动物模型对于研究人类疾病具有重要的意义，如何在中医理论指导下，复制既符合中医证候特点又稳定的可靠动物模型是近年来许多学者研究的方向之一。符合中医临床诊断的症状和体征难以在动物模型上体现，如舌苔、脉象等。因此，筛选一些符合中医证候特色的客观指标也是评价病症结合动物模型的关键点。

临床寒痹肤温扪之局部应当凉或常温，而两组大鼠造模后14d双足踝部肤温均升高，造模21-28d才有不同程度降低，提示大鼠关节肤温可能在造模14-21d之间出现了热-寒证候的转化的自热过程，故而导致关节肤温先热后寒的症状。根据中医理论寒证得温则缓，当寒证大鼠遇到热刺激时不敏感，疼痛阈值应当升高；热痹应当相反。而两组左足在造模后21d热板刺激反应时间缩短，疼痛阈值降低；提示造模后14-21d为关节炎症剧烈期，局部表现为红肿热痛的热证表现，故疼痛阈值降低。在造模后28d疼痛阈值升高，一方面是得温症缓，另一方面大鼠关节僵直畸形，活动受限制也是受热时间延长的原因之一。这与CIA模型为寒湿痹阻证的观点不同。

• 稳定的温度控制

上述已经阐明热板仪的核心关键，若温度控制不准确，造成波动大，继而影响老鼠疼痛反应的潜伏期，造成误差。根据我们研究得出数据，例如温度波动在±2℃时，老鼠疼痛反应潜伏期会出现5.5秒的误差，直接将热板仪疼痛反应的实验结果作废！

型号XR1700 智能热板仪，可将温度波动控制在±0.1摄氏度之间，这是目前科技领域所能达到的极限精准值。温度现实方面精确在0.1秒，所以温度控制与温度现实均以此作为热板仪实验仪器的核心标准。

• 特殊的热板承载面

除却核心的温度控制外，热板仪的承载面板块也会一定程度上影响热板仪的准确性。热板仪需要即为良好的热量传导特性，又因频繁的使用老鼠而需要抗腐蚀、耐酸碱、强硬度的物理条件要求。为此在XR1700上我们进行承载面材料的表面特殊处理，已具备表面光洁度高、热量传导特性强的特点，物理条件方面性能甚至有超出不锈钢的抗腐蚀、耐酸碱、强硬度特性。

• 精准计时技术

在设备硬件达标的基础上，下一步就是要能得到精准的计时方法来统计疼痛潜伏期。一般热板仪以秒为单位进行计时，例如2.01~2.49都会显示为2S，中间误差将近0.5S，批量数据分析后会就会发生质变，严重影响实验结果准确性。目前这款热板仪可将计时单位精确到0.01秒，极限缩小实验误差。此外还增加脚踏控线功能，数据打印/导出功能。

• 动物分组及模型制备

20只雌性Wistar大鼠根据体质量按照随机数字表法分为CIA组和CIA寒证组，每组10只，适应性饲养1周。CIA组造模方法如下：将已溶于乙酸的牛Ⅱ型胶原蛋白 （浓度为2mg/mL）从-20℃冰箱中取出，4℃融化后与等量的不完全弗氏佐剂溶液混合成为1mg/mL的混合物，然后置于冰上以高速分散器搅拌（1 000-3 000r/min），充分乳化，形成滴入水中不散的“油包水”状后，按每只0.1mL于大鼠左后足及尾根部，分多点真皮内注射，压迫注射部位使乳化物完全吸收。7d后以相同方法和相同剂量在大鼠尾根部皮内加强免疫一次。造模时间持续4周。CIA寒证组参考文献并进行改良，在CIA造模基础上应用动物实验箱，从初次免疫开始连续28d给予风寒湿刺激，设定条件为风速6m/s，相对湿度95%，温度6℃。

• 行为学表现及表征评估

实验过程中观察各组大鼠精神状况、皮毛光泽及足趾肿胀程度，测定大鼠体质量。每周评估1次关节炎指数（arthritis index，AI），判断造模是否成功。AI评分标准：0分，无关节红肿；1分，小趾关节肿胀；2分，趾关节及足跖关节肿胀；3分，踝关节以下足爪肿胀；4分，包括踝关节在内的全部足爪肿胀。最高分为16分。并用XR-700C型足趾容积测量仪测定双侧足趾肿胀排水容积，每周1次。

• CIA寒证属性指标测定

关节疼痛阈值：造模第2周开始用智能热板仪，检测两组大鼠对热刺激的反应时间，每周1次。具体方法如下：将智能热板仪温度设定为（52.0±0.2）℃，待温 度稳定后拿掉玻璃罩，一手捉住大鼠，一手将其后足贴于热板上，同时按下计时开关，当感到大鼠明显的抽动躲避动作时，再次按下计时器锁定时间。分别检测双足2次，2次测定时间间隔30min以上，取2次平均值。

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