沉渣镜检法(精选八篇)
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
使用优利特Uritest-300尿液分析仪,载玻片,双筒显微镜,原装配套试纸。
1.2 标本来源
检测对象为我院门诊及住院患者2 000例,全部留取合格的尿液标本,无年龄限制,有随机尿和晨尿,标本在2 h内检测完毕。
1.3 方法
1.3.1 尿液分析仪检测方法
每份标本用一次性试管取10 ml尿液标本,将试纸条浸入尿中1~2 s后取出,在滤纸垫上轻弹一下使其去除多余尿液,置于优利特Uritest-300尿液分析仪进行分析。
1.3.2 尿液沉渣镜检法
从离心好的0.2 ml沉渣中用吸管吸出少量,冲入计数板中,在高倍镜下计数各有形成分。取平均值[白细胞正常值范围为(0~4)个/HP,红细胞正常值范围(0~1)个/HP]。
2 结果
白细胞:(1)尿液分析仪结果为阴性,镜检白细胞数>5个/HP452例(占22.60%);(2)尿液分析仪结果为阳性,镜检白细胞数<5个/HP 63例(占3.15%);(3)二者结果符合1 485例,占74.25%;(4)二者结果不符合515例,占25.75%。
红细胞:(1)尿液分析仪结果为阴性,镜检红细胞数>3个/HP239例,占11.95%;(2)尿液分析仪结果为阳性,镜检红细胞数<3个/HP 73例,占3.65%;(3)二者结果符合1 688例,占84.40%;(4)二者结果不符合312例,占15.60%。
另外,可见管型1~3个/LP 81例,约占4.05%;草酸盐,尿酸盐,磷酸盐及磺胺类结晶345例,约占17.25%。
3 讨论
随着医学实验室自动化程度的提高,对检验结果的质量要求越来越高,由于尿液成分复杂、干化学项目繁多,其检测原理各不相同,任何外源性物质对标本或试剂模块的干扰都能引起检验结果的误差,出现假阴性或假阳性,导致结果的不准确性。从表1、2中可看出尿液分析仪与镜检并不存在一一对应关系[3],尿液分析仪的结果,并不能完全反映尿中有形成分的实际数量,红细胞和白细胞镜检结果与尿液分析仪上并没有固定的对应值,这是由于尿液分析仪检测红、白细胞是化学检测法[4],而显微镜检查是物理检测法,方法学的不同,对同一尿样的检测结果不可能完全一致。因此镜检必不可少,对沉渣的自动化要求越来越迫切。
结果显示,尿液分析仪法与尿沉渣镜检法测定结果有较大差异,干化学试纸条容易受药物及其他物质干扰[5,6],可造成一定的假阳性或假阴性;而镜检只能检测未被破坏的红细胞[7]。尽管尿液分析仪法操作迅速、省力,这是由于仪器法灵敏度过高所致。据钟毓琼等[8]报道,电脑分析仪检测尿隐血的敏感度高于手工法,但不能代替尿沉渣镜检。除红、白细胞外,笔者还可以在镜检中发现磺胺类等病理性结晶、肾小管上皮细胞和寄生虫等,这对临床诊断及治疗都具有重要意义。
摘要:目的:探讨尿液分析仪和显微镜镜检法测定尿液之间结果的分析,找出最佳的检测尿液方法。方法:用尿液分析仪和显微镜镜检法同时对2 000例尿液标本进行检测。结果:尿液分析仪结果为阴性,镜检白细胞数>5个/HP占22.60%,尿液分析仪结果为阳性,镜检白细胞数<5个/HP占3.15%,二者结果符合占74.25%,二者结果不符合占25.75%;尿液分析仪结果为阴性,镜检红细胞数>3个/HP占11.95%,尿液分析仪结果为阳性,镜检红细胞数<3个/HP占3.65%,二者结果符合占84.40%,二者结果不符合占15.60%;另外,可见管型1~3个/LP约占4.05%;草酸盐,尿酸盐,磷酸盐及磺胺类结晶约占17.25%。结论:尿液分析仪和显微镜检测法测定尿液白细胞之间不成正比关系,尿液分析仪不能替代镜检法对尿液白细胞的检测。
关键词:显微镜检查,尿液分析仪,影响因素
参考文献
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[7]张晓东.三种方法检测尿隐血和红细胞的对比分析[J].中国医药导报,2009,6(2):52.
