尿生化指标（精选八篇）

1 资料与方法

1.1 一般资料

健康对照组40名为健康体检人群无糖尿病及高血压病的人群;高血压组, 我院心内科住院患者92例, 年龄35~60岁, 尿常规蛋白测定性阴性组44例, 尿常规蛋白测定阳性组48例;糖尿病组, 我院内分泌科住院患者83例, 年龄36~62岁, 尿常规蛋白测定性阴性组40例, 尿常规蛋白测定阳性组43例;受检者均清晨抽血、留晨尿检查。

1.2 仪器与试剂

生化项目:mAlb (伊立康) ;NAG和β2-MG (金丝尔) ;CysC (宁波美康) ;CRE (日本生研) ;BUN, GGT (东瓯) 采用日本东芝TBA120FR全自动生化分析仪测定, 尿蛋白测定 (迪瑞) 采用长春迪瑞H-500尿干化学分析仪测定。

1.3 方法

GGT用速率法检测, mAlb、NAG和β2-MG用免疫比浊法检测, CysC采用乳胶增强免疫比浊法检测, CRE采用酶法检测;尿蛋白定性采用迪瑞尿常规分析试纸PH值误差法检测。

1.4 统计学处理

以±s表示, 采用两样本均数的t检验。

2 结果

比较各组间测定结果的差异见表1。

注:*与健康组对照, P<0.05;#与蛋白阴性组对照, P<0.05。

3 讨论

肾损伤一般是指各种致病因素造成的肾小球或肾小管功能障碍, 也是许多疾病发展到一定阶段所带来的严重并发症。早期症状隐匿, 临床体征与常规检测指标多不典型, 因早期难于发现而贻误病情。近年来, 随着多种肾损伤标志物被发现, 相关检测手段和评价方法不断改进, 使实验诊断方法的选择范围更广、效率更高[3]。肾脏功能主要指肾小球滤过功能和肾小管的重吸收、排泌功能, 一些慢性的疾病例如高血压与糖尿病, 其各种致病因子对肾小球滤过膜和肾小管发生结构和功能损伤, 使其血液和尿液生化指标发生变化, 可用来早期检测出肾脏的损伤。

血清胱抑素C是一种碱性非糖化相对小分子的分泌性蛋白质, 由机体所有的有核细胞以恒定速率产生, 其合成不受肌肉量和急性反应等因素影响, 即使在炎症状态下其产生也不会改变, 在肾小球滤过功能检测中血清尿素氮、肌酐及内生肌酐清除率是最常用的指标。由于以上指标尚存诸多不足, 如尿素氮易受饮食中蛋白质和机体代谢状态的影响, 肌肉质量减少会使肌酐测定值低下, 肌酐除经肾小球滤过外还经肾小管分泌。由于肾脏具有强大的储备功能, CRE、BUN在肾早期损伤时变化不明显, 而胱抑素C几乎全部由肾小球滤过, 被肾小管重吸收和降解, 从而使胱抑素成为测定肾小球滤过率的标志物, 具备作为GFR理想标志物的条件, 是反映早期肾功能损伤较理想的指标。

β2-MG是体内有核细胞包括淋巴细胞、血小板、多形核白细胞产生的一种小分子球蛋白, 其分子量为11800, 正常人血中β2-MG浓度很低, 可自由通过肾小球, 然后在近曲小管内几乎全部被重吸收。研究显示, 尿β2-MG能较早地反映高血压早期肾损害, 本文结果表示显示, 在尿蛋白阴性、血肌酐和尿素氮均正常的高血压与糖尿病患者的血β2-MG和尿β2-MG浓度已明显高于健康人群。当尿蛋白测定阳性时, 血β2-MG和尿β2-MG浓度更高, 其之间的关系更待进一步研究。

据研究报道, GGT在肾脏中含量最为丰富, GGT分子量较大, 不易通过肾小球, 尿液中GGT主要由肾小管的上皮细胞分泌, 肾脏轻微受损时尿液中可出现大量GGT;尿GGT不仅能够反映肾脏的早期损伤, 随着肾脏受损程度的加剧, 尿GGT也会相应的升高, 对肾脏损伤的发展可起到预示作用。

m Alb是血清中含量最多的蛋白质, 相对分子质量中等, 正常情况下尿中排量极微。m Alb是可通过肾小球滤过膜的一种最小的蛋白质, 在肾小管中几乎可以完全被重吸收。由于Alb带负电荷, 正常情况下经滤过膜电荷选择屏障与m Alb之间的电荷相斥作用, 绝大部分不能通过肾小球滤过膜, 然而肾小球滤过屏障受损m Alb滤过量超出肾小管重吸收量时, 尿中Alb含量可明显升高。

N-乙酰-B-D-氨基葡萄糖苷酶 (NAG) 来源于近端小管上皮细胞的溶酶体, 当肾脏实质性病变时, 肾小管上皮细胞的破坏可使尿中NAG活性显著增高, 甚至高于正常人的1200倍。对于肾小管间质病变NAG是一个很灵敏且特异性较强的反映肾实质损伤的指标。

总之, 选择性检测β2-MG、CysC, 尿GGT、mAlb、NAG、尿β2-MG, 更早的发现高血压与糖尿病患者肾脏的损伤, 及时尽早的干预终末肾病的发生。

参考文献

[1]伍松姣, 陈耀宇.血、尿β2-MG检测在原发性高血压患者早期肾损伤中的意义[J].广西中医学院学报, 2007, 10 (3) :16-17.

[2]叶力克西, 王平.早期肾损伤系列临床检测的选择及应用[J].检验医学与临床, 2008, 5 (18) :1152-1153.

血清标本溶血对血液生化指标的影响；李大磊1，史文华1，刘志峰1,2；1山东省天然药物工程技术研究中心；2烟台大学药学院山东省烟台市264005；摘要：目的探讨血清标本溶血对血液生化检验结果的影；关键词：溶血；生化检验；；Theinfluenceofhemolysiso；LIDa-lei1，SHIWen-hua1，LI；1．ShandongEngineerin

血清标本溶血对血液生化指标的影响 李大磊1，史文华1，刘志峰1,2 1山东省天然药物工程技术研究中心 2烟台大学药学院 山东省烟台市 264005 摘要：目的 探讨血清标本溶血对血液生化检验结果的影响，为药物安全性评价的长期毒性试验数据的分析提供一定的依据。方法 采用全自动生化分析仪检测10份正常大鼠血液标本在溶血前和溶血后血清葡萄糖(GLU)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐（Cre）、尿素氮(BUN)、胆固醇(CHO)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、钙（Ca++）、镁（Mg++）、钠（Na+）、钾（K+）、氯（Cl-）的值，并进行了比较和统计分析。结果 溶血后AST、TBIL、ALT、K+的值比溶血前的值高，具有统计学意义；Cre的值比溶血前的值低，统计差异显著；GLU、TP、ALB、BUN、CHO、ALP、Ca++、Mg++、Na+、Cl-的值溶血前后未见明显统计学意义的改变。结论 溶血对血清AST、TBIL、ALTK+、Cre有明显的干扰影响，提请在分析测定结果时注意溶血情况。

