1、一、常规标本的采集、处理 （一）常规标本的采集 生化检验的标本有血液、尿液、脑脊液 和腹水等，其中以血液标本最为常用。 o 1. 检验申请单 o 申请单是实验检查的第一步。一份完整的申请单应 包括：条码号，门诊号，住院号；病人的姓名，性 别，出生日期；病房，床位号；临床诊断，问题或 特殊检验注意事项；申请检查项目；标本类型；采 样时间，标本接收时间（年.月.日.时.分）；有关 治疗情况（如用药情况）；医生姓名等。其中有关 临床和治疗信息，特别是用药信息是检验师评价结 果的必要条件。药物困难在体外影响分析方法或在 体内引去病理变化，因此，要特别注意在申请单上 提供类信息.。 o 2. 血液标本的

2、采集 o 生化检验用的血液标本可来自于静脉、 动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本， 静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采 血主要用于儿童，血气分析多使用动脉血。 o （1） 采血前准备 o 为了使实验室结果有效地用于临床，实验室 应了解在收集标本前和收集标本时，所有会 影响实验室的非患者内在疾病因素。采取各 种措施，提出对患者采集标本前以及采集时 的要求，称之为患者准备。 o （2） 静脉采血法 o 采血步骤： o 采血前要核对病人姓名、年龄、性别、编号 及检验项目等，按试验项目要求，准备好相 应的容器，如空白试管、抗凝管或促凝管等。 病人应取坐位或卧位，采血部位通常是前臂 肘窝的正中静脉

3、。若用普通采血法，采血后 应取下针头，将血液沿管壁缓慢注入试管内。 o注意事项： oa.很多生化成分受膳食影响，因此，采血前要确认病 人是否空腹。 ob.避免充血和血液浓缩：采血时应动作迅速，尽可能 缩短止血带使用时间。用止血带压迫时间最好不超过 半分钟，否则将使生化结果升高或下降。 oc.若病人正在进行静脉输液，不宜在输液同侧手臂采 血；若女性病人做了乳腺切除术，应在手术对侧手臂 采血。 od.采血的体位：体位改变可引起一系列的生理变化， 使血液中的许多指标发生改变。一般采取直立位采血， 其标本的测定值比卧位高515。因此，采血时 要注意保持正确的体位（坐位或卧位），以及体位的 一致性。 o

4、e.采血时只能向外抽，决不能向静脉内推，以免注入 空气，形成气栓而造成严重后果。 o f.防止溶血：造成溶血的因素有注射器和容器不干燥、 不清洁；穿刺不顺利，组织损伤过多；淤血时间过长； 抽血速度太快；血液注入容器时未取下针头或注入速 度过快产生大量泡沫；震荡过于剧烈等。若用普通注 射器采血后，未取针头直接将血注入真空管内，也易 造成溶血。体内溶血属合格标本，但应在报告单上注 明。 o g.如需全血、血浆，可将血液如上法注入盛有抗凝剂 的试管内，立即轻轻摇动，使血液和抗凝剂混匀，以 防血液凝固。如需作二氧化碳结合力测定时，抽取血 液后，应立即注入有石蜡油的抗凝试管中，注入时针 头应插入石蜡油面

5、以下，以隔绝空气，立即送验。否 则血液中二氧化碳逸出，使检验结果降低，影响准确 性。 o h.采血完毕，连同检验单及时送验，清理用物，归还 原处。一次性注射器使用后应经消毒液浸泡集中处理。 o 常用全血标本采血量与要求（不需空腹） o 常用全血标本采血量与要求（空腹） 常用血清标本采血量与要求 o （3）动脉采血法 o 肱动脉、股动脉、桡动脉以及其它任何部位的动脉都 可以作为采血点，但多选择肱动脉和桡动脉。 o 操作方法 用2 ml注射器，连接7号针头，吸1：500肝 素生理盐水溶液1ml，将活塞来回抽动，使内壁沾匀 肝素，再推掉全部肝素溶液，将活塞推至空筒顶端后 不再回拉，以保持注射器内无空