【关键词】尿沉渣;显微镜检查;尿干化学试纸法;肾脏疾病诊断
尿液是机体内的重要排泌物之一,是反映肾脏器官发生病理变化的窗口。 本文对120例新鲜尿液标本离心沉淀物进行显微镜检查,辩认和分析其有形成分,并与尿干化学试纸法进行分析对比,旨在阐明尿沉渣显微镜检查在肾脏病诊断中具有重要意义,是尿液分析中不可替代的检查方法。
1资料与方法
1.1一般资料。对2010年10月至2011年12月在我院就诊的120例患者进行尿液分析测定,其中男72例,女48例。
(1)标本收集.用一次性洁净尿杯,嘱患者留取新鲜中段尿(半小时内标本,女患者需清洗外阴)约10 ml。(2)器材。天平,台式水平离心机,离心管,普通光学显微镜,一次性吸管,载玻片,18 mm×18 mm盖玻片。
1.2方法。尿干化学试纸法:检验科做。尿沉渣显微镜检查法:嘱患者留取新鲜中段尿(半小时内标本,女患者需清洗外阴)约10 ml至离心管中,做好标志,标本经天平配平,置于离心机试管槽中,以1500转/min离心5 min,水平小心取出离心管,去上清液(180°迅速倾倒尿液于污物桶),留沉渣0.2 ml,用干净吸管反复吹打混匀离心管底部遗留尿液,并吸取1滴尿液滴于载玻片上,加盖玻片,将玻片置于显微镜上观察,先用低倍镜(10×10)观察全片,然后换高倍镜(10×40)进一步检查,细胞检查10个高倍视野(HP),管型检查20个低倍视野(LP)(沿盖玻片边缘),在高倍镜下分辩管型类型,计数各类有形成分的最低和最高数目。报告方试:XX-XY个细胞/HP,XX-XY个管型/LP,描述红细胞形态及变形率,描述上皮细胞及管型类型,以及所见细菌、寄生虫(卵)、结晶等。
1.3结果判定。离心尿红细胞>3个/HP提示血尿,若红细胞大小不一,有多种变形形态,为变形红细胞尿,考虑肾小球源性血尿;若红细胞大小一致,为均一红细胞尿,考虑非肾小球源性血尿。离心尿白细胞>5个/HP提示白细胞尿。正常人尿中可偶见透明管型,若发现其他类型管型即表示肾脏有实质性损害。尿干化学试纸法结果正常,尿沉渣镜检结果异常为尿干化学试纸法假阴性结果;尿干化学试纸法结果异常,尿沉渣镜检结果正常则为尿干化学试纸法假阳性结果。
2结果
对120例尿液标本分析测定,红细胞尿51例(42.5%),其中变形红细胞血尿32例(26.7%),均一红细胞尿19例(15.8%)。单纯白细胞尿3例(2.5%)。尿中有形成分不多53例(44.2%)。白细胞尿合并有上皮细胞5例(4.2%),白细胞尿合并有细菌4例(3.3%),白细胞尿合并均一红细胞尿2例(1.6%)。变形红细胞尿合并有白细胞、管型尿5例(4.2%),变形红细胞尿合并有管型尿19例(15.8%),变形红细胞尿合并白细胞、上皮细胞尿1例(0.8%)。尿干化学试纸法潜血、白细胞结果阴性,而尿沉渣镜检有白细胞或红细胞的异常结果7例,其假阴性率占5.5%;尿干化学试纸法潜血、白细胞结果阳性,而尿沉渣镜检红细胞及白细胞在正常范围内有13例,其假阳性率占10.7%。
3讨论
根据尿沉渣镜检有形成分分析结果,再结合尿蛋白定量,血和尿检的其他异常以及临床资料,可以提高其在肾脏病诊断、鉴别诊断和药物疗效评估中的作用。如:原发性肾病综合征,若其尿沉渣镜检有形成分少,则微小病变、膜性肾病、局灶节段性肾小球硬化可能性大;若尿中有形成分多,则系膜增生性肾小球肾炎,IgA肾病,膜增殖性肾小球肾炎可能性大 。
结果表明尿干化学试纸法存在一定的假阴性和假阳性,其红细胞测定是利用血红蛋白中亚铁血红素具有过氧化物酶样活性,在氧化氢茴香素或过氧化氢烯钴存在条件下,催化邻联甲苯胺氧化而呈色。导致假阳性的原因如尿中次氯酸盐、细菌产生的氧化物质等;而假阴性的原因见于尿中存在还原物质,如维生素-C,硫代硫酸钠等。尿白细胞分析是基于白细胞破壞后释放吲哚酚酯酶水解试带中的化学物质而显色,尤其碱性和(或)低比重尿、细菌尿、妇女白带污染均可呈阳性反应。而糖尿(20 g/L)、蛋白尿(5 g/L)或尿中有抗生素如头孢菌素等,易出现假阴性。因此,尿干化学试纸法只能作为一种筛查手段,不能代替显微镜检查。凡阳性标本须再做尿沉渣显微镜镜检,确认细胞成分。
尿液检查作为一种非侵入性的手段,在许多肾脏疾病的诊断和治疗中发挥着重要的作用。对于尿液常规检查,尿沉渣自动分析是对尿液干化学分析的补充,干化学、尿流式沉渣计数、尿沉渣镜检在方法学上优势互补, 为临床诊断提供高质量、可靠的报告,尤其对于肾脏疾病的检测,尿沉渣定量检查为疾病诊断及鉴别诊断提供了重要线索,不可忽视,是诊断肾脏、泌尿系统疾病不可缺少的重要的检测手段。
参考文献
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[2]姜傥.尿沉渣检查在肾脏病诊断中的意义[J].肾脏病与透析肾移植杂志,2005,14(2)
[3]韦常丽,吴延佳.全自动尿有形成分分析仪检测血尿的临床意义[J].医学文选,2006,25(4)
[4]苏健,陈惠萍.尿沉渣检查在肾脏疾病诊断和治疗中的应用[J].肾脏病与透析肾移植杂志,2005,14(2)