关键词：溶血；生化检验；

The influence of hemolysis on sericem biochemical tests LI Da-lei1，SHI Wen-hua1，LIU Zhi-feng1,2 1．Shandong Engineering Research Center for Natural Drugs, Yantai, Shandong 264003 2．School of Pharmacy, Yantai University, Yantai, Shandong 264005 Abstraet：Aim To observe the influence of hemolysis on the results of biochemical tests.Methods The blood collected from the rat divided into 2 samples, one of which is to process hemolysis serum, the other is to process normal serum.The serum biochemical data were detected respectively, which include glucose(GLU), alanine aminotransferase(ALT), aspartate aminotransferase(AST), total protein(TP), albumin(ALB), creatinine(Cre), Blood uric nitrogen(BUN), cholesterol(CHO), alkaline phosphal ase(ALP), total bilinibin(TBIL), calcium(Ca++), magnesium(Mg++), natrium(Na+), kalium(K+), chlorin(Cl-).The data were treated with paired-test.Resluts The level of serum AST, TBIL, ALT and K+ increased in hemolysis samples than normal.The level of serum Cre in hemolysis samples is lower than normal.There is no significant difference in serum GLU, TP, ALB, BUN, CHO, Ca++, Mg++, Na+ and Cl-.These results indicate that hemolysis could interfere the results of serum AST, TBIL, ALT, K+ and Cre.The significance of hemolysis on serum biochemical analysis should be regarded in drug safety evaluation.Key words ：Hemolysis；Biochemical analysis 在新药安全性评价的长期毒性试验中，血液生化指标的分析对药物毒性作用的了解和毒作用靶器官的判断具有重要的意义，是评价药物毒性的重要依据之一。

长期毒性试验的血液生化分析具有其特殊性，例如动物尤其是小动物的采血是不可重复的；血液生化测定结果的统计分析受数据资料数的限制等。在工作中往往因各种原因导致标本溶血，溶血样本不参与结果分析往往使统计资料数偏少，因此血清标本溶血时主要影响哪些指标，测定结果是否可以参与统计数据的分析，是所有药物安全性评价工作者需要了解的问题。为了能及时客观地分析生化指标的变化是否具有临床意义，应当详细了解标本溶血对各项血液生化指标的影响。目前国内尚未见标本溶血对药物安全评价所要求的十几项血清生化指标影响的报道，本文观察了药物安全评价长期毒性试验中需要测定的生化指标在标本溶血前后检测结果的变化，旨在为标本溶血时血液生化结果分析提供一定的参考依据，尽量增加生化测定数据的可利用性。材料与方法 1.1 动物来源 SD大鼠，清洁级。由山东绿叶制药股份有限公司实验动物中心提供，动物合格证号为：鲁动质字D20021133。

1.2 仪器与试剂

AUTOLAB全自动生化分析仪（AMS，意大利）。血清电解质分析仪(MEDICA，美国，EASYLYTE PLUS)，试剂原装。血糖（GLU）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、肌酐（Cre）、尿素氮（BUN）、胆固醇（CHO）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）、镁、钙血液生化分析试剂盒，均购自中生北控生物科技股份有限公司。

1.3 溶血的血清标本的制备

取SD大鼠10只，雌雄各半。禁食不禁水12小时，用水合氯醛麻醉后腹主动脉取血6ml，分别注入两支干燥试管各3ml。其中一支让其自然凝固，另一支在血液凝固前用金属棒搅拌

使其溶血，然后以3 000 r*min-1离心10min，取上清液分别为未溶血和溶血的血清标本。

1.4 生化指标的测定

用葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖(GLU)、连续监测法测定谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)、双缩脲法测定总蛋白(TP)、溴甲酚绿法测定白蛋白(ALB)、苦味酸法测定肌酐（Cre）、两点动力法测定尿素氮(BUN)、酶比色法测定胆固醇(CHO)、连续监测法测定碱性磷酸酶(ALP)、重氮法测定总胆红素(TBIL)、邻甲酚酞络合酮比色法测定Ca++、二甲苯胺蓝法测定Mg++的值，以上指标均用AUTOLAB全自动生化分析仪测定。用EASYLYTE PLUS测定血清电解质Na+、K+、Cl-的值。结果

溶血后AST、TBIL、ALT、K+的值比溶血前的值高；Cre的值比溶血前的值低，GLU、TP、ALB、BUN、CHO、Ca++、Mg++、Na+、Cl-的值在溶血前后未见明显改变（表1）。

Table 1 The influence of sample hemolysis on biochemical tests（X±SD）biochemical datum AST(IU/L)ALT(IU/L)T-BIL(mg/dl)K+(mmol/l)ALP(IU/L)Cre(mg/dl)GLU(mg/dl)Cl-(mmol/l)TP(g/L)ALB(g/L)BUN(mg/dL)CHO(mg/dl)Ca++(mg/dl)Mg++(mg/dl)Na+(mmol/l)3 讨论

3.1.谷草转氨酶(AST)人红细胞中AST活性约为血浆中的40倍[1]。当标本溶血时，势必引起血清中AST活性的升高，从而使溶血标本的结果明显高于未溶血标本。AST主要是作为肝损伤的敏感指标，Normal Serum 131.5±19.5 42.8±8.5 0.13±0.05 4.6±0.3 255.5±112.4 0.83±0.18 105.5±22.4 107.4±3.7 60.2±4.6 17.2±1.8 20.5±3.8 48.7±6.9 18.8±7.2 1.5±0.8 133.8±1.9 Hemolysis serum 247.7±27.4** 49.9±6.3** 0.49±0.18** 5.9±0.5** 243.1±108.9** 0.61±0.19** 98.7±21.5* 109.0±2.6* 61.2±2.9 17.2±1.3 21.6±4.9 50.7±6.0 20.9±7.8 1.7±0.7 134.9±4.4 % 91.7 18.9 315.0 27.2-5.1-27.7-5.1 1.5 2.1 0.8 4.9 4.6 27.0 42.1 0.8 Compared with normal serum *P<0.05;**P<0.01.测定结果的偏高会导致假阳性的产生，严重影响了药物毒性的判断。故溶血标本AST的测定结果不能用于统计结果分析，若出现溶血标本，应当在报告中注明。

3.2 谷丙转氨酶(ALT)细胞内ALT含量比血浆中高约7倍，因此溶血后ALT含量测定的增高主要来源于细胞内ALT的大量释放。可见与AST相比，ALT受溶血影响轻些，故对样品的要求低一些，如果标本溶血不很严重，可以参与统计资料的处理，但在分析结果时要注意考虑溶血的影响。

3.3 总胆红素(TBIL)中生北控生物科技股份有限公司的测定试剂盒是用重氮法测定总胆红素的，最后生成红紫色的偶氮胆红素，主要在波长为540nm～560nm处有光吸收。而血红蛋白在波长540nm～550nm处有光吸收[2]，恰与偶氮胆红素的比色波长相近。因此溶血后红细胞破裂时大量血红蛋白进入血清，势必造成总胆红素测定值的升高，是总胆红素测定的正向干扰因素。此外，由于血红蛋白与重氮试剂反应形成的产物可破坏偶氮胆红素，溶血对重氮法测定胆红素同时存在负向干扰，使测定结果偏低，但该作用较轻微[3]，因此溶血后由于血红蛋白对测定结果的干扰，胆红素的测定结果往往偏高。

3.4 钾（K+）

钾是细胞内液的主要阳离子，约98％的钾存于细胞内，红细胞内钾浓度约为105mmol/L，而血清中仅有3.5 mmol/L～5.4 mmol/L[4]。因此溶血造成血清钾测定的增高主要来源于红细胞内中钾的大量释放。有报道表明血清游离血红蛋白在 2.5～2.8g / L时血清钾增高14%～16%，血清游离血红蛋白达 6.6g / L时血清钾增高可达41%[5]，因此在分析血清钾的结果时引起注意。

3.5 肌酐（Cre）

中生北控生物科技股份有限公司的测定试剂盒是采用苦味酸法测定Cre的。而苦味酸特异性较差，易受其它还原性物质影响，主要是维生素C、酮体、丙酮酸等假肌酐干扰[4]。假肌酐物质亦可与苦味酸形成颜色反应，导致测定值发生偏差。这种假肌酐物质红细胞中最多，血清中较少，故溶血后红细胞中假肌酐物质的释放是造成测定值发生偏差的主要原因。