6、气。选择动脉（桡动 脉采血比较方便），常规消毒病人的皮肤及操作者的 左手食、中指后，以左手绷紧皮肤，右手持注射器， 用左手食指触摸动脉搏动处，以45度角进针，见血液 自动加入空筒内至2ml后拔出针头，嘱病人按压局部5 分钟，应立即用橡皮泥或橡皮塞封闭针头（针头斜面 埋入橡皮中即可），以隔绝空气，在手中搓动注射器， 使血与肝素混合，立即送验。 o 注意事项 o 血标本必须隔绝空气。因为血气分析是 指当天大气压条件下，用隔绝空气的血标本 与一定浓度的气体相结合，而后测定人体内 PH值、氧分压等，作为监测及追踪观察病人 的血气情况。血标本中若进入空气将产生误 差。因此采血的注射器使用前应检查有无漏

7、气，针头必须连接紧密，标本采集后立即封 闭针头斜面。 o 及时送验。标本采集后应立即送验，如 要等待测定，应将标本置于0到4度冰箱内保 存不得超过1小时，以免影响检验结果。 o （4）真空采血法 o 双向针一端插入真空试管内，另一端在持针 器的帮助下刺入静脉，血液在负压作用下自 动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血， 避免了血液外溢引起的污染，并有利于标本 的转运和保存。标准真空采血管采用国际通 用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种 类和试验用途。 o普通血清管 红色头盖，采血管人不含添加剂，用于常规血清 生化，血库和血清学相关检验。 o快速血清管 橘红色头盖，采血管内有促凝剂，可激活纤维

8、蛋 白酶，使可溶性纤维蛋白变为不可溶的纤维蛋白多聚体，进而 形成稳定的纤维蛋白凝块。快速血清管可在5分钟内使采集的 血液凝固，适用于急诊血清系列化试验。 o惰性分离胶促凝管 金黄头盖，采血管内添加有惰性分离胶和 促凝剂。标本离心后，惰性分离胶能够将血液中的液体成分 （血清或血浆）和固体成分（红细胞，白细胞，血小板，纤维 蛋白等）彻底分开并完全积聚在试管中央而形成屏障，标本在 48小时内保持稳定。促凝剂可快速激活凝血机制，加速凝血过 程，适用于急诊血清生化试验。 o 肝素抗凝管 绿色头盖，采血管内添加有肝素。肝 素直接具有抗凝血酶的作用，可延长标本凝血时间。 适用于红细胞脆性试验，血气分析，红细

9、胞压积试 验，血沉及普能生化测定，不适于做血凝试验。过 量的肝素会引起白细胞的聚集，不能用于白细胞计 数。因其可使血片染色后背景呈淡蓝色，故也不适 于白细胞分类。 o 血浆分离管 浅绿色头盖，在惰性分离胶管内加入 肝素锂抗凝剂，可达到快速分离血浆的目的，是电 解质检测的最佳选择，也可用于常规血浆生化测定 和ICU等急诊血浆生化检测。血浆标本可直接上机并 在冷藏状态下保持48小时稳定。 o.EDTA抗凝管 紫色头盖，乙二胺四乙酸（EDTA，分子量 292）及其盐是一种氨基多羧基酸，可以有效地螯合血液标本 中钙离子，螯合钙或将钙反应位点移去将阻滞和终止内源性或 外源性凝过程，从而防止血液标本凝固。

10、适用于一般血液学检 验，不适用于凝血试验及血小板功能检查，亦不适用于钙离子， 钾离子，钠离子，铁离子，碱性磷酸酶，肌酸激酶和亮氨酸氨 基肽酶的测定及PCR试验。 o.枸橼酸钠凝血试验管 浅蓝头盖，枸橼酸钠主要通过与血样 中钙离子螯合而起抗凝作用。适用于凝血实验，国家临订实验 室标准化委员会（national committee for clinical laboratory standards,NCCLS)推荐的抗凝剂浓度是3.2%或 3.8%（相当于0.109mol/L或0.129mol/L),抗凝剂与血液的 比例为1：9。 o .枸橼酸钠血沉试验管 黑色头盖，血沉试验 要求的枸橼酸钠浓度是