1 资料与方法
1.1 一般资料
2011年4~10月随机抽取我院住院和门诊患者清洁中段尿900份, 将尿液标本混匀后分装两管各10ml, 其中一管先行UF 1000i尿流式细胞仪检测, 后行干化学分析;另一管经1500转/min离心5min, 弃上清液, 底部剩余0.2ml, 混匀后进行光学显微镜检测, 所有标本在采集后2h内完成。
1.2 仪器与试剂
SysmexUF-1000i的全自动尿沉渣分析仪及其配套的试剂和质控品;FA-220尿干化分析仪及其配套试带;水平离心机;Olympus普通光学显微镜。
1.3 方法
严格按照操作规程使用UF-1000i全自动尿成渣分析仪和FA-220干化学分析仪;尿沉渣镜检分析参照第3版《全国临床实验操作规程》。
1.4 参考范围及其结果判断
UF-1000i参考值为RBC 0~25个/μl、WBC 0~25个/μl;人工镜检WBC参考值为0~5/HP, RBC 0~3/HP。对RBC、WBC的检测均以显微镜镜检为参照标准, 当显微镜镜检阴性而UF-1000i或干化学阳性则视为假阳性;当显微镜镜检阳性而UF-1000i或干化学阴性则视为假阴性。
1.5 统计学处理
采用SPSS 13.0统计分析软件对结果进行统计分析, 不同方法间的阳性率比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 3种方法阳性率比较
3种方法检测尿液中RBC和WBC的结果均为镜检法阳性率最高, 与干化学法、UF 1000i检测结果进行χ2检验, P<0.05, 提示结果差异有统计学意义。见表1。
2.2 3种仪器法影响因素分析
RBC检测结果UF-1000i和干化学与镜检不符合的标本有168例, 其中假阳性95例, 假阴性73例;假阳性率为10.6%, 假阴性率为8.1%。WBC检测结果干化学与UF 1000i与镜检不符合的标本有128例, 其中假阳性49例, 假阴性79例;假阳性率为5.4%, 假阴性率为8.8%。UF-1000i尿沉渣仪法和干化学法检测尿液有形成分影响因素分析见表2。
3 讨论
UF-1000i尿沉渣分析仪可用于尿中有形成分的分析, 其检测原理包括红色半导体激光的流式细胞测量技术、DNA/RNA细胞荧光染色技术, 在染液、鞘液和稀释液的作用下对尿中有形成分进行多角度的散射光和多级别的荧光检测, 从而获得高精度和高可信度的定量参数。但任何分析仪都存在一定的检测误差, 由于尿液中成分较复杂, 存在着形态大小、染色等方面的相似, 因此仪器还不能准确无误的区分各种有形成分。导致UF 1000检测尿RBC假阳性的因素主要是尿中存在大量结晶 (主要是草酸钙结晶) 、类酵母菌、细菌和脂肪滴等。RBC没有细胞核及胞浆颗粒, 因此在散点图上处于低荧光强度及散色光强度位置。结晶干扰红细胞检测的原因可能是由于草酸钙结晶与RBC的形态大小、染色性非常相似, 在散点图上存在着交叉分布, 因此对RBC计数结果影响较大[1]。类酵母菌影响RBC检测的原因可能是由于其在散点图上分布介于RBC和WBC之间, 和RBC有发生重叠的情况, 导致仪器分析信息错误[1]。细菌虽然有核, 但由于染料对细菌膜的渗透性低, 染色后荧光强度和散射光强度也较低, 当尿中细菌超过一定量而聚集成细菌团, 其大小和RBC相近, 导致仪器有可能将其误认为RBC[2]。脂肪滴以及大量存在的白细胞可能在形态大小、性质方面与RBC接近, 导致RBC假性增高。导致UF-1000i检测尿RBC假阴性的主要因素是RBC破裂。导致UF-1000i检测尿WBC假阳性的因素主要是上皮细胞 (EC) 、管型或假管型以及尿中存在大体积的类酵母菌、RBC等。由于WBC具有较大的细胞核和较多的胞浆颗粒, 具有较强的散射光强度和荧光强度, 在散点图上处于较强的散射光强度与荧光强度的位置。EC特别是小圆上皮细胞, 其大小染色敏感度和白细胞类似而干扰WBC的检测, 管型或假管型干扰白细胞检测的原因可能是由于部分小管型、假管型的大小、长度以及荧光强度与白细胞相似[3]。RBC过多也会导致WBC计数上升, 可能由于红细胞粘连, 致使仪器误认为WBC。假阴性有2例为黄疸尿标本, 可能由于胆红素的颜色、散色光及荧光抵消作用是WBC检测受到影响[4]。
干化学法的原理是:尿液成分和多联试带上各模块发生化学反应, 产生相应的颜色, 根据颜色的变化进行定量定性分析, 具有标本用量少、检测速度快、检查项目多、准确性及重复性好等优点, 但也会出现假阳性和假阴性。本文研究发现干化学与镜检RBC不符的标本。其中假阳性主要是RBC已破碎, 另外pH>8.0或尿中存在吩噻嗪类药、肌红蛋白、对热不稳定酶等也可以出现隐血假阳性。假阴性标本可能是尿中存在大量的VC, 它可竞争抑制反应而使干化学法隐血出现假阴性。干化学法与镜检WBC不符的标本, 其中假阳性者主要是由于上皮细胞过多, 假阴性标本主要是由于干化学法检测WBC是基于粒细胞含有的特异性酯酶发生的重氮化反应。因此急性感染早期、尿液中出现大量的淋巴细胞、单核细胞、大剂量的先锋霉素、庆大霉素等药物, 或尿蛋白超过5g/L, 而出现假阴性。