3.6 血清葡萄糖(GLU)中生北控生物科技股份有限公司的测定试剂盒是采用葡萄糖氧化酶法测定GLU，葡萄糖氧化酶法的特异性较强，干扰物较少，而过氧化氢酶易受到其它物的影响，如维生素C、谷胱苷肽均因能竞争H2O2而导致负偏差[4]。3.7碱性磷酸酶(ALP)中生北控生物科技股份有限公司的测定试剂盒是采用连续监测法测定ALP的。连续监测法测定ALP是通过在405nm处连续监测生成的黄色对硝基酚氧离子，根据单位时间内吸光度的增加来算出ALP的活力，因此排除了血红蛋白在波长540nm～550nm处光吸收的影响。故溶血样本ALP测定结果降低的原因可能是红细胞破裂逸出了抑制ALP或底物反应的物质。

3.8 氯（Cl-）

血浆中氯约为103mmol/L，红细胞中氯约为49~54mmol/L。溶血会导致细胞内的氯离子转移到血清中，从而引起了血清氯离子测定值得升高。[4] 3.9溶血后对测定结果无明显影响的项目主要包括总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、胆固醇(CHO)、Ca++、Mg++和Na+。溶血后测定结果与未溶血时比较无统计学差异（P>0.05）。可能原因是这些项目的测定方法受溶血影响不大，因此在新药的安全评价时可以列入统计资料中进行统计分析和结果判定。

3.10 溶血原因及其防止

高亚英[6]等认为溶血的原因主要是操作不当和抽血器具不合格造成的。结合我们日常工作分析造成溶血的可能原因主要包括：（1）由于抽血困难，采血时定位进针不准、针尖在血管中探来探去造成血肿等而发生溶血。（2）注射器和针头连接不紧，采血时空气进入，在抽取的血标本中混有泡沫，这种混有泡沫的血标本，放置一定时间后泡沫破裂或迅速干燥，造成血细胞破坏而发生溶血。（3）血标本在运输过程中过度振荡或贮存不当。（4）不合格的塑料制品会因聚合不完全而具有毒性，这种毒性可造成溶血；（5）试管质量粗糙。

因此，在采血、检验过程中必须注意细心操作，并注意注射器、针头和试管的质量。样本发生溶血后血清谷草转氨酶(AST)不能参与统计结果的处理，其他指标在参与统计结果处理时，注意分析溶血的影响，并在数据中加以标注。

参考文献

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2008年7月-2010年7月在我院医治的带有糖尿病肾病并发症的糖尿病患者95例作为糖尿病组, 男30例, 女65例, 年龄22～48岁, 平均34.1岁。另外, 选择健康体检者50例为对照组, 年龄42～70岁, 平均年龄 (58.3±9.0) 岁。

1.2 仪器与方法

尿微量白蛋白测定试剂盒, 肌酐测定试剂盒均购于中生公司。仪器应用瑞士产cobasMIRAplus全自动生化分析仪。尿蛋白测定, 取标本10 mL, 1 500rpm离心10min, 取上清液10μL, 加缓冲液250μL, 抗血清50μL, 测定波长340nm, 反应温度37℃, 测定时限300s, 5点定标, 范围5～200mg/L。肌酐采用Jaffe's法, 尿标本预先用生理盐水30倍稀释测定[2]。

1.3 标本

对照组均分别留取24h尿和随机尿, 测定24h白蛋白和每升白蛋白及白蛋白/肌酐比值, 并以不同方法计算正常值, 患者组均取随机尿测定白蛋白及肌酐, 以白蛋白/肌酐比值报告, 以上标本均当日测定。

1.4 统计学处理

结果用 (x±s) 表示, 组间比较采用t检验。

2 结果

糖尿病组阳性率41%, 尿微量白蛋白 (43.62±12.10) μg/mL;对照组阳性率为0, 尿微量白蛋白 (10.30±3.50) μg/mL。糖尿病组尿微量白蛋白高于对照组, 差异具有统计学意义 (P<0.01) 。

3 讨论

糖尿病肾病是糖尿病最严重时微血管并发症之一, 其早期以肾小球损伤为主, 而尿微量白蛋白是肾脏早期损伤的重要标志。测定尿微量白蛋白最理想的方法是留取24h标本, 但因留取困难, 在实际应用上受到限制。随机尿测定是目前最常用、最易行的方法但应同时测定肌酐, 因每日肌酐排出量相对恒定, 可避免尿量变化对结果的影响。尿微量白蛋白测定是一种灵敏、简便、快速的测定方法, 易于在常规实验室中广泛应用, 对早期肾损害的诊断远远优于常规定性或半定量试验[3]。

糖尿病患者尿微量白蛋白阳性时与心血管疾病发病有密切相关性。也就是说尿微量白蛋白阳性者心血管疾病患病可能性增加。尿微量白蛋白阳性不仅是肾脏血管损伤的危险因素, 2型糖尿病主要致死原因是心血管疾病, 早期常规监控尿微量白蛋白独立危险因素, 对防治糖尿病血管并发症具有重要意义[4]。

糖尿病有很多并发症, 心血管病变和神经病变首当其冲, 其次是肾脏病变。对于前两者, 由于症状出现早且突出, 易引起患者重视。而肾脏病变比较隐匿, 尤其是在糖尿病肾病早期, 往往无明显症状, 不易被及时发现而发展为不可逆的肾损害, 导致终末期肾病, 即肾功能衰竭、尿毒症的发生[5]。

其实, 糖尿病肾病是可以早期发现的, 其方法是定期检查尿微量白蛋白。医学专家指出:1型糖尿病患者在被确诊后, 至少每半年检查1次, 同时进行肾功能评估;2型糖尿病患者一旦被确诊, 就要坚持每半年检查1次, 并进行肾功能评估[6]。

定期监测尿白蛋白的排出量对于糖尿病病人慢性并发症的防治十分重要。如6个月内连续2次检测尿中白蛋白排泄率达到上述微量白蛋白尿诊断范围, 并排除其他原因所致, 是诊断早期或隐匿性糖尿病肾病的标志。微量白蛋白测定是一种灵敏、简便、快速的方法, 易于在常规实验室中广泛应用, 对早期肾损害的诊断远远优于常规定性或半定量试验, 是一个重要的终点指标对于有微量白蛋白尿的糖尿病患者来说, 需要采取综合干预措施, 即: (1) 患者应保持良好生活方式, 做到低盐低脂、低热量饮食和参加适宜的体育锻炼; (2) 糖化血红蛋白控制在7.0%; (3) 血压控制在130/80mmHg左右; (4) 低密度脂蛋白胆固醇控制在≤2.6 mmol/L, 甘油三酯控制在≤mmol/L; (5) 在医生指导下服用血管紧张素转化酶抑制剂 (ACEI) 和血管紧张素受体拮抗剂 (ARB) 。

摘要：目的:对尿微量白蛋白生化检测在糖尿病患者中的临床应用进行探讨。方法:选择2008年7月-2010年7月在我院医治的带有糖尿病肾病并发症的糖尿病患者95例作为糖尿病组, 男30例, 女65例, 年龄2248岁, 平均34.1岁。另外, 选择健康体检者50例为对照组, 年龄4270岁。对其采用尿微量白蛋白生化检测。结果:糖尿病组阳性率41%, 尿微量白蛋白 (43.62±12.10) μg/mL;对照组阳性率为0, 尿微量白蛋白 (10.30±3.50) μg/mL。糖尿病组尿微量白蛋白高于正常对照组, 具有统计学差异 (P<0.01) 。结论:糖尿病肾病是糖尿病最严重时微血管并发症之一, 其早期以肾小球损伤为主, 而尿微量白蛋白是肾脏早期损伤的重要标志。

关键词：尿微量白蛋白,生化检测,糖尿病患者,临床应用

参考文献

[1]孟冬梅.尿微量白蛋白在糖尿病肾病早期的意义[J].中国误诊学杂志, 2009 (10) .