11、3.2%(相当于 0.109mol/L)抗凝剂与血液的比例为1：4 o .草酸钾/氟化钠 灰色头盖，氟化钠是一种 弱效抗凝剂，一般常同草酸钾或乙碘酸钠合 并使用，其比例为氟化钠1份，草酸钾3份。 此混合物4mg可使1ml血液在23天内不凝固 和抑制糖分解，它是血糖测定的估良保存剂， 不能用于尿素酶法测定尿素，也不有用于碱 性磷酸酶和淀粉酶的测定，推荐用于血糖检 测。 o 3.尿液标本的采集 o 尿液标本的采集 （1） 采集方法 尿液标本有随机新鲜尿、定时尿及 24 小时尿， 根据检查项目选择标本的采集类型。定量生化分析 多收集 24 小时尿液， 24 小时尿标本采集方法如 下： 嘱病人在早晨

12、8 时排尿弃去，以后每次排尿均 收集于一大容器内，至次日早晨 8 时最后一次尿亦 收集于容器内。测量并记录 24 小时尿液总量，然 后混匀尿液，取适量尿液送检。 o （2） 注意事项 收集尿液标本的容器必须清洁干燥， 最 好是一次性使用的容器。若容器反复使用， 则须用洗涤液和自来水清洗， 再用蒸馏水冲 洗。尿标本要防止混入月经血、阴道分泌物、 精液、前列腺液、粪便等异物。尿标本收集 后应 12 时内送检，以免细菌作用和化学成分 分解。若不能及时检验（如收集 24 小时尿 液），将标本置冰箱保存，若加入防腐剂， 保存效果更佳。 o 4.其他特殊标本的采集 需专科医生操作 二、标本的处理 o 标本

13、处理不当将可能引起比分析更大的误差。 因此，应根据分析目的选择合适的抗凝剂、 防腐剂和处理方法 o 1、抗凝剂 o 应用物理或化学方法除去或抑制血液中的某 些凝血因子，阻止血液凝固，称为抗凝。阻 止血液凝固的化学试剂称为抗凝剂 （anticoagulant）。对抗凝剂的一般要求 是用量少、溶解度大、不影响测定。生化检 验常用的抗凝剂有以下几种： o （1）肝素 o 是一种含有硫酸基团的粘多糖，其抗凝机理 主要是对抗凝血活酶和凝血酶的形成和 活 性，阻止血小板聚集。肝素 抗凝血常 用于 血气分析 和部分生化项目的测定，使用 1.0gL 的肝素溶液0.5ml 可抗凝5ml 血 液。 o （2）草酸

14、钾氟化钠 o 草酸钾可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从 而阻止血液凝固。草酸钾溶解度大，抗凝作 用强。氟离子能结合钙而抗凝，但抗凝效果 较弱。氟离子可抑制糖酵解中的烯醇化酶， 防止糖酵解，若未加氟化钠，血标本中葡萄 糖含量将以每小时6 的速度下降。而在氟 化钠的存在下，血糖浓度在25 可稳定24 小时，4 可稳定48 小时。因此，草酸钾 氟化钠是血糖测定标本常使用的抗凝剂。 o 2.防腐剂 o 尿液检验最好留取新鲜标本及时检查，否则 尿液生长细菌，使尿液中的化学成分发 生变 化。在留取24 小时或12 小时尿液时，尿液 标本应置冰箱保存或加入防腐剂（anti septic），常用的防腐剂有： o

15、 （1）浓盐酸 o 盐酸使尿液保持酸性，阻止细菌繁殖， 同时防止一些化学物质因尿液碱化而分解， 通常用量为05 10ml 浓盐酸100 ml 尿液，适用于24 小时尿儿茶酚胺、秀草 扁桃酸（V M A）、17 羟皮质类固醇和 17 酮类固醇等定量测定。 o （2）甲苯 o 甲苯可在尿液表面形成薄膜，防止细菌繁殖，用量 10 20ml 甲苯100ml 尿液， 适用于尿肌 酐、尿糖、蛋白质、丙酮等生化项目的测定。 o （3）冰醋酸 o 用量5 10ml 冰醋酸24 小时尿液，适用于 24 小时尿醛固酮测定。 o （4）麝香草酚 o 可抑制细菌生长，用量为0lg 麝香草酚 100ml 尿液。用10

