标本转运箱怎么消毒三次送检痰培养都是阴性,竟然是这个步骤做错了!

新闻资讯2026-04-21 15:57:26
感染性疾病的正确诊治需要以正确的病原学检测结果作为指导,送检标本的质量是影响检验质量的重要因素之一,标本采集不规范易干扰结果判读,对疾病的诊治产生误导。呼吸系统感染是临床常见的感染性疾病,对于各类呼吸道微生物标本,如何规范留取和转运呢?

呼吸道以气管隆嵴为界分为上呼吸道和下呼吸道:
上呼吸道标本
上呼吸道标本主要包括口咽拭子、鼻咽拭子(nasopharyngeal swab,NPS)、鼻咽吸取物(nasopharyngeal aspirates,NPA);上呼吸道感染通常不需要根据病原学检测结果进行治疗,大部分采取经验性治疗,并且留取的标本极易被口腔正常定植菌和环境微生物污染,细菌培养结果可靠性差(表 1)。但是在上呼吸道感染高发季节,留取咽拭子行病毒学筛查对呼吸道传染病的防控帮助较大 [1]。由于鼻窦和中耳标本需由耳鼻喉科专科医生留取,故本文不作讨论。
表 1. 特定解剖部位中适合/不适合普通细菌培养的标本类型 [2]
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咽拭子:

因为木质棉拭子可能含有对病毒或者细胞有毒的物质,故咽拭子检测病毒推荐采用聚酯纤维/藻酸钙塑料杆拭子,生理盐水湿润后采集 [3]

对于病毒检测标本,取样后迅速弃去拭子尾部,将拭子头部放入病毒运输液(运送培养基)中轻轻摇动,旋紧采样管螺旋口。因病毒活性会随着时间延长而降低,标本采集后应尽快送检。标本室温下 30 min 内行分子生物学或者病毒培养鉴定,如不能及时送检则需低温保存(2~8 ℃ 不超过 48 h)[1]。咽拭子行支原体、衣原体检测时也需遵循相同原则。

对于细菌分子生物学/培养标本,采样后将拭子插回采样装置或适当的转运装置,室温保存,尽快送检。
【口咽拭子】
使用压舌板轻压舌部,用拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,反复擦拭 3~5 次,尽可能从化脓部位取样,退出时避免拭子接触舌头、悬垂体、口腔粘膜和唾液。为防止呕吐,咽拭子采集尽量避免在餐后 2 h 内进行 [1]
【鼻咽拭子】
多数呼吸道病毒的主要感染复制部位为后鼻咽部纤毛柱状上皮细胞,其次为前鼻孔和口咽部纤毛上皮细胞,因此鼻咽拭子的病原检出率较口咽拭子高。在操作前应向患者做好解释工作。

采集鼻咽拭子时,应先清除鼻腔前端的分泌物,将拭子由鼻腔插入,沿鼻腔壁伸入鼻咽部直至感到一定阻力时,转动 2~3 次,保留 5~10 秒 [4] 后将拭子取出。采集时拭子应朝向耳方向而不是头顶方向 [3]
【鼻咽吸取物/鼻咽灌洗液】

鼻咽吸取物较咽拭子有更高的阳性检出率,可用于病毒核酸和病毒抗原检测。
将无菌吸痰管与无菌收集器相连,再将吸痰管送入患者鼻咽部至产生抵抗,稍回抽,利用负压吸取鼻咽部分泌物 1~2 mL 至无菌收集器中,压力调节以能吸出分泌物为宜。导管中的残余液体可加入病毒运输液或无菌生理盐水冲洗至收集器 [3]
部分患者可采集鼻咽灌洗液 [3],嘱患者取头颈过伸位,勿做吞咽动作,利用连有注射器的导管,向两测鼻腔各注入 2~5 mL 生理盐水 [5] 灌洗,将灌洗液通过导管上的注射器转移至含有病毒运输液或生理盐水的无菌收集器。
下呼吸道标本
下呼吸道标本是传统微生物学检验的重要标本类型,包括痰、气管插管吸出物、经气管切开处气管吸出物、环甲膜穿刺气管内吸出物、经纤维支气管镜吸出物、支气管肺泡灌洗液、胸腔积液、经皮针吸肺活检等,不同方式取出的标本其口咽菌群污染的概率不同,其结果对临床指导的意义也不同。原则上应该按照先易后难、先无创后有创的原则选择留取的标本类型。
【痰】

咳痰标本需要患者配合,且咳痰不可避免受到口咽部细菌的污染,抗生素使用对于痰标本病原微生物结果的影响较大。因此,应尽量在抗生素使用前采集痰标本。
为避免假阴性结果,对痰量的要求如下 [5]

送检频率:
咳痰时的注意事项:
诱导痰(咳痰困难时):
表 2. 标本质量评估——痰/气管吸引物涂片 [6]
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【气管吸取物】

有气管插管或气管切开等人工气道的患者无法自行咳痰,可通过吸痰管从气道吸取标本。调高氧流量后,将吸痰管连接呼吸道标本收集器,通过人工气道将一次性无菌吸痰管推进呼吸道直至遇到阻力,将吸痰管回抽 1~2 cm 开始吸引,留取标本在无菌收集器内及时送检 [3]。标本质量评估和拒收标准可参照痰标本 [4]
【经支气管镜采集的标本】

患者咽喉局部麻醉后,导入纤维支气管镜。通过纤维支气管镜对病灶所在支气管以下肺段或亚肺段水平,可采集支气管肺泡灌洗液、支气管毛刷、支气管吸引物和经支气管镜肺活检的组织标本。
支气管肺泡灌洗液(BALF)[7]

注:
支气管毛刷

支气管吸引物

经支气管镜肺活检的组织标本
【经皮穿刺肺活检组织】

【胸水】


各类标本多久应送至实验室?转运容器如何选择?一表总结!

表 3. 呼吸道微生物学检验标本的转运和储存要求 [2,8]
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如何排除污染和定植?

对于侵入性方式采集的标本多采用定量培养,由于受到定植菌污染的程度不同,不同来源的呼吸道微生物标本致病菌判定的标准不一,具体如下:
表 4. 不同呼吸道标本定量培养诊断为致病菌的阈值 [1,8]
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参考文献:

1. 韩志海. 呼吸道感染患者微生物标本留取及判读 [J]. 中国临床医生杂志,2018,46(12):1394-1397.

2. 临床微生物学检验样本的采集和转运:WS/T 640-2018[S]. 2018.

3. 中华医学会儿科学分会呼吸学组呼吸道感染协作组,《中国实用儿科杂志》编辑委员会. 儿童呼吸道感染微生物检验标本采集转运与检测建议 (病毒篇)[J]. 中国实用儿科杂志,2018,33(9):657-662.

4. Johns Hopkins Medical Microbiology Specimen Collection Guidelines – Updated 6/2024.

5. Pathology Lab. PL-Microbiology Specimen Collection Guidelines (2020.07.22).

6. 中华预防医学会医院感染控制分会. 临床微生物标本采集和送检指南 [J]. 中华医院感染学杂志,2018,28(20):3192-3200.

7. 周道银, 吴茅, 许绍强, 等. 支气管肺泡灌洗液细胞形态学检验中国专家共识 (2020)[J]. 现代检验医学杂志,2020,35(6):4-8. 

8. Miller JM, Binnicker MJ, Campbell S, et al. Guide to Utilization of the Microbiology Laboratory for Diagnosis of Infectious Diseases: 2024 Update by the Infectious Diseases Society of America (IDSA) and the American Society for Microbiology (ASM). Clin Infect Dis. 2024:ciae104.