[2]顾小红.糖尿病患者尿微量白蛋白及血脂水平分析[J].中国误诊学杂志, 2008 (6) .

[3]张晓青, 宗成国.联合检测尿mAlb/Cr、NAG、血尿β-2-MG对早期诊断糖尿病肾病的价值[J].中国误诊学杂志, 2009 (16) .

[4]曲红艳.尿微量白蛋白检测对糖尿病早期肾损伤的诊断价值[J].中国冶金工业医学杂志, 2008 (2) .

[5]金荣.尿微量白蛋白发生的临床意义[J].中国医疗前沿, 2009 (8) .

1 资料与方法

1.1 一般资料

我院2008年1月至2011年1月间收治75例肝硬化患者住院患者, 其中男42例, 女33例, 年龄24～79岁, 平均46.8±3.1岁。乙肝肝硬化53例, 丙肝肝硬化11例, 酒精性肝硬化11例:失偿性肝硬化61例, 代偿性肝硬化14例。75例为健康体检者, 其中, 女31例, 男44例, 年龄23～78岁, 平均年龄45.1±2.9岁。诊断符合2000年全国病毒性肝炎防治方案。

1.2 方法

1.2.1 标本采集

清晨空腹抽取静脉血4mL, 将血以3000r/min离心2.5min后, 取血清以日本日立7090全自动生化分析仪检测。

1.2.2 各项指标观察

检测两组对象血清中的草氨酸氨基转移酶 (AST) 、丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 、球蛋白 (GLB) 、白蛋白 (ALB) 、总胆红素 (TBIL) 、前白蛋白 (PAB) 、总胆汁酸 (TBA) [1], 各个指标正常值分别为:<35U/L, <40U/L, <29g/L, >35g/L, <17.1μmol/L, 200～250mg/L, <10μmol/L, 分析肝硬化患者与健康人的数据各项目的不同变化。

2 结果

两组研究对象的检测结果对比如附表。

3 讨论

肝脏在人体新陈代谢中起特别重要的作用, 是人体内脂蛋白酶、蛋白质等物质代谢最为活跃而重要的器官。肝硬化早期无明显症状, 后期则出现一系列不同程度的门静脉高压和肝功能障碍, 直至出现上消化道出血、肝性脑病等并发症死亡。丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 是存在肝细胞中的胞浆酶, 胞浆酶在肝硬化时会出现增高的情况。草氨酸氨基转移酶 (AST) 存在细胞线粒体中, AST指标是肝细胞变形、坏死程度, 预后效果的标志。当细胞内AST指标增高, 则说明线粒体遭到破坏, 线粒体遭受破坏会导致肝细胞的变性、坏死。在肝硬化患者的血液中AST/ALT比值一般是用于表示肝细胞变性、坏死的程度。当肝细胞出现坏死时, 肝细胞会将AST以及ALT大量释放, 使其进入血液循环中, 血液中AST以及ALT量升高的程度与肝细胞受损害程度是成正比的[2]。从表中可以看出, 肝硬化组与健康组比较, 肝硬化患者的血液中含AST和ALT的量较多。AST与ALT的比值对慢性肝炎以及急性肝炎的鉴别诊断、确定治疗效果有明显的意义, 如果AST/ALT<1, 则说明是急性肝炎;如果AST/ALT≥2, 则说明是肝硬化。上表中的检测数据符合此结论, AST与ALT的比值越高, 说明肝损害的程度就越严重。

总胆红素 (TBIL) 的测量对于肝硬化患者的病程以及治疗效果具有特殊的意义, 在肝硬化患者血液中, 如果总胆红素 (TBIL) 水平明显升高, 则说明肝细胞被严重损害。TBIL量的升高与肝的损害程度呈正比, 也于病患的病程长度呈正比。

白蛋白 (ALB) 和球蛋白 (GLB) 的指标是反映肝脏合成蛋白的能力指标[3]。从表中的数据可以看出, 肝功能的损害越严重, 则其失偿期与代偿期肝脏的合成功能就下降得越严重, 肝脏合成白蛋白的数量就会越少, 这样就会导致白蛋白数量下降, 而球蛋白的数量升高, 致使A/G比值不平衡, 严重影响机体的代谢功能。ALB指标是与病人病情呈反比的, 如果在血液中白蛋白的指标低于20g/L, 则说明肝受到非常严重的损害。白蛋白是治疗效果最好的证明, 如果患者在接受治疗后白蛋白的指标出现回升, 则说明治疗起到了良好的效果。

综上所述, 血清中草氨酸氨基转移酶 (AST) 、丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 、球蛋白 (GLB) 、总胆红素 (TBIL) 、总胆汁酸 (TBA) 对鉴别肝功能损害程度具有重要作用, 其在血液中的数值越高, 说明肝功能贮备越差;而TP以及ALB则正好相反, TP以及ALB的数值越小, 说明肝功能储备越差。临床生化指标对于诊断以及治疗肝硬化都有特殊的意义, 临床医师应通过观察以及分析临床生化数据对患者采取合适的治疗方法。

参考文献

[1]阴斌霞, 王香玲, 赵丽华, 等.多项生化指标联合检测在肝脏疾病中的临床应用研究[J].诊断学理论与实践, 2007, 6 (6) :540-544.

[2]吴一波.多种生化指标联合检测在肝病诊断中的应用[J].医学理论与实践, 2010, 23 (3) :327-328.

1 材料与方法

1.1 试验动物

在重庆市某荣昌猪育种场选择2窝健康荣昌仔猪19头 (♂10头、♀9头) , 45日龄断奶, 断奶后饲喂本场配制的饲料, 在相同条件下按常规进行饲养管理, 自由采食、饮水。

1.2 仪器

全自动血细胞分析仪 (Sysmex XT 2000i) 、全自动生化分析仪 (OLYMPUS AU640) , 由重庆市荣昌县人民医院检验科提供。

1.3 血样的采集

分别于仔猪1, 2, 3, 4月龄采血, 采血前禁食12 h, 于8:00—10:00采血。每头猪前腔静脉采血7 mL, 2 mL血加入盛有肝素的抗凝管, 倒转8～10次, 用于测定生理指标;另5 mL血加入促凝管, 静置, 用于测定生化指标, 于11:00前送荣昌县人民医院血液检验科测定。

1.4 测定项目

采用全自动血细胞分析仪测定白细胞数 (WBC) 、红细胞数 (RBC) 、血红蛋白浓度 (HGB) 、血细胞比容 (HCT) 、红细胞平均体积 (MCV) 、平均红细胞血红蛋白含量 (MCH) 、平均红细胞血红蛋白浓度 (MCHC) 、红细胞分布宽度变异系数 (RDW-CV) 、血小板数 (PLT) 。采用全自动生化分析仪测定葡萄糖 (GLU) 、尿素 (BUN) 、肌酐 (CREA) 、尿酸 (UA) 、总胆固醇 (CHOL) 、总胆红素 (TBIL) 、三酰甘油 (TG) 含量和肌酸激酶 (CK) 、乳酸脱氢酶 (LDH) 、谷丙转氨酶 (ALT) 、谷草转氨酶 (AST, 计算ALT/AST) 、碱性磷酸酶 (ALP) 活性及总蛋白 (TP) 、白蛋白 (ALB) 、球蛋白[GLO, 计算白蛋白与球蛋白之比 (白球比) ]、钾 (K) 、钠 (Na) 、氯 (Cl) 、钙 (Ca) 、磷 (P) 、胆碱酯酶 (CHE) 、淀粉酶 (AMS) 含量。同时, 荣昌县人民医院血液检验科提供了以上项目人的参考值。