16、的麝香草酚异丙醇溶液可增 加麝香草酚的溶解量，达到抑菌及保护代谢物的作 用，适用于尿钾、钠、钙、氨 基酸、糖、尿胆原、 胆红素等测定。 o 3.标本的分离储存和转运 o 血液标本采集后应及时分离血清或血浆，否则可发 生红细胞与血清之间成分的相互转移，或细胞中的 某些酶分解待测物等，而影响检验结果。 o 例如，血清无机磷可由于红细胞内有机磷酸酯被磷 酸酯酶的水解而增加；血清中葡萄糖可因红细胞内 糖酵解酶的分解作用而降低 o 此外，钠存在于红细胞与血清中之比为1:2；钾在血 清和红细胞中之比为1:20；钙在红细胞中极少，几 乎全部在血清中。因此，血清钠、钾、钙测定时， 需注意及时分离标本，若不能立

17、刻分离血清或血浆， 应将标本放置于室温或37水浴箱内，不能将血液 标本直接放入4冰箱，以免发生溶血。 o 对不是因操作不当引起的溶血、脂血或胆红 素血，应在检验报告上注明，供医生参考。 o 尿液、脑脊液和胸腹水等标本常需离心，取 上清液进行分析 o 分离后的标本若不能及时检测或需保留以备 复查时，一般应放于4冰箱，某些检测项 目的标本存放于-20冰箱更稳定。标本存 放时需加塞，以免水分挥发而使标本浓缩。 需注意的是，某些检测指标如乳酸脱氢酶的 标本应存放于室温，置4反而不稳定。 o 标本采集后应尽快送实验室分析，标本管道 传递系统可加快标本传递速度和避免标本的 错误传递。若标本不能及时转运到实

18、验室或 欲将标本送到上级部门或检测中心进行分析 时，应将标本装入试管密封，再装入乙烯塑 料袋，置冰瓶或冷藏箱内运输，运送过程中 应避免剧烈震荡。 o 要视所有标本为传染品，对“高危”标本， 如乙肝病人标本、艾滋病病人标本等，要注 明标识；急症或危重病人标本要特别注明。 严禁标本直接用口吸取、接触皮肤或污染器 皿的外部和实验台。标本用后均要做消毒处 理，盛标本的器皿要消毒处理或毁型、焚烧。 二、比色分析的要点及注意事项 o 生化检验的定量分析主要是基于分光光度 技术的比色分析，包括：紫外、可见及浊度 分析 o 1. 分光光度计测量误差：由朗伯-比尔定律 可知，只有在一定的浓度范围内，即一定的 吸

19、光度范围同内，由分光光度计测量所引起 的测定结果的相对误差才是较小的；当透光 率接近0或1.0时，其相对误差趋于无限大； 一般在百分透光率在1080%的范围内(即 吸光度在10.1)，浓度测量相对误差较小； 对于精密度高的仪器。当吸度 A=0.7-0.2 时，百分透光率约为20-60%，测量误差约 为1%。 o 减少分光光度计的测量误差的条件有 选择适宜波长的入射光：由于有色物质对光有选 择性吸收，为了使测定结果有较高的灵敏度，必须 选择溶液最大吸收波长的入射光。 o 控制吸光度A的准确的读数范围：由朗伯-比耳定律 可知，吸光度只有控制在0.20.7读数范围内时， 测量的准确度较高。 o 选择

20、参比溶液：参比溶液是用来调节仪器工作零点 的。若样品溶液，试剂，显色剂无无色可用蒸馏水 作参比溶液；反之应采用不加显色剂的样品液作参 比溶液 o 2. 显色反应及其影响因素 o 显色反应一般要求 (1)选择性好:显色剂最好只与一种被测组分 起显色反应; (2)灵敏度高:灵敏度高有助微量组分的测定; (3)有色化合物性质稳定:确保前后测定准确. (4)显色剂与有色物颜色反差大:两者最大吸 收波长之差应大于60nm; (5)显色反应要易于控制:结果的确保实验再 现性. o 影响显色反应的主要因素 (1)显色剂用量:通过实验来确定最适用量; (2)反应液的酸碱度(pH)溶液酸碱度直接影响 金属离子与