3种方法检测尿液中RBC和WBC的检出率均为镜检法>UF-1000i>干化学法。手工镜检尿沉渣能客观反映尿液有形成分, 因此, 当UF-1000i或干化学法其中一种方法提示RBC和WBC阳性时都应进行人工镜检, 从而减少误诊率和漏诊率, 提高尿液分析的临床检验质量。
摘要:收集我院住院及门诊患者尿液900份, 分别用UF-1000i尿沉渣分析仪、干化学分析仪与显微镜检测尿中的RBC、WBC。结果UF-1000i检测出RBC、WBC的阳性率分别为31.6%、26.7%;干化学法分别为26.8%、16.6%;尿沉渣镜检分别为36.8%、42.0%。UF-1000i尿沉渣分析仪与干化学分析仪检测尿中RBC、WBC快速简便, 但有一定的假阳性率和假阴性率, 必须将三者有机结合, 才能减少检验误差, 提高尿液分析质量。
关键词:UF-1000i,干化学法,尿沉渣镜检
参考文献
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尿干化学检测具有简便、灵敏、快速的特点,是临床尿常规检测中常用的方法之一。但受其方法学的限制,干化学法只能检测尿液的化学特性,对WBC、RBC等有形成分难以准确评价。任何干扰尿液理化特性的因素都可能造成结果的假阳性或假阴性,造成误诊或漏诊。而尿沉渣镜检虽然可以直接检测尿液中WBC、RBC,但对某些原因造成的崩解WBC、RBC却无能为力。因此,为探讨2种方法的联合应用价值,笔者应用2种方法检测600例尿液标本,结果分析如下。
2 资料与方法
2.1 标本来源
本院门诊及住院患者600例,年龄18~60岁,平均32岁,其中男性200例,女性400例。
2.2 试剂与仪器
德国拜耳Miditron Junior尿液干化学分析仪及配套Combur-10test试纸条;离心机;日本Olympus CH2光学显微镜。
2.3 方法
每次实验前保证仪器本底及室内环境符合质量控制要求,严格按技术操作规程进行。1 h内完成检测。用锥形尿液采集管取10 m L尿液混匀,完全浸没试带2 s,取出并拭去残余尿液,将试带放入仪器完成自动检测,结果自动打印并传入计算机。结果报告为:“-”、“+”、“++”、“+++”、“++++”。“+”以上为阳性。沉渣镜检以1 500 r/min转速离心5 min,弃去上清液,留取0.2 m L尿沉渣标本,充分混匀后双人双盲显微镜镜检。
2.4 统计学方法
采用SPSS15.0进行χ2检验,P>0.05为差异无统计学意义。
3 结果
干化学法检测尿液WBC阳性率为26.17%,沉渣镜检法检测尿液WBC阳性率为27.17%,经χ2检验分析,P>0.05,差异无统计学意义。干化学法与沉渣镜检法检测WBC对比阴性符合率为98.6%,阳性符合率为96.3%(见表1)。干化学法检测尿液RBC阳性率为31.17%,沉渣镜检法检测尿液RBC阳性率为23.33%,经χ2检验分析,P>0.05差异无统计学意义。干化学法与沉渣镜检法检测RBC对比阴性符合率为90%,阳性符合率为74.9%(见表2)。
4 讨论
由于干化学方法和沉渣镜检法采用2种截然不同的原理及方法,所以有时候会出现不一致的结果[1]。干化学法检测尿液WBC采用中性粒细胞酯酶法原理,试带中的吲哚酚酯在白细胞胞浆内粒细胞酯酶的作用下游离出吲哚酚,吲哚酚与试带中的重氮盐反应形成紫色缩合物,颜色深浅与粒细胞的多少及质量成比例。粒细胞酯酶主要存在于粒细胞内,少量存在于单核细胞,不存在于淋巴细胞,因此干化学法主要测定粒细胞[2]。任何影响粒细胞酯酶活性的因素都可能影响测定结果。如果患者尿液中以淋巴细胞或单核细胞为主,干化学法就无法测出这些细胞,造成假阴性结果,如免疫性疾病或肾移植术后发生排斥等。由于上皮细胞有与粒细胞相似的酯酶,进而造成假阳性结果[3]。沉渣镜检法是在显微镜下对WBC进行直观分析,既可以避免尿液中单核细胞、淋巴细胞造成的假阴性结果,又可以避免上皮细胞造成的假阳性结果。但是,由于镜检法直接观察WBC形态,因此任何造成WBC崩解的原因(如尿液p H值、尿渗透压、尿液放置时间过长等)都将导致假阴性结果。
干化学检测尿RBC原理是利用血红蛋白中的亚铁血红素具有过氧化物酶的活性,可催化过氧化氢释放新生态氧,将受体偶联苯胺等氧化呈色,既可检测红细胞,又可检测游离血红蛋白。单独出现尿干化学法检出阳性是血红蛋白尿,也可能是尿液中有肌红蛋白、对热不稳定酶、氧化剂等,可导致假阳性[4]。尿中含有大量维生素C可发生假阴性。另外,轻微下尿道结石,由于尿道出现少量新鲜红细胞,干化学隐血可以呈阴性反应。沉渣镜检只能观察到完整的红细胞或变形红细胞,但对某些原因造成的崩解红细胞却无能为力。因此,沉渣镜检法阳性率低于干化学法。尤其对于肾脏疾病患者的尿常规检验不能单用尿干化学分析仪进行筛选,而应同时进行显微镜尿沉渣镜检[5]。