1.5 数据统计

平均值用于与国内部分猪种和人进行比较, 未进行显著性检验。其他试验数据采用SPSS11.5统计软件进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 荣昌猪血液生理指标测定结果 (见表1)

由表1可以看出:在性别间比较, 4月龄公猪白细胞数显著高于母猪 (P<0.05) , 其余指标差异不显著 (P>0.05) 。

在月龄间比较, 随着月龄的增加, 白细胞数呈增加的趋势;平均值与军牧1号猪[3]、莆田黑猪[4]、合作猪[5]、五指山猪[6]、广西巴马小型猪[7]相近, 高于贵州小型猪[7]和人[ (4.00～10.00) ×109/L]。红细胞数在3月龄后趋于稳定;平均值与军牧1号猪[3]、莆田黑猪[4]、合作猪[5]、五指山猪[6]、广西巴马小型猪[7]及贵州小型猪[7]相近, 高于人[ (3.90～5.90) ×1012/L]。血细胞比容在2月龄后趋于稳定;平均值接近军牧1号猪[3]、莆田黑猪[4]、合作猪[5]和人 (37.00%～52.00%) , 低于五指山猪[6]、广西巴马小型猪及贵州小型猪 [7]。红细胞平均体积在各月龄间差异不显著 (P>0.05) ;平均值接近五指山猪[6]、广西巴马小型猪[7]、军牧1号猪[3], 低于贵州小型猪[7]、莆田黑猪[4]和人 (80.00～98.00 fL) 。1月龄红细胞分布宽度变异系数最高, 2月龄后趋于稳定;平均值接近五指山猪[6], 高于广西巴马小型猪、贵州小型猪[7]和人 (10.00%～14.50%) 。4月龄母猪血红蛋白浓度极显著高于1～3月龄 (P<0.01) , 公猪在各月龄差异不显著 (P>0.05) ;平均值低于广西巴马小型猪和贵州小型猪[7]。1月龄平均红细胞血红蛋白浓度极显著低于2～4月龄 (P<0.01) , 2月龄后趋于稳定;平均值接近贵州小型猪[7]、莆田黑猪[4]、五指山猪[6]、广西巴马小型猪[7]、军牧1号猪[3]和人 (300～360 g/L) 。1月龄血小板数极显著高于2～4月龄 (P<0.01) , 2月龄后趋于稳定;平均值接近贵州小型猪[7]、莆田黑猪[4]、五指山猪[6]、广西巴马小型猪[7]、合作猪[5]、军牧1号猪[3], 高于人[ (100～300×109 /L) ]。

注:月龄间比较, 数据肩标A、B表示差异极显著 (P<0.01) , a、b表示差异显著 (P<0.05) ;性别间比较, 数据肩标c、d表示差异显著 (P<0.05) 。字母完全相同或无肩标表示差异不显著 (P>0.05) 。

2.2 荣昌猪血液有机质含量测定结果 (见表2)

注:月龄间比较, 数据肩标A、B表示差异极显著 (P<0.01) , a、b表示差异显著 (P<0.05) ;性别间比较, 数据肩标c、d表示性别间差异显著 (P<0.05) 。字母完全相同表示差异不显著 (P>0.05) 。

由表2可以看出:在性别间比较:2, 3, 4月龄公猪尿酸含量显著高于母猪 (P<0.05) , 其余指标差异不显著 (P>0.05) 。

在月龄间比较, 血糖含量, 1月龄显著或极显著高于2～4月龄 (P<0.05或P<0.01) , 2月龄后趋于稳定;平均值接近军牧1号猪[3]、莆田黑猪[4]、合作猪[5]、五指山猪[6]、广西巴马小型猪[7]、贵州小型猪[7]、长白猪[7]和人 (3.90～6.10 mmol/L) , 高于哥廷根小型猪[7]。尿素含量, 3月龄显著高于1, 2, 4月龄 (P<0.05) , 但2月龄后逐渐趋于稳定;平均值高于合作猪[5]、广西巴马小型猪及哥廷根小型猪[7], 接近军牧1号猪[3]、莆田黑猪[4]、五指山猪[5]、贵州小型猪[7]和人 (2.10～7.90 mmol/L) 。尿酸含量, 1月龄极显著高于2～4月龄 (P<0.01) ;平均值显著低于莆田黑猪[4]、合作猪[5]和人 (150～430 μmol/L) (P<0.05) 。肌酐含量, 在公猪1～4月龄间差异不显著 (P>0.05) , 4月龄母猪显著或极显著高于1～3月龄 (P<0.05或P<0.01) ;平均值显著低于哥廷根小型猪[7]、军牧1号猪[3]、莆田黑猪[4]、合作猪[5]、五指山猪[6]、广西巴马小型猪[7]、贵州小型猪[7] (P<0.05) , 在人的范围内 (35～124 μmol/L) 。总胆固醇含量, 1月龄显著或极显著高于2～4月龄 (P<0.05或P<0.01) , 2月龄后趋于稳定;平均值近似哥廷根小型猪[7]、军牧1号猪[3]、合作猪[5]、五指山猪[6]、广西巴马小型猪和贵州小型猪[7], 低于莆田黑猪[4]、长白猪[7]和人 (2.80～5.70 mmol/L) 。总胆红素的平均值极显著低于莆田黑猪[4]、合作猪[5]、广西巴马小型猪[7]、五指山猪[7]和人 (2.8～5.7 μmol/L) (P<0.01) 。

2.3 荣昌猪血液蛋白质和脂类含量测定结果 (见表3)

由表3可以看出:在性别间比较, 母猪2, 3, 4月龄三酰甘油含量高于公猪, 4月龄达到极显著水平 (P<0.01) ;其余指标差异不显著 (P>0.05) 。

在月龄间比较, 三酰甘油含量, 1月龄极显著高于2～4月龄 (P<0.01) , 2月龄后趋于稳定;平均值低于五指山猪[6]和巴马小型猪[7], 接近莆田黑猪[4]、贵州小型猪[7]、哥廷根小型猪[7]和人 (0.34～1.70 mmol/L) 。总蛋白含量, 3, 4月龄极显著高于1, 2月龄 (P<0.01) ;平均值接近广西巴马小型猪[7]、哥廷根小型猪[7]、莆田黑猪[4]、军牧1号猪[3]、合作猪和人 (60～85 g/L) , 低于贵州小型猪[7]、五指山猪[6]。白蛋白含量差异不显著 (P>0.05) ;平均值接近巴马小型猪[7]、哥廷根小型猪[7]、军牧1号猪[3]、合作猪[5]和人 (35～55 g/L) , 低于莆田黑猪[4]、贵州小型猪[7]、五指山猪[6]。球蛋白含量随着月龄的增加逐渐升高, 4月龄显著或极显著高于1～3月龄 (P<0.05或P<0.01) ;平均值接近莆田黑猪[4]、军牧1号猪[3]、合作猪[5]、贵州小型猪[7]、哥廷根小型猪[7]、五指山猪[6]、巴马小型猪[7]、长白猪[7]和人 (20～40 g/L) 。

注:月龄间比较, 数据肩标A、B表示差异极显著 (P<0.01) , a、b表示差异显著 (P<0.05) ;性别间比较C、D表示差异极显著 (P<0.01) , c、d表示差异显著 (P<0.05) 。字母完全相同或无肩标表示差异不显著 (P>0.05) 。

2.4 荣昌猪血液酶活性测定结果 (见表4)

注:月龄间比较, 数据肩标A、B表示差异极显著 (P<0.01) , a、b表示差异显著 (P<0.05) ;性别间比较, 数据肩标c、d表示差异显著 (P<0.05) 。字母完全相同或无肩标表示差异不显著 (P>0.05) 。