21、显色剂存在形式以及有色化合物 组成的稳定性. (3)反应温度:不同的显色反应需要不同的反 应温度,一般显色反应可在室温下完成. (4)显色反应时间:显色反应的速度有快有慢. (5)干扰离子的影响:应采用适当方法消除其 影响 3. 722型分光光度计使用操作和注意事 项 o 注意事项： o . 每台仪器所配套的比色皿不能与其它仪器上的 比色皿单个调换。 o . 如果大幅度改变测试波长时，需等数分钟后才 能正常工作。（因波长由长波向短波或短波向长波 移动时，光能量变化急剧，光电管受光后响应较慢， 需一段光响应平衡时间。 o . 如果显示数值有异常很可能为钨灯已坏，请尽 早更换。 o 4. 用于免疫

22、测定，基本原理是：抗原抗体在 特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物，使 反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过量 时，形成的复合物随抗原量增加而增加，反 应液的浊度亦随之增加，与一系列的标准品 对照，即可计算出受检物的含量。 o 免疫浊度测定法按照仪器设计的不同可以分为两种， 即比浊仪测定（turbidimetermeasure）和散射 比浊仪测定（nephelomitermeasure）。比浊仪 测定是测量由于反射、吸收或散射引起的入射光衰 减，其读数以吸光度A表示。A什反映了入射光与 透射光的比率（A2log10T，T代表浊度百分 比）。散射比浊仪测定是测量入射光遇到质点（复 合物）后呈一定角

23、度散射的光量，该散射光经放大 后以散射值表示。 o 测定方法有终点法和速率法两种。 o 终点法是在抗原-抗体反应达到平衡时，即复合物形 成后作用一定时间，通常是30-60min，复合物浊度 不再受时间的影响，但又必须在聚合产生絮状沉淀 之前进行浊度测定。 o 速率法是在抗原抗体结合反应的过程中，在单位时 间内两者结合的速度。速率法是测最大反应的速度， 即反应达到顶峰时的峰值。抗原抗体结合反应在几 十秒内得出结果，峰值的高低与抗原的量成正比， 峰值出现的时间和抗体浓度、抗原抗体的亲和力直 接相关。速率法的灵敏度和特异性都比终点法好。 o 免疫透射浊度法，其反应曲线不规则，试验 前进行五点定标五点

24、定标，按曲线回归计算。 全自动生化分析仪 一、良好工作环境文章 1)环境温度：1832，工作中波动小于42、 热量11000KJU、湿度：4080RH，并无冷 凝；若室温不稳定，应安装空调，安装在通风好， 分析仪不应暴露在流动空气中。 2)避免阳光直射、远离高频电磁波等。 3)给水及排水：分析仪使用去离子水，去离子水器安 装在距水龙头10M内，去离子水电阻率大于0.5Mn， 用0.5ram的过滤网过滤细菌，去离子水及排水孔 安装在仪器10M内，废液管连到医院的传染病处理 装置处。 o 4)接有效的稳压、不间断电源(UPS)，以防 停电造成分析仪损坏或数据丢失，有保护性 接地线，以防电击和分析仪

25、故障发生。 o 5)实验室整洁，空间足够，室内无化学腐蚀 性试剂，无烟雾和水蒸气 o 二、技术性能评价 o 1)基本性能：测试速度32005000测试 小时，ISE900测试小时；反应温度37， 可选择波长13种，340800nm。 o 2)样品系统：试剂位192个，样品位300个， 全反应过程监测，前后自动稀释，最小样本 量1.6ul最小试剂量120ul。 o 3)分析系统：反应杯为特殊硬质玻璃，反应 时间8分20秒，反应总量150550ul，自 动记录质控，自动冲洗，耗水量平均125升 小时。 生化试剂选择和特点 o 1)试剂有国家标准的生产、销售经营许可证，使用 方法符合中华医学会检验分

26、会或美国FDA推荐方法， 试剂配方是中华医学检验学会或国际上推荐的配方。 o 2)系统使用四种规格的试剂瓶： o 120ml试剂瓶、60ml试剂瓶、30ml试剂瓶、 15ml试剂瓶，当使用15ml或30ml试剂瓶时，必 须使用相应的挡板固定试剂瓶；当使用120ml试剂 瓶时，取出试剂瓶之间的挡板，在试剂冰箱内设置 120ml试剂瓶时要求两个60ml试剂瓶的宽度。 参数设置 o1)Samle volume and Dilution(样品量和冲洗量)，样品分配量 范围1.625ul或稀释量1.620ul，冲洗分配量0或10ul： oReagent R1 vol and Dilution(第1试剂量