综上所述,要正确认识干化学法的检测原理及其影响因素,必须与沉渣镜检法相结合,才能有效避免假阳性或假阴性结果的出现,从而为临床诊断和治疗提供更可靠的依据。
摘要:目的:探讨干化学法与沉渣镜检法联合检测尿WBC、RBC的临床意义。方法:在实验室常规条件下,采用干化学法和沉渣镜检法检测尿WBC、RBC,并对2种方法的检测结果进行比对分析。结果:干化学法和沉渣镜检法检测尿WBC、RBC有一定差异,但差异无统计学意义。结论:2种方法阴性、阳性结果之间互有交叉。日常工作中,应当2种方法联合应用,使检验结果更可靠。
关键词:干化学,尿沉渣,WBC,RBC
参考文献
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[3]袁玉德,张显达,张文陆.两种尿沉渣定量检测结果差异原因分析[J].中华医学检验杂志,2005,28(7):753-754.
[4]熊立凡,李树仁.临川检验基础[M].3版.北京:人民卫生出版社,2005:111.
1 资料与方法
1.1 基线资料:
选择2013年5月至2014年7月我院需进行尿检的80例患者作为研究对象, 随机将其分成两组, 一组为实验组, 共41例, 一组为对照组, 共39例。实验组患者中, 共有男性患者21例, 女性患者20例, 年龄在24~46岁, 平均年龄为 (31.02±3.26) 岁, 病程在0.51~3.09年, 平均病程为 (1.33±1.58) 年。对照组患者中, 共有男性患者19例, 女性患者20例, 年龄在25~48岁, 平均年龄为 (30.07±3.19) 岁, 病程在0.49~3.08年, 平均病程为 (1.34±1.57) 年。经确认, 参与本次研究的实验组和对照组患者年龄、性别、病程等一般资料无明显差异, 即P>0.05, 差异不存在统计学意义, 两组间的数据可比较和分析。
1.2 方法
1.2.1 对照组患者采取尿液干化学法进行白细胞检验:
取10 m L的新鲜尿液并混合均匀, 将试纸条完全浸没在尿液中, 并立即取出, 将试纸条的残留尿液拭去后, 将其放于仪器内进行检测, 检测结果在“+”以上则为阳性。
1.2.2 实验组患者联合应用尿液干化学法与尿沉渣镜检法进行白细胞检验:
在对照组患者检验的基础上, 给予患者尿沉渣镜检, 取10 m L混合均匀的新鲜尿液放入尿沉渣刻度离心管中, 并持续5 min的离心, 离心转数为1500 r/min, 之后将尿液的上层清液去掉, 仅留下尿沉渣, 将尿沉渣冲入定量计数板。先后使用高倍镜和低倍镜进行观察, 高倍镜下白细胞数量大于20个/μL, 则为阳性。
1.3 观察指标:
对实验组和对照组患者的检出错误率进行观察, 详细的观察指标包括漏诊率及误诊率。检出错误率越低, 表示患者的检验效果越好, 错误检出率=漏诊率+误诊率。
1.4 数据处理:
对实验组和对照组患者的检出错误率进行数据处理, 以95%作为可信区, 使用均数标准差表示计量资料, 用t检验进行对比分析, 使用率 (%) 表示计数资料, 用卡方检验进行对比和分析, P<0.05的前提下, 数据之间具有统计学意义。
2 结果
研究结果表明, 实验组患者的错误检出率低于对照组患者 (P<0.05) , 差异具有统计学意义, 详情如下:实验组41例, 漏诊1例, 误诊2例, 错误检出率4.88%;对照组41例, 漏诊6例, 误诊4例, 错误检出率24.39%。
3 讨论
尿液干化学法是检验尿液白细胞的常见方法, 在检验过程中主要通过特定试纸的变色反应来判断检验尿液的成分, 但随着临床实践渐渐发现, 该检验方法易受尿液成分、仪器设备、试纸差距等因素的影响, 在检验过程中易产生漏诊及误诊现象, 从而影响相关的临床诊断, 存在一定的临床局限性, 并没有达到令人完全满意的效果[1]。
尿液镜检法是一种较为新型的检验手段, 主要利用显微镜对尿液沉淀物进行检测, 从而了解患者的病变情况。尿液是人体的重要排泄物之一, 对其肾脏器官的病变情况具有较为清晰的反应, 尤其是对泌尿系统疾病的诊断和预后判断具有十分显著的临床价值[2]。高倍镜检结果显示, 白细胞数大于5个/高倍镜视野, 则预示着泌尿系统发生了感染或炎症情况。目前, 尿液镜检法的主要镜检手段包括自然沉降法、直接镜检法及离心沉淀法等[3]。
尿液干化学法虽然作为临床常见的尿液白细胞检验手段, 且具有一定的临床实践经验, 操作技术较为纯熟, 可是该检验方法受外部的影响较大, 因此, 为了进一步确保尿液检验的准确性, 在临床上可联合应用尿液干化学法与尿沉渣镜检法进行白细胞检验。
本研究结果表明, 采取尿液干化学法与尿沉渣镜检法联合检验的实验组患者其错误检出率远远低于采取单一尿液干化学法检验的实验组患者, 因此, 联合应用尿液干化学法与尿沉渣镜检法进行白细胞检验比单一的尿液干化学法检验临床价值更为显著, 值得推广应用于临床。
参考文献
[1]刘仍海.600例干化学法和沉渣镜检法检测尿白细胞结果分析[J].检验医学与临床, 2012, 9 (6) :733-734.
