聚合酶,价格便宜,性能可靠;
4)FIREPol热启动DNA聚合酶是化学修饰型,活性封闭更彻底,(95℃热启动10-12min进行激活)
5)减少风险、精简包装、降低成本;
产品优势
1)高稳定性:Delays in Customs(报关延迟);Trips in suitcase(放进行李箱);Power outages(冰箱停电);Convenient reaction set-up at room temperature(在室温配置反应体系更方便);Perfect for high-throughput platforms(通量高了也不影响);Absentmindedness(忘记收起来);
2)低成本 :减少干冰、泡沫盒及包装箱运输上造成的成本;

3)活性稳定
※ 所有产品室温保存1个月后,活性完全无损失。

※ Stability TAG improves also long-term stability of our enzymes stored at -20℃(稳定性标签也能提高保存在-20℃的稳定性);

特色产品介绍
1)采用SolisFAST DNA聚合酶的终点法PCR预混液用于快速PCR;
SolisFAST DNA聚合酶是采用寡核苷酸原理的热启动,只需热激活30秒,延伸速度是Taq DNA聚合酶的3-4倍,掺入dUTP的速度更快,PCR运行时间由120分钟缩减到20-40分钟。
2)使用dUTP和UNG酶可以降低假阳性,消除PCR产物污染;
3)FIREPol热启动多重PCR预混液,节省时间,节省试剂;
4)Ready-to-Load PCR Master Mixes:可以直接电泳上样,琼脂糖电泳后产生黄、蓝两色条带;
5)染料法荧光实时定量PCR:EvaGreen染料-安全无毒又稳定;与SYBR Green相比,对反应的抑制更低;Bright and sensitive SolisGreen® dye 特异性和重现性更佳;

6)HOT FIREPol®EvaGreen® Supermix热启超级预混液;用于高GC含量的扩增;在其他品牌仪器上通用;加样时就能看得见(含dUTP);
7) 快速qPCR要用含SolisFAST DNA聚合酶的预混液;SolisFAST® Probe qPCR Mixes;运行时间由2小时缩短至50分钟;多至5重qPCR;含UNG酶和dUTP;
8)含热启动FIREPol DNA聚合酶的标准扩增速度探针法qPCR预混液;探针法通用试剂;兼容其他仪器;适用于高GC含量;含参比染料;能做多重;
9)逆转录 FIREScript® is Fast and Flexible 能用于复杂样本;有RNA酶H活性;耐受37-60℃;至少能延伸8kb的模板;灵敏检测低至0.01ng样本;
文
参考文献
Pellerin J.l., et al., Theriogenology (2019)
Ogola E. O., et al. Parasites and Vectors (2019)
Bahram, M., et al. Nature (2018).
Otsing, E., et al. Soil Biology and Biochemistry (2018).
Mullett, M.S., et al. Forest Pathology (2018).
Strobel, a., et al. Environmental Toxicology and Chemistry (2018).
lange, M.K., et al. Veterinary Parasitology (2018).

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