27、和稀释量)试剂范围 15250ul或稀释水量0或235ul； oReagentR2 v0l and Dilution (第2试剂量和稀释量)试剂范围 15250ul或稀释水量0或235ul。若R2为0，此项不能设置。 o一般按商品试剂说明书上的推荐量，结合分析仪中规定的样品和 试剂的最小加样量、加样范围和最小反应总体积按比例进行缩减。 足够精密度的情况下尽可能减少样品的用量以减少样品中的 成分对测定的影响。 o一般情况下，样品体积占反应总体积的10。 o 2)WavelengthPri(主波长)Sec(副波长)。 实际应用中选择辅助波长主要用于消除脂血、 溶血、黄疸的干扰。通常选最大吸收峰为主

28、 波长，双波长的设定最好向该试剂厂家索 取最为安全，因为不同的双波长测定抗干扰 不同。 o 3)Method(方法学)可设置END终点法、 RATE速率法、FIXED两点法、END1、 RATE1、FIXED1，前三种是以试剂为空白， 后三种是以比色杯为空白的； o END终点分析法检测的是反应达到平衡时的 吸光度值：RATE速率法适用于呈零极反应 的酶催化活性浓度的测定，其基本原理是： 基于恒定期(零级反应期)酶促反应速率和酶 催化活性浓度呈正比； o FIXED固定时间法：是动态反应期的吸光度 变化累加各读点问隔吸光度差值，取吸光度 差值的累加值计算结果。 o 4)Reaction(反应方

29、向)：+、-，END与 FIXED法不起作用，但RATE法一定要输入 正确。 o5)Pointl Fst Lst(测量l，输入光电检测起始点和结束点)和 Point2FstLst(测量2，输入光电检测起始点和结束点)，Pointl为 主测定，Point2为辅助测定 o终点分析法：测定时间的选择应允分考虑到干扰的问题，读点提 前、反应达不到平衡、读点缓后、非检测物质反应、干扰物质生 成、影响测定值，如：溴甲酚绿法检测白蛋白，BCG试剂在 PH4.2时，不但能与白蛋白起反应，而且还与血清中多种球蛋白 起反应，但白蛋白与BCG的反应是在60秒以内完成的，而其他球 蛋白与之反应要在30分钟后才能完成，

30、因此，为使测定结果趋于 准确，读数不应超过10分钟测定 oRATE法对于一种物质的测定，由于选择试剂和分析方法不同，其 测定时间也随之变化，因而对于特定的试剂和分析方法，应先做 出反应进程曲线，从曲线上选择最佳的测定时间。 o 6)Linearity(线性范围)不同试剂公司的试剂 质量不同，基测定的线性范围也不同。对于 酶活性来说，可取一高值样品作倍比稀释， 按分析项目的波长、样品量与试剂量、孵育 时间测定各管活性浓度，以活性浓度对稀释 度作图，在测定线性内的最高浓度为测定线 性上限，最低浓度为测定线性下限。对于带 标准的其他生化项目的测定，可配置系列浓 度的标准液，测定各浓度的吸光度变化绘制

31、 标准曲线，同样可以求得测定线性。 做好室内质控： o 在每天的操作中，质控样品的测定数据被贮 存下来，进行质控数据的变异检查。 o 1)进行质控分析申请操作 o 2)在系统内放置设有质控样品的绿色样品架。 o 3)进行了质控分析申请后开始分析，分析 操作开始。 o 4)分析绿色样品架后，检查质控数据有无错 误。 常规性维护： o 1、每日维护 o 1)检查样本和试剂分配器是否有渗漏； o 2)目视检查洗剂原液Detergent B桶内液面 是否足够； o 3)检查清洗样本针、试剂针和搅拌棒； o 4)检查ISE试剂分配器是否渗漏，自动冲样 品池和电极通路； o2、每周维护 o1)手工清洗样本

32、针、试剂针和搅拌棒； o2)进行W2(自动冲洗比色杯、搅拌棒、试剂探针与废液管路)， 每周交替使用酸性或碱性洗液作W2(酸性洗液浓度为lmmol L的盐酸，碱性洗液有效浓度为5的次氯酸钠； o3)进行Photoca1(光电校正)，平均值：MenCheck Range： 0.030，吸光度差值：AbsCheck range：0.1，常见杯错 误有：擦伤检查错误(绿色)；数据分散检查错误(红色)：数据 比较检查错误(兰色) o4)清洗样品预稀释瓶； o5)检查ISE电极选择性。 o 3、每月维护 o 1)清洗样本探针、试剂探针和搅拌棒冲洗池； o 2)清洗空气过滤网； o 3)清洗去离子水和样品针