由表4可以看出:在性别间比较, 2, 3, 4月龄后公猪乳酸脱氢酶含量显著高于母猪 (P<0.05) , 3月龄公猪谷草转氨酶显著高于母猪 (P<0.05) , 其余指标差异不显著 (P>0.05) 。

在月龄间比较, 肌酸激酶含量, 母猪在不同月龄间差异不显著 (P>0.05) , 公猪4月龄显著低于3月龄 (P<0.05) ;平均值显著高于莆田黑猪[4]、合作猪[5]和人 (26～174 U/L) , 低于广西巴马小型猪[7]、哥廷根小型猪[7]和军牧1号猪[3], 接近贵州小型猪[7]。乳酸脱氢酶含量, 1月龄公猪显著低于2～4月龄 (P<0.05) , 2月龄后趋于稳定, 母猪在不同月龄间差异不显著 (P>0.05) ;平均值高于贵州小型猪[7]、五指山猪[6]、广西巴马小型猪[7]、人 (109～245 U/L) , 低于哥廷根小型猪[7], 接近莆田黑猪[4]和合作猪[5]。谷丙转氨酶含量, 3月龄显著或极显著高于2, 4月龄 (P<0.05或P<0.01) ;平均值接近莆田黑猪[4]、合作猪[5]、军牧1号猪[3]、广西巴马小型猪[7]、哥廷根小型猪[7]、贵州小型猪[7]、五指山猪[6]、长白猪[7]和人 (35～55 U/L) 。谷草转氨酶含量, 1月龄显著或极显著低于2～4月龄 (P<0.05或P<0.01) , 2月龄后趋于稳定;平均值高于莆田黑猪[4]、合作猪[5]、军牧1号猪[3]、广西巴马小型猪[7]、哥廷根小型猪[7]、贵州小型猪[7]、五指山猪[6]和人 (20～40 U/L) 。碱性磷酸酶含量, 1月龄显著或极显著高于2～4月龄 (P<0.05或P<0.01) , 2月龄后趋于稳定;平均值显著高于合作猪[5]、军牧1号猪[3]、广西巴马小型猪[7]、哥廷根小型猪[7]、贵州小型猪[7]、五指山猪[6]、长白猪[7]和人 (42～140 U/L) , 与莆田黑猪[4]接近。淀粉酶含量, 3月龄显著高于1, 2, 4月龄 (P<0.05) , 平均值高于合作猪[5]。胆碱酯酶含量, 3月龄极显著高于1, 2, 4月龄 (P<0.01) ;平均值高于滇南小耳猪 [8], 低于人 (3 892～11 500 U/L) 。

2.5 荣昌猪血液电解质含量测定结果 (见表5)

注:月龄间比较, 数据肩标A、B表示差异极显著 (P<0.01) , a、b表示差异显著 (P<0.05) ;性别间比较均无显著差异 (P>0.05) 。

由表5可以看出:在性别间比较, 荣昌猪血液中钾、钠、氯、钙、磷含量差异不显著 (P>0.05) 。

在月龄间比较, 钾、钠、氯、钙含量在1～4月龄间差异不显著 (P>0.05) ;磷含量, 1月龄极显著高于4月龄 (P<0.01) , 2月龄后趋于稳定。钾的平均值高于长白猪[7], 钠的平均值低于合作猪[5], 磷的平均值高于莆田黑猪[4]、合作猪[5]和人 (0.8～1.6 mmol/L) 。

3 小结与讨论

1) 本试验结果表明, 荣昌猪血液大多数生理生化指标在性别间无显著差异, 只有少数指标存在差异, 如公猪的白细胞数、尿酸含量及乳酸脱氢酶、谷草转氨酶活性显著显高于母猪, 母猪的三酰甘油含量显著高于公猪。随着月龄的增加, 有些指标发生变化, 但多数在2月龄后逐渐趋于稳定。通过与我国地方猪及人类比较, 荣昌猪血液生理生化指标的平均值基本上与我国地方猪相近, 有极少数指标有偏差, 而且很多指标都接近人的参考值范围。本试验检测的一部分指标的结果与廖均华等[1]、蒋茂成等[2]测定的荣昌猪部分血液生理生化指标比较, 通过单位换算后基本吻合。

2) 在测定中发现:荣昌猪总胆红素的含量很低, 有的猪测定结果为0, 其平均值极显著低于我国地方猪, 极显著低于人类;有的指标测定值忽高忽低, 波动较大, 如淀粉酶、胆碱酯酶活性等。这可能与荣昌猪的品种特性、代谢情况、年龄、性别、体重、饲养管理、营养供给、环境以及本次抽样数量、检测方法等方面有关, 以后将继续扩大样本数量, 改善猪的饲养条件, 改进测定方法, 以消减技术误差, 对测定结果继续完善, 并继续测定还未测定的指标, 使测定指标更齐全、结果更为准确。

摘要：为了分析荣昌猪血液生理生化指标, 试验选择2窝健康荣昌仔猪, 对其血液生理生化指标进行了测定, 并与国内部分地方猪种和人进行比较。结果表明:荣昌猪大多数血液生理生化指标在性别间无显著差异 (P>0.05) , 公猪的白细胞数、尿酸含量、乳酸脱氢酶活性、谷草转氨酶活性显著高于母猪 (P<0.05) , 母猪的三酰甘油含量显著高于公猪 (P<0.05) ;随着月龄的增加, 有些指标发生变化, 但多数在2月龄后逐渐趋于稳定;通过比较发现, 荣昌猪尿酸、肌酐含量显著低于国内多数地方猪种 (P<0.05) , 肌酸激酶和碱性磷酸酶活性显著高于国内多数地方猪种 (P<0.05) , 其余指标的平均值基本上在我国地方猪种正常值范围内, 多数指标都接近人的正常值范围。

关键词：荣昌猪,血液,生理生化指标

参考文献

[1]廖均华, 黄谷诚, 陈先达, 等.荣昌猪九项生理指标[J].四川畜牧兽医, 1984 (2) :15-18.

[2]蒋茂成, 罗治和, 罗永煌, 等.荣昌猪血液生化指标的测定[J].四川畜牧兽医, 1993 (3) :4-5.

[3]吴永魁, 李乾学, 孙博兴, 等.“军牧1号”断乳仔猪血液生理生化指标正常参考值[J].吉林畜牧兽医, 2009 (6) :7-9.

[4]邱金海.莆田黑猪血液生理生化指标测定[J].山地农业生物学报, 2009, 28 (4) :317-323.

[5]刘燕, 刘孟洲.合作猪血液生理生化指标特性的研究[J].中国畜牧兽医, 2007, 34 (7) :52-55.

[6]孙瑞萍, 王峰, 魏立民, 等.海南原产地五指山猪生理生化指标测定[A]//广州—东莞首届国际小型猪学术论坛, 2010:294-298.

[7]杨述林, 任红艳, 王恒, 等.3个中国实验用小型猪品种血液生化指标分析[J].中国畜牧兽医, 2007, 34 (4) :75-78.

