很多人以为

核酸检测就像血常规一样

取标本

放仪器上检测

很快出结果

真正的核酸检测

没你想的那么简单！

Step 1 标本采集

这一步大家都懂，「捅嗓子眼儿」、「捅鼻子眼儿」。

采集后将拭子头浸入病毒保存液中保存，全城大筛查中通常是 10 个拭子一组进行保存。

Step 2 集合转运

在全城大筛查中，核酸采样地点通常是社区、学校等临时采样点，而检测点是有严格的生物安全和质量要求的实验室。因此，鼻、咽拭子在采样点集合后，被「全副武装」送往实验室。

Step 3 核收消毒

在严密保护下，标本被「护送」到检测实验室，由接收人员登记、核对。

全方位消毒，准备进入检测环节。

Step 4 全面防护

进入样本处理区域前，检测人员需做到 100% 的安全防护。

Step 5 信息录入

完成全面防护的工作人员进入样本处理区，将样本在生物安全柜内打开，取出样本消毒并录入信息系统。目前信息录入有两种，一种是条码录入，需要「滴」一声解决；另一种是手工填写的单子，需要挨个摘录到系统中。

Step 6 试剂配制

根据待检样本数量配置好核酸检测必备的试剂和辅助材料，精准配制和分装反应体系。为了提高效率，这一步和接下来的两步通常由不同的检测人员同时进行。

Step 7 核酸提取

① 裂解

在进行核酸检测前，必须先用胍盐把花花绿绿的蛋白质「马甲」给脱了，才能将病毒的核酸释放出来，露出病毒的「真面目」。

② 结合

加入磁珠与核酸结合。与各种细胞碎片、蛋白质说「拜拜」啦！

「我们的目标是？」「抓住核酸！」

③ 洗涤

结合一次就能抓到核酸了？哪有那么轻松哦！抓是抓到了，不过还是有少量的碎片、蛋白跟着核酸一起被黏上了。如何提高核酸的纯度？我们有两大法宝：加盐，加酸。

「吸附核酸-高盐低 pH」、「洗脱核酸-低盐高 pH」，反复两三次的吸附、洗脱，实现核酸的提取纯化。剩下的就是「赤裸裸」的核酸啦。

Step 8 核酸扩增

新冠病毒核酸检测常规筛查采用的是实时荧光 PCR 方法。PCR 技术于 1983 年由美国著名化学家凯利·穆利斯（Kary Banks Mullis）发明，并获得 1993 年诺贝尔化学奖。PCR 技术是通过模拟生物体体内 DNA 复制的方式，在体外选择性地将 DNA 某个特殊区域扩增出来的技术。

PCR 反应就像一个大型装配车间。想要扩增某个病毒片段，首先根据它的特点设计一对引物。引物就是最有力的识别并定位的「抓手」，具有「指哪打哪」的精确性。在一群病毒核酸中，想抓新冠还是流感，抑或是鼻病毒、呼吸道合胞病毒等，只有你想不到，没有他抓不到。

当他识别到新冠病毒的「特点」——特异性的片段，马上一前一后「抓捕」，再添加 dNTP、Mg2+、Taq 酶等原材料，调节不同的温度，历经「变性-退火-延伸」三大步，完成病毒核酸组装。每扩增一次，DNA 产量呈指数增长。新冠病毒扩增一般需要 40 个循环，理论上 1 个拷贝可以得到240=1,099,511,627,776 个拷贝。即使样本中病毒含量很低，都可以通过 PCR扩增检测出来。因此 PCR 反应有高特异性和高灵敏度的特点。

240 个核酸片段拷贝，数量是很多，但无色无味又看不见，「敌在暗处」怎么办？那我们就让他在「明处」！实时荧光 PCR 反应就是在 PCR 反应基础上加入探针，每扩增出目标片段即会发出荧光，被荧光探测器捕获。

随着扩增次数的增加，荧光量累积，就是我们看到的曲线图了，我们就是通过它来判断有没有新冠病毒的。

「咦，医生，为啥阳性曲线图和阴性曲线图里面都有个阳性的曲线喃？是不是阴性被污染了哦？」

「莫慌，那个是人类管家基因，就是人类所有细胞都稳定表达的基因。」

「我是查新冠病毒，这个什么「管家」是来干啥呢？」

「这个是用来监测采样、运输以及检测过程的！」

「是不是管家基因阳性就代表采样部位没问题呢？」

「这可不一定，管家基因嘛，只能代表采到人体组织了，至于是否采到病毒潜伏部位，这可不一定。」

检测过程中不能停下来添加新标本，必须等待这一批扩增完成，才能进行下一批的扩增，这也是标本不能随到随检的原因之一。一个大型的实验室内，核酸扩增设备多达上百台，同时不间断工作的检测人员有数百人。

Step 9 检后处理

为防止可能出现的污染，相关样本在检测结束后密封放入指定专用医疗垃圾桶中，并进行高压灭菌处理。

Step 10 结果出炉

到这一步，检测人员还需查看结果、核对标本信息、上传数据，再由大数据平台进行处理和发布，大家就可以在网上查询到核酸检测结果了！

来源：天津市疾病预防控制中心、新华社天津分社、新华社新媒体中心、深圳卫健委微信公众号

编辑：笪文武 审校：陈雪礼