33、过滤片； o 4)每两个月ISE电极维护，如果电极已经失 效，不会得到恰当的分析结果； o 每两个月或每20000个测试量要更换一次最 先坏的电极。 o 4、每三个月维护 o 1)清洗冲洗管嘴； o 2)清洗离子水桶；。 o 3)更换水机棉芯、活性碳； o 4)ISE每三个月维护更换混合物和废液滚动 泵管； o 5、每六个月维护 o 1)更换光源灯泡；光电数据任意波长100 的吸光度超过1.7354或低于0.01时应更换 光源灯泡：出现“lampdark”或者项目出现 大量“报警标志“，反应曲线呈波浪样改变 并排除冲洗头堵塞时应更换光源灯泡，更换 光源灯泡后，一定要进行光电校正 (Photoe

34、a1)。 o 2)清洗比色杯与比色杯轮盘；清洗比色杯与 比色杯轮盘后，一定要进行光电校正 o 6、非经常性维护 o 1)检查比色杯、样品针与试剂针、搅拌棒、 冲洗头管、样品和试剂分配器、清洗液蠕动 泵、离子水过滤器、样品针过滤器，如果有 出现故障及时更换。 o 2)ISE非常规性维护，必要时应更换参比电 极；添加参比液；更换相应试剂。 常见的报警信息及处理方法分析 o 1.分析仪故障原因：异常关机，启动UPS储 备电源，电力检测失败。 o 分析仪故障处理：开主机电源EM STOP(黄色键)，再按复位开关RESET(色 键)，再分电电源POWER-ON(绿色键)，直 到光电校正灯稳定才能开始分析

35、，大约20分 钟。 o 2.分析仪故障原因：试剂冰箱盖未完全关闭 或试剂盘未被固定钉子定位。 o 分析仪故障处理：水平放置试剂盘对准固 定销，按下固定钉，关闭盖子，重新检测试 剂 o 3.分析仪故障原因：试剂被放错位置。 分析仪故障处理：设置合适的试剂瓶。 o 4.分析仪故障原因：试剂少了试剂空了。 分析仪故障处理：认真检查，补足试剂用 量。 o 5.分析仪故障原因：去离子水少了去离子水空了， 纯水输出管道堵塞或者纯水机故障。 分析仪故障处理：检查纯水机或输出管道工作状 态是否正常，必要时找医院维修组。 o 6.分析仪故障原因：样品探针被堵塞样品 包含有较多的纤维和蛋白。 分析仪故障处理：弃去

36、纤维或做必要的处 理和过滤，检查是否有其他物质混入，用钢 丝插入样品探针除去阻塞。 微量加样器的使用、维护和校准微量加样器的使用、维护和校准 o1 基本原理、分类及适用范围 o1.1空气垫加样器 o活塞冲程（空气垫）加样器中的空气垫的作用是将吸于塑料吸头 内的液体样本与活塞分隔开，空气垫通过加样器活塞的弹簧样运 动而移动，进而带动吸头中的样本移动。加样体积一般在1 l至 10ml之间。适合于血清、血浆等普通样本的加样，在临床上最常 使用。 o1.2活塞正移动加样器 o活塞正移动加样器的吸头与空气垫加样器吸头有所不同，其内含 一个可与加样器耦合的活塞，这种吸头一般由生产厂家配套生产， 不能使用普

37、通的吸头或不同厂家的吸头。适用于具有高挥发性、 高粘稠度以及密度大于2.0g/cm3的液体或聚合酶链反应 (PCR)。 2 影响微量加样器准确的几种常见因素及 对策 o2.1影响微量加样器的物理因素 o2.1.1流体静压 加样时，加样器吸头只能以垂直方式浸入2- 3mm，因为倾斜的方式将减少液体柱的高度，导致吸取液体 过多。 o2.1.2吸头润湿 当吸头排空时，仍会有一些残留的液体以 薄膜的形式吸附在吸头里面，所以，在加样时先吸打液体数 次，充分润湿吸头管腔,以保证加样的一致性。 o2.1.3 流体动力学 为确保样本的稳定释放，加样器吸头应靠在 试管壁上，液体顺着管壁流出，避免出现液滴，液滴的