一、材料与方法

1. 试验动物

宁夏某肉牛养殖场的育肥阉牛, 体重约600公斤, 24±2月龄。分群舍饲, 自由采食, 每日7:30和16:30各饲喂一次。每头每天的精料饲喂量为9公斤, 稻草饲喂量为2公斤, 自由饮水。所饲喂的精料和稻草的干物质 (DM) 、粗蛋白 (CP) 、粗脂肪 (EE) 、粗灰分 (Ash) 、中性洗涤纤维 (N D F) 、酸性洗涤纤维 (ADF) 、钙 (Ca) 和磷 (P) 等营养成分含量见表1。营养物质含量测定采用《饲料分析及饲料质量检测技术》的方法进行。

2. 试验方法

集中屠宰时, 取出肉牛肾脏, 逐个剖检, 观察有无肾结石, 并对各肉牛耳号进行记录、备案。屠宰前使用注射器对全场的肉牛进行尾静脉采血, 置于不加抗凝剂的10ml离心管中, 并用记号笔在离心管上标记耳号, 放于有冰袋的采样箱中, 迅速返回实验室。3000rpm离心10min以分离血清, 并置于-20°冰箱冷冻保存待测。使用Excel2007对数据进行统计分析, 所有数据采用X±SD表示。

二、试验结果与分析

1. 肉牛肾结石情况

牛肾为典型的多乳头肾, 结石大多聚集在个别肾乳头内部的肾盂处。肾结石大部分呈乳白色或淡黄色, 其中呈细小的砂粒状结石占大多数。有结石的肾乳头主要集中在牛肾的两个尖端处, 而中间部分的肾乳头几乎不存在结石。

2. 血液生化指标的测定

测定结果见表2, 23例结石组的牛血清的白蛋白 (A L B) 较参考值有明显提高, 球蛋白 (G L O) 较参考值降低, 从而造成白球比 (A/G) 明显上升。结石组血清的尿素氮 (BUN) 和血清钙 (Ca) 明显下降, 而血清磷 (P) 和血清镁 (Mg) 明显上升, 其他指标数据都处于正常的参数范围内。

三、讨论

肾结石的成因非常复杂, 但普遍认为是伴有泌尿器官病态条件下的全身性矿物质代谢紊乱的结果。饮水缺乏、维生素A缺乏和饲料钙磷比例失衡都是肾结石的主要诱因。合理的饲料钙磷之比应在 (1.5～2) ∶1之间, 这时钙和磷易被动物吸收。由表1可知, 本实验中肉牛所饲喂的精料含磷量高于含钙量, 属于高磷低钙日粮, 并且饲料的精粗比较高, 这些因素都容易导致体内的钙磷代谢紊乱, 从而导致肾结石的发生。

从表2的血液生化指标中, 可以看出血清磷和血清镁含量明显高于参考值, 而血清钙含量却偏低, 可确定高磷低钙饲料和血液生化指标的高磷低钙之间存在着相关性。血清磷和钙存在着拮抗作用, 血清的高磷会进一步降低血清钙含量。当血钙含量不足时, 镁可部分替代钙来维持离子平衡, 造成血镁含量升高。体内过高的磷会随着尿液排出体外, 在其他肾结石诱因的共同作用下极易形成磷酸铵镁结石。

在临床检验上, 通常把血清尿素氮 (B U N) 和血清肌酐 (G R E A) 作为评价肾脏机能的血清生化指标。通常肾组织损伤时, 血液尿素氮 (B U N) 和肌酐 (G R E A) 含量会上升。在本次测定中, 结石组的血液尿素氮 (BUN) 却相比参考值下降, 肌酐 (GREA) 的含量也只是属于正常范围的较高值。由此, 可得出结论, 肉牛患肾结石不代表肾组织就一定有损伤。笔者认为有以下两种原因。第一, 早期肾结石大多呈砂粒状, 因其体积较小故对肾盂的堵塞不明显, 不影响肾组织的生理功能, 因而不会造成肾组织损伤。第二, 牛肾是典型的多乳头肾, 个别肾乳头的结石对于肾整体生理功能的影响不明显, 在血液生化指标中还没有体现肾损伤。至于血液尿素氮相比参考值的异常下降, 可能与本实验饲料蛋白含量较低有关。

人们通常把血清中白蛋白 (ALB) 、球蛋白 (GLO) 、白球比 (A/G) 和碱性磷酸酶 (ALP) 含量作为肝脏机能检验的主要指标。当肝脏有炎症时, 会出现血清白蛋白含量下降, 球蛋白升高以及白球比的显著下降。但在本次血液生化指标测定中, 却出现白蛋白升高, 球蛋白下降及白球比升高。这种非病理性的肝脏功能指标异常, 很可能就是肾结石的特征信号。

1 材料与方法

1.1 材料

试验用贵州小型猪15头 (♀7、♂8) , 健康, 5～7岁, 贵阳中医学院实验动物研究所提供, 普通级环境, 饲料为贵州台农公司提供的配合颗粒料, 自动饮水器饮水。

检测用F820型半自动血细胞分析仪, SYSMEX公司生产;D360型全自动生化分析仪, 南京神州英诺华公司提供。

1.2 方法

采用速眠新和戊巴比妥钠复合麻醉法对贵州小型猪进行麻醉[1,2], 经前腔静脉采血7 mL;将5 mL置于速凝试管, 静置15 min, 离心, 吸取血清备检;将剩余2 mL置于抗凝管中备测血常规指标。

1.3 检测指标

血液生化指标:谷草转氨酶 (AST) 、谷丙转氨酶 (ALT) 、碱性磷酸酶 (ALP) 、总蛋白 (TP) 、白蛋白 (ALB) 、球蛋白 (GLB) 、白球比例 (A/G) 、总胆红素 (TBIL) 、直接胆红素 (DBIL) 、间接胆红素 (IBIL) 、尿素 (UREA) 、肌酐 (CREA-K) 、尿酸 (UA) 、葡萄糖 (GLU) 、三酰甘油 (TG) 、总胆固醇 (CHOL) 、高密度脂蛋白 (HDL-C) 、低密度脂蛋白 (LDL-C) 、乳酸脱氢酶 (LDH) 、淀粉酶 (AMY) 、乙肝表面抗原 (HBsAg) 、乙肝表面抗体 (HBsAb) 、乙肝e抗原 (HBeAg) 、乙肝e抗体 (HBEaAb) 、乙肝核心抗体 (HBcAb) 、丙肝抗体 (Ant-HCV) 。

血液生理指标:白细胞 (WBC) 计数, 淋巴细胞 (LYM) 比率, 中性细胞 (GRA) 比率, 淋巴细胞 (LYM) 计数, 中性细胞 (GRA) 计数, 红细胞 (RBC) 计数, 血红蛋白 (HGB) 、血小板 (PLT) 计数。

2 结果

2.1 血液生化指标检测结果 (见表1)

注:同行数据肩注*表示差异显著 (P<0.05) , **表示差异极显著 (P<0.01) 。

2.2 血液生理指标检测结果 (见表2)

注:同行数据肩注*表示差异显著 (P<0.05) , **表示差异极显著 (P<0.01) 。

3 讨论

血液生理生化指标是衡量动物健康标准及遗传稳定的指标, 也是临床疾病诊断的重要依据, 对科学研究有重要的参考价值, 血液生理生化数据库的建立及定期监测是在贵州小型猪的保种选育工作中种群生物学特性监测的重要指标之一。在培育贵州小型猪的早期, 甘世祥等[3]曾检测了不同年龄段的健康贵州小型猪血液生理生化指标, 迄今为止培育工作近30年, 已形成了稳定的封闭群。

年龄超过5岁的贵州小型猪表现被毛稀疏, 蛀齿增多或恒齿残缺, 体况下降。在大体解剖上表现出腹腔器官粘连, 公猪睾丸硬化、粘连等。猪的自然寿命是10～25年[4], 人工饲养条件下的家猪生存通常不超过4年, 在实验动物学方面也未见超过5岁以上小型猪的相关报道。作者对5岁以上的贵州小型猪进行血液生理、生化指标及形态学进行研究 (另文报道) , 发现此时的贵州小型猪已经进入老龄状态。

老龄贵州小型猪雌雄性别之间的血液生理、生化指标大部分无统计学差异, 雌性贵州小型猪谷草转氨酶、三酰甘油、血糖高于雄性, 差异显著 (P<0.05) ;低密度脂蛋白、淋巴细胞比率雌性高于雄性, 差异极显著 (P<0.01) ;白蛋白雄性高于雌性, 差异显著 (P<0.05) ;乙肝病毒表面抗原 (HBsAg) 和表面抗体 (抗HBs或HBsAb) 、e抗原 (HBeAg) 和 e抗体 (抗HBe或HBeAb) 、核心抗原 (HBcAg) 和核心抗体 (抗HBc或HBcAb) 以及丙型肝炎病毒抗体 (Ant-HCV) 均为阴性, 提示过去和现在均未感染过HBV和HCV。检测结果表明, 老龄贵州小型猪血液生理、生化指标稳定, 可用于药物非临床安全评价和生物医学研究。

参考文献

[1]吴曙光, 钱宁, 佘小明, 等.速眠新Ⅱ对幼龄贵州小型猪外科手术中的应用研究[J].实验动物科学与管理, 2006, 23 (4) :21-23.