[2]孙士欣, 陈建魁, 于农, 等.尿沉渣人工显微镜镜检红细胞、白细胞与尿液干化学分析仪的结果比较分析[J].国际检验医学杂志, 2012, 33 (14) :1729-1730.
关键词:尿液分析仪,尿沉渣镜检
随着尿液分析仪的普及使用, 尿液分析既简单又快速, 为临床诊断提供了方便, 但在实际应用中可能会出现许多新的问题。为此, 笔者对尿十项分析仪测定中结果全为阴性和隐血 (++) ~ (++++) 这两种情况的标本用显微镜作沉渣镜检, 并将结果加以比较报告如下。
1材料与方法
1.1 标本
我院2006年6月送检的住院患者晨尿标本, 其中85例尿液分析仪测定全部为阴性及281例分析仪测定隐血 (++) ~ (++++) 的尿液标本, 收到标本2 h内检测完毕。
1.2 仪器与试纸
德国宝灵曼公司生产的Miditron尿十项分析仪及配套生产的Combur 10 Test M尿十项试纸条。
1.3 检测方法
按仪器的操作规程进行, 之后, 取混匀尿液10 ml, 以1500 r/min离心5 min, 去上清液, 留沉渣0.2 ml, 轻摇离心管, 使尿沉渣有形成分充分混匀, 用10×10镜头, 观察其中有形成分的全貌及管型, 再用10×40镜头观察鉴定细胞成分和计算数量, 连续观察10个不同视野, 取所见的最低和最高值, 记录结果[1]。
2结果
85例尿液分析仪测定全部为阴性的标本镜检可见3~10/HP白细胞10.6%及1~3/HP红细胞4.7%;对281例分析仪测定隐血 (++) ~ (++++) 的尿液标本检测发现, 隐血阳性级别与镜检红细胞不同步, 1.4%的隐血阳性标本镜检实为酵母菌。
3讨论
镜检发现有白细胞的患者, 大多为肾炎、肾病综合征、上呼吸道感染和术后患者。用分析仪法只能测定中性粒细胞中的酯酶, 不与淋巴细胞反应。以上病例中, 不能排除由于病因引起的淋巴细胞尿及尿中含有大剂量抗生素等药物产生的影响。大剂量青霉素滴注的患者, 尿液干化学法测定蛋白会产生假阴性结果。此外, 干化学法测定蛋白对尿液中不同类型蛋白质检测的敏感性不同, 其测量球蛋白的敏感性仅是白蛋白的1/100~1/50, 这也是造成尿蛋白测定假阴性的原因之一[2]。因此, 对于肾病患者, 特别是在疾病发展过程中需要系统观察蛋白含量的病例, 最好结合使用磺柳酸法 (或加热醋酸法) 进行实验。对红细胞镜检为阳性的患者, 考虑为临床维生素C用药干扰隐血所致, 因维生素C具有较强的还原性, 对尿液成分的测定产生竞争性抑制反应, 使结果减弱或出现假阴性。
笔者认为:①标本存放时间过长, 因为住院患者早晨统一送检, 可能标本放置太久, 引起红细胞溶解, 所以出现隐血 (+++) ~ (++++) 而镜检红细胞并不多的现象;②红细胞在肾脏或泌尿道经挤压等遇到破坏, 或尿比重过低, 尿pH值偏高, 造成红细胞破坏, 释放出血红蛋白出现在尿中, 而镜下不见或少见红细胞。这时, 应对患者做进一步的检查;③收集标本用的容器进行强氧化杀菌消毒后残余物能催化过氧化氢氧化邻甲苯胺而使结果受影响;④尿路感染时, 由于某些细菌产生过氧化物酶活性物质, 或者本身为了代谢的需要, 在繁殖过程中合成触酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶, 这些物质使红细胞测定产生假阳性结果[3];⑤大量酵母菌出现时, 可干扰仪器, 使仪器无法辨认, 因此将其误认为红细胞及使红细胞分析出现假阳性现象。
镜检时应注意红细胞形态的改变, 有助于出血部位的定位诊断。上泌尿道出血时, 红细胞形态往往缩小、变形或只剩下胞影, 有时要与酵母菌加以区别, 必要时可做瑞氏染色。肾小球出血者, 80%以上的红细胞有多形性改变, 如红细胞膜出现粗刺、细刺、带泡、穿孔、环状等改变。肾小球除外出血时, 红细胞形态多正常或仅有中空现象。
因此, 尿液化学分析仪检测仅是一个筛选手段, 尿沉渣镜检可发现和纠正尿分析仪检测报告中的误差, 在平时工作中应将所有标本都作尿沉镜检的必要性。尿液分析仪检测应与手工操作相结合, 提高尿液检验的质量。
参考文献
[1]叶应妩, 王毓三.全国临床检验操作规程.东南大学出版社, 1997, 133.