38、形成可 由于其表面张力的作用而阻止样本的释放。 o 2.2 加样器本身的质量因素 o 微量加样器的失准率与加样器的使用次数成正相关关 系；同标值的可调加样器的失准率比同标值的定值加 样器失准率大。标值容量小的失准率较容量大的失准 率大。所以，有必要根据工作实际选用合适的加样器， 并需要定期校准。 o 2.3吸头的质量因素 o 加样器吸头是整个移液系统的有机组成部分，对其基 本要求是：必须有高机械、热力学和化学稳定性好； 纯度高；密封良好的环口、薄壁和嘴口尖细；管壁有 弹性；嘴口无毛刺，表面光洁平滑；应与加样器上吸 头套筒密封完好。 3 微量加样器的正确使用方法 o 3.1选择一支量程合适的加样

39、器 加样器只能在特定 量程范围内准确移取液体,如超出最低或最大量程, 会损坏加样器并导致计量不准。 o 3.2 设定容量值 有些加样器通过旋转按钮设置容 量，有些则通过刻度显示。 o 3.3选择合适的吸头装在加样器套筒上，稍加扭转 压紧，使吸头套紧。否则，移取的液体将少于设定 的体积，或者液体会往下滴。 o 3.4 预洗吸头 当装上一个新吸头时（或改变吸取的容 量值）应预洗吸头，先轻轻吸打几次液样,可消除产生 吸液误差。 o 3.5吸液 手握移液器，大拇指按下按钮至第一停点， 将加样器垂直浸入液面2-3mm，然后缓慢平稳地松开 拇指，慢慢吸入液体。停留1s，然后将吸头提离液面。 用吸纸抹去吸嘴

40、外面可能黏附的液滴。小心勿触及吸 头口。 o 3.6目测吸入的液体体积是否合理。 o 3.7放液 将吸头口贴到容器内壁并保持10-40倾 斜，平稳地把按钮压到第一停点，停1-2s后，继续按 压到第二停点，排出残余液体。松开按钮，同时提起 加样器。 o 3.8按吸头弹射器除去吸头（改用不同样本液体时必须 更换吸头）。 o 4 加样器的维护 o 4.1套筒螺帽松动 用手拧紧螺帽。 o 4.2活塞或密封圈受化学腐蚀 更换活塞和密 封圈。用蒸馏水洗涤套筒内壁。 o 4.3发现套筒内有液体，可依下法清洁：卸下 弹射器，拧下螺帽并用蒸馏水洗涤套筒、活 塞、密封圈及O型环，干燥后重新组装。 4.4发现吸液时

41、有气泡 将液体排回原容器； 检查吸头浸入液体是否太深；换个吸头重新 吸取样本。 o 5 微量加样器的校准 o 常用的方法有高铁氰化钾法、双蒸水称重法、水银 称重法等，但此三种方法都存在缺陷。在实践中， 我们一般常用光电比色法进行校准。具体方法是： 取三只试管分别加入蒸馏水5.0ml，用校正过的血 红蛋白吸管吸取1.2g/L曙红B20l混匀，作为标准 管，在721分光光度计上，波长508nm,蒸馏水调 零,平行3管测定,取吸光度均值作为标准管A标,测 定管A测除用待校正的微量加样器代替血红蛋白吸 管外,其他操作同前。 o 计算：实际容量（计算：实际容量（l）=A测测/A标标20 o 相对误差（相对误差（%）=（实际容量（实际容量-刻度容量）刻度容量） /刻度容量刻度容量100% o 相对误差相对误差3%则应调整弹簧，进行校准后则应调整弹簧，进行校准后 才能使用。才能使用。 一、常规标本的采集、处理 （一）常规标本的采集 生化检验的标本有血液、尿液、脑脊液 和腹水等，其中以血液标本最为常用。 o 1. 检验申请单 o 申请单是实验检查的第一步。一份完整的申请单应 包括：条码号，门诊号，住院号；病人的姓名，性 别，出生日期；病房，床位