[2]吴曙光, 钱宁, 田锟, 等.速眠新Ⅱ与戊巴比妥钠对实验用白香猪麻醉效果的观察[J].实验动物科学, 2007, 24 (2) :24-26.

[3]甘世祥, 冯济凤, 董菲络, 等.贵州小型猪——试验用小香猪[M].贵阳:贵州科技出版社, 1997:196.

1 材料与方法

1.1 试验动物

从广东省阳山县江英镇龙家管理区、岭下田心管理区和黄金镇小水管理区、大坪管理区等16户农户收集阳山鸡青年公鸡11只、青年母鸡90只, 共101只作为祖代鸡, 用来培育第2代阳山鸡。第1代阳山鸡产蛋而且产蛋量稳定后, 进行人工授精、孵化, 获得第2代阳山鸡144只, 其中公鸡104只, 母鸡40只。以第2代阳山鸡为试验动物。

1.2 饲养管理

收集和培育的阳山鸡采取编号笼养方式, 自由采食和饮水, 常规免疫, 自然光照。不同阶段的阳山鸡饲喂相应的全价饲料, 严格按照规程进行科学饲养。小鸡料、中鸡料、大鸡料和蛋鸡料均购自佛山市南海区狮山饲料厂。

1.3 血样的采集

随机取14周龄、平均体重为1.21 kg的健康阳山鸡28只, 其中公鸡13只、母鸡15只, 翅静脉采集血液4 mL (用肝素钠抗凝处理) , 2 h内送广东省医学实验动物中心进行血液生理生化指标的测定;另采集不抗凝血液2 mL, 分离血清进行蛋白质电泳试验。

1.4 测定项目

红细胞总数、血红蛋白浓度、血细胞比容、红细胞体积、红细胞血红蛋白含量、红细胞血红蛋白浓度、红细胞分布宽度、白细胞总数、中性粒细胞数量、淋巴细胞数量、单核细胞数量、嗜酸性粒细胞数量、嗜碱性粒细胞量、中性粒细胞比率、淋巴细胞比率、单核细胞比率、嗜酸性粒细胞比率、嗜碱性粒细胞比率、血小板数量, 采用光散射法 (用日本光电Mek-7222k全自动血细胞计数仪) 进行测定。

血清总胆固醇、三酰甘油, 采用终点比色法 (用意大利LOGOTECH公司的ECHO LCD全自动血液生化分析仪) 测定;血清白蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白含量, 采用醋酸纤维素薄膜电泳法 (用722型分光光度计在620 nm波长下) 测定OD值, 计算各蛋白组分的百分比。

1.5 数据处理

所有数据均采用SPSS17.0统计软件进行分析 。

2 结果与分析

2.1 阳山鸡血液红细胞生理指标 (见表1)

注:同行数据肩注字母相同表示差异不显著 (P>0.05) , 不同表示差异显著 (P<0.05) 。

由表1可知:公鸡红细胞体积、血红蛋白含量、红细胞分布宽度显著高于母鸡 (P<0.05) , 其他指标在性别之间无显著差异 (P>0.05) 。

2.2 阳山鸡血液白细胞生理指标 (见表2)

由表2可知:公鸡与母鸡的血液白细胞生理指标均无显著差异 (P>0.05) 。

2.3 阳山鸡血液中血小板数量、总胆固醇、三酰甘油含量 (见表3)

由表3可知:公鸡、母鸡的血小板数量无显著差异 (P>0.05) ;总胆固醇、三酰甘油含量均为母鸡显著高于公鸡 (P<0.05) 。

2.4 阳山鸡血清中各种蛋白质的含量 (见表4)

注:同行数据肩注字母相同表示差异不显著 (P>0.05) 。

注:同行数据肩注小写字母相同表示差异不显著 (P>0.05) , 不同表示差异显著 (P<0.05) 。

注:同行数据肩注小写字母相同表示差异不显著 (P>0.05) 。

由表4可知:在血清各种蛋白质组分比中, 公鸡与母鸡的白蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白 、γ球蛋白均无显著差异 (P>0.05) 。

3 讨论

3.1 性别对血液主要生理生化指标的影响

血液是构成有机体内环境的重要组成部分, 内环境的变化可能导致血液组分或性质发生特征性的变化, 因此, 血液生理生化指标能反应机体状况。检测阳山鸡的血液生理生化指标对研究其人工饲养、繁殖、生长代谢、抗病性、适应性等方面有着十分重要的意义。

对同一品种动物而言, 血液中各项生理指标可因性别、年龄、生理状态、营养水平以及外界环境的不同而存在一定的差异。阳山鸡公鸡的红细胞体积、红细胞血红蛋白含量和红细胞分布宽度显著高于母鸡, 提示公鸡输氧能力更强, 代谢更旺盛。血液中白细胞的主要功能是参与机体的免疫反应, 在白细胞的生理指标中, 中性粒细胞数量、淋巴细胞数量、单核细胞数量、嗜酸性粒细胞数量、嗜碱性粒细胞数量等各指标在公、母鸡中均无明显差异, 提示阳山鸡公鸡和母鸡在机体抵抗力方面无明显差异。

血小板在血栓形成与止血过程中起着重要的作用, 血小板数量的多少直接影响凝血效果。在本试验中, 阳山鸡公鸡与母鸡的血小板数量无明显差异, 提示在凝血效果上无性别差异。在血清生化指标中, 阳山鸡母鸡的总胆固醇、三酰甘油含量均显著高于公鸡。总胆固醇、三酰甘油是反映机体脂代谢的重要指标, 这提示阳山鸡母鸡的脂代谢要高于公鸡。

肝脏是合成血清蛋白的主要器官, 血清蛋白浓度高低可反映肝脏功能的变化。本试验结果表明, 阳山鸡公鸡与母鸡的血清各蛋白组分均无明显差异。

3.2与其他地方品种鸡进行比较

在阳山鸡血液的红细胞生理指标中, 红细胞总数少于兴义矮脚鸡、灰竹鸡以及褐马鸡, 而血红蛋白浓度、血细胞比容、红细胞体积、血红蛋白含量、血红蛋白浓度和红细胞分布宽度与上述3个品种基本一致[2,3,4]。而阳山鸡血液中白细胞总数高于上述3个品种, 且淋巴细胞的比率较高, 嗜碱性粒细胞比率和单核细胞数量相对较低, 而中性粒细胞、嗜酸性粒细胞含量及比率基本一致。

参考文献

[1]何丹林, 曾华, 罗庆斌, 等.纯种及杂交阳山鸡生长性能和羽毛生长的观测[J].养禽与禽病防治, 2007 (11) :10-12.

[2]王闯, 朱丽莉, 张福平, 等.兴义矮脚鸡血液主要生理指标的研究[J].贵州农业科学, 2009, 37 (11) :132-134.

[3]韩庆, 张彬, 夏维福, 等.笼养灰胸竹鸡血液生理生化指标的测定[J].经济动物学报, 2004, 8 (3) :148-150.