[2]丛玉隆, 王淑娟.今日临床检验学.中国科学技术出版社, 1997, 236-239.
1 材料与方法
1.1 仪器及试剂
日本东亚sysmex UF-100全自动尿沉渣分析仪及配套试剂;uritest-500尿干化学仪及配套试剂条。
1.2 标本来源
1 000例我院近期门诊和住院患者的新鲜晨尿, 收到标本2 h内检测完毕。
1.3 检测方法
每日检测前均用配套试剂条和室内质控液行质量控制试验, 严格按照仪器操作说明进行检测。患者用一次性洁净塑料杯留取晨尿后, 取10 mL于离心管, 行尿液干化学分析, 再行尿沉渣分析仪检测, 最后以1 500 r/min离心5 min, 弃去上清液, 留沉渣0.2 mL, 轻摇离心管并混匀, 行尿沉渣镜检, 观察细胞成分和计算数量, 并记录结果。
1.4 参考范围
UF-100全自动尿沉渣分析仪正常值参考范围:红细胞0~25个/μL, 白细胞0~25个/μL;显微镜镜检红细胞0~3个/Hp, 白细胞0~5个/Hp, 透明管型0~1个/LP, 病理管型0个/LP, 超出此范围视为阳性。
2 结果
1 000例尿标本中尿沉渣分析仪检测异常者426例, 经沉渣镜检有48例属于正常, 其假阳性率为10.8 %, 48例假阳性标本中, 其中报告结果提示红细胞异常者26例, 占54.2 %, 白细胞异常者2例, 占4.2 %, 病理管型异常者16例, 占33.3 %, 其它 (精子和杂质者) 4例, 占8.3 %。
3 讨论
UF-100全自动尿沉渣分析仪应用流式细胞术和电阻抗分析的原理, 使尿液中有形成分经荧光色素染色后, 在鞘流液的作用下形成单列, 快速通过氩激光检测区, 仪器检测散射光、荧光和电阻抗的变化。仪器捕获荧光强度、前向荧光脉冲宽度 (主要反映细胞染色质的强度) 、前向散射光强度 (主要反映细胞大小) 、前向散射光脉冲宽度 (主要反映细胞的长度) 、电阻抗信号 (主要反映细胞的体积) 后, 综合识别、计算得到细胞的大小、长度、体积和染色质长度等资料, 并作出定量报告[2]。
用UF-100全自动尿沉渣分析仪检测尿中红细胞时, 当尿中有大量的细菌、酵母样菌、精子、结晶存在时, 由于这些物质的荧光参数和红细胞多有重叠, 会对红细胞计数产生干扰, 导致假阳性结果。尿沉渣分析仪可对尿中所有白细胞进行检测, 但只能对尿中完整细胞有形成分进行检测, 对破损的细胞不能检测, 对影红细胞也会漏诊。尿沉渣分析仪根据前向散射光脉冲测定管型长度、荧光脉冲测定管型内含物、电阻抗脉冲测定管型外型, 而尿沉渣分析仪检测管型只能根据管型的内容物染色后产生的荧光强弱来区分病理管型和透明管型, 不能明确病理管型的分类;尿液中黏液丝大量存在并聚集, 其电阻强度与透明管型一致而被误检;女性尿液中存在较多的上皮细胞时, 部分上皮细胞粘连成一体, 其分布宽度和散射脉冲宽度均增大, 易误认为病理管型;尿液中存在较多的脓细胞时, 成团的细胞在鞘流液中易形成串珠状排列, 使前向散射光宽度和荧光脉冲宽度增大, 而被仪器误认;相反脂肪管型内含有的脂肪荧光着色不良, 产生荧光强度低, 分布区域与透明管型相同, 仪器可能将脂肪管型误认为透明管型, 因此尿沉渣分析仪区分的透明管型并非完全是非病理管型。
UF-100全自动尿沉渣分析仪检测时, 尿液不须离心、标本用量少、检测细胞多、检测速度快, 易于质量控制和标准化, 检测精确度较高。但是, 尿沉渣自动分析仪目前尚不能鉴别异常细胞, 尤其不能明确病理性管型的分类, 因此, 当尿沉渣分析仪提示结果出现异常时, 应结合尿沉渣显微镜检查共同分析, 为临床提供快速、准确的尿液检查结果。
参考文献
[1]程颖, 程燃.UF-100全自动尿沉渣分析仪影响因素的探讨[J].重庆医学, 2006, 35 (4) 346-347.349.
1资料与方法
1.1 一般资料
选择我院2010年6月-2011年6月住院患者1000例为研究对象, 男645例, 女355例, 年龄为32~75岁, 中位年龄47.1岁, 使用一次性洁净塑料尿杯收集患者晨尿样本共1000份。
1.2 仪器与试剂
离心机选用LD4-2A型台式低速离心机, 尿沉渣镜检选用CH生化显微镜, 尿沉渣全自动分析仪则采用UF-100型尿沉渣仪, 一次性吸管。
1.3 检验方法
所有患者的尿液样本均经充分混匀后分别使用尿沉渣自动分析仪和显微镜沉渣检查2种方式进行。所有仪器的使用步骤均严格遵照仪器说明书进行测定。先使用全自动分析仪进行自动吸样分析。再进行尿沉渣镜检:将混匀的尿液装入10ml离心管, 并在离心半径8cm下, 以1500转/min的速度, 离心5min, 留取0.2ml沉渣液, 并用“沙黄结晶紫”染液1滴同尿沉渣液进行混匀约5min, 然后提取尿沉渣染色混合液1滴置于玻片上加盖玻片, 再使用显微镜按常规进行镜检, 并将红细胞以及白细胞数同另外一种方法进行对比。所有检查均在取样2h内完成。
2结果
两法检测1000份标本, pH值、亚硝酸盐、葡萄糖、比重、红细胞、蛋白质、胆红素、尿胆原、酮体、白细胞的结果符合率依次为97%、96%、90%、97%、89%、88%、99%、98%、98%、88%。结果大致符合。对200份仪器法测定为阴性的尿沉渣镜检, 检出管型6份 (3%) , 白细胞11份 (5.5%) , 红细胞9份 (4.5%) 。
3讨论
尿沉渣镜检对于泌尿系统疾病以及生殖系统疾病的诊断、鉴别、疗效评价、预后判别等都有着显著的参考价值。在目前的环境下, 尿沉渣显微镜检查以及最先进的临床技术流式尿沉渣全自动分析仪, 尿液的化学成分分析在临床工作中占有重要的地位。其实尿沉渣显微镜检查以及最先进的临床技术流式尿沉渣全自动分析仪在临床上都有其显著的特点以及不足之处。
全自动尿沉渣分析仪检测尿中红细胞时, 当尿中有大量的细菌、酵母样菌、精子、结晶存在时, 由于这些物质的荧光参数和红细胞多有重叠, 会对红细胞计数产生干扰, 导致假阳性结果。尿沉渣分析仪可对尿中所有白细胞进行检测, 但只能对尿中完整细胞有形成分进行检测, 对破损的细胞不能检测, 对影红细胞也会漏诊。尿沉渣分析仪根据前向散射光脉冲测定管型长度、荧光脉冲测定管型内含物、电阻抗脉冲测定管型外型, 而尿沉渣分析仪检测管型只能根据管型的内容物染色后产生的荧光强弱来区分病理管型和透明管型, 不能明确病理管型的分类;尿液中黏液丝大量存在并聚集, 其电阻强度与透明管型一致而被误检;女性尿液中存在较多的上皮细胞时, 部分上皮细胞粘连成一体, 其分布宽度和散射脉冲宽度均增大, 易误认为病理管型;尿液中存在较多的脓细胞时, 成团的细胞在鞘流液中易形成串珠状排列, 使前向散射光宽度和荧光脉冲宽度增大, 而被仪器误认。
我们认为仪器法易受以下因素影响: (1) pH:标本的新鲜度, 尿液中缺少硝酸盐, 应用利尿药等; (2) 亚硝酸盐:放置时间过久污染等出现假阳性, 高比重尿可降低反应的灵敏度, 尿中的亚硝酸盐离子<1.0mg/L时, 可能出现假阴性结果; (3) 葡萄糖:首先要确定是生理性糖尿还是病理性糖尿, 患者服用的某些药物、酮体尿、温度条件、试纸带长期暴露于空气中氧化变色出现假阳性; (4) 比重:标本新鲜程度, 某些药物, 异常尿色pH的影响; (5) 红细胞:大量维生素C、肌红蛋白、尿路感染时细菌产生过氧化氢酶的影响; (6) 尿蛋白:干化学测球蛋白的敏感性低, 药物; (7) 胆红素、尿胆原:某些饮食、药物, 标本中的防腐剂或亚硝酸盐含量高时出现假阴性, 当存在内源性干扰物质可致假阳性; (8) 酮体:标本一定要新鲜, 否则出现假阴性, 不同病因引起的酮症酮体成分也不同; (9) 白细胞:干化学法不与淋巴细胞反应, 当某种疾病尿中以淋巴细胞为主时易出现假阴性, 尿液未混匀、分泌物的污染以及一些药物的污染可出现假阳性, 高比重尿、高糖尿、室温较低均可造成自细胞测定结果偏低。原则上阳性结果应以手工法复核, 通过复核可以发现许多药物或其他干扰。与尿沉渣镜检不一致者亦应复查。此外, 镜检能够直接观察有形成分, 如各种管型、异常细胞、霉菌、毛滴虫和有意义的结晶, 对泌尿系统疾病检测尤其重要。