1、缩写：ATCC,美国模式菌种保藏所；CAMHB,调节过阳离子的Mueller-Hinton肉汤；FDA,美国食品和药品管理局；MHA,Mueller-Hinton琼脂；MIC,最低抑菌浓度；MRS,耐甲氧西林葡萄球菌；MRSA,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；MOD-SA,修饰的金黄色葡萄球菌；PBP,青霉素结合蛋白；PCR,聚合酶链反应；QC,质量控制；VRSA,耐万古霉素金黄色葡萄球菌；vanA,万古霉素耐药基因。BHI,脑心浸液；AST,抗菌药物敏感性试验；ATCC,美国模式菌种保藏所；BSC,生物安全柜；BSL-2,二级生物安全水平；BSL-3,三级生物安全水平；CAMHB,调节过阳离子的M

2、uellerHinton肉汤；CDC,疾病预防控制中心；CFU,菌落形成单位；LHB,溶解马血；MHA,Mueller-Hinton琼脂；MIC,最低抑菌浓度；QC,质量控制。抑菌圈直径和MIC解释标准铜绿假单胞菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基：纸片扩散法：MHA肉汤稀释法：CAMHB琼脂稀释法：MHA接种物：生长法或直接菌落悬液法，相当于0.5麦氏标准孵育：35±2C;空气环境纸片扩散法：16-18h稀释法：16-20h(1)对于纸片扩散法，直彳仝150mm平板最大放置12只，直彳仝100mm平板放置5只进行试验(见M02第9.2节)。测量抑菌圈直径(用肉眼判读)，包括纸

3、片直径。保持平板在反射光照明的、非反射黑的背景上方几英寸，肉眼观察无明显生长的地区作为抑菌圈边缘。在抑菌圈边缘借助放大镜才能观察到的微小菌落生长可忽略不计。(2)用纸片扩散法和稀释法能可靠地测定分离于囊性纤维化病人的铜绿假单胞菌的敏感性，但在作为敏感结果报告前，应将孵育时间延长至24小时。(3)所有抗菌药物在延长治疗期间可致铜绿假单胞菌发生耐药。因此，初次分离的敏感菌株在开始治疗后34不动杆菌属抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基：纸片扩散法：MHA肉汤稀释法：CAMHB琼脂稀释法：MHA接种物：生长法或直接菌落悬液法，相当于0.5麦氏标准孵育：3542°C;空气环境；20-24

4、h,所有方法由于培养基中可能存在拮抗剂，甲氧苇咤和磺胺类药物抑菌圈内可允许出现菌株轻微生长；因此，在测量抑菌圈直径时可忽视轻微生长(20%或较少的菌苔)而测量较明显抑制的边缘。(2)对四环素敏感的菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。然而，某些对四环素中介或耐药的菌株可以对多西环素或米诺环素或二者敏感。洋葱伯克霍尔德菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基：纸片扩散法：MHA肉汤稀释法：CAMHB琼脂稀释法：MHA接种物：生长法或直接菌落悬液法，相当于0.5麦氏标准孵育：35超。C;空气环境；所有方法，20-24h嗜麦芽窄食单胞菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基：纸片扩散法：MHA肉

5、汤稀释法：CAMHB琼脂稀释法：MHA接种物：生长法或直接菌落悬液法，相当于0.5麦氏标准孵育：35以工;空气环境，所有方法，20-24h由于培养基中可能存在拮抗剂，甲氧苇咤和磺胺类药物抑菌圈内可允许出现菌株轻微生长；因此，在测量抑菌圈直径时可忽视轻微生长（20%或较少的菌苔）而测量较明显抑制的边缘。氯霉素：分离于泌尿道菌株不常规报告。其他非-肠杆菌科细菌MIC解释标准（围/mL）葡萄球菌属抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基：纸片扩散法：MHA肉汤稀释法：CAMHB;CAMHB+2%NaCl用于苯座西林、甲氧西林和奈夫西林；CAMHB补充50闻/mL钙用于达托霉素琼脂稀释法：MHA;MH

6、A+2%NaCl用于苯座西林、甲氧西林和奈夫西林；琼脂稀释测试达托霉素还未被批准接种物：直接菌落悬液法，相当于0.5麦氏标准孵育：35价C;空气环境纸片扩散法：16-18h;24h（凝固酶阴性葡萄球菌与头抱西丁）稀释法：16-20h所有方法：苯唾西林、甲氧西林、奈夫西林和万古霉素需24h试验温度超过35°C可能检测不出MRS（1）对于纸片扩散法，直彳仝150mm平板最大放置12只纸片，直彳仝100mm平板放置5只进行试验（见M02第9.2节）。测量抑菌环直径（用肉眼判读），包括纸片直径。保持平板在反射光照明的、非反射黑的背景上方几英寸，除外利奈座胺、苯座西林、万古霉素应用透射光阅读（

7、平板正对光源）。肉眼观察无明显生长的地区作为抑菌圈边缘。在抑菌圈边缘借助放大镜才能观察到的微小菌落生长可忽略不计。由于培养基中可能存在拮抗剂，甲氧苇咤和磺胺类药物抑菌环内可允许出现菌株轻微生长；因此，在测量抑菌环直径时可忽视轻微生长（20%或较少的菌苔）而测量较明显抑制的边缘。在抑菌环内任何可辨别的菌落生长提示苯座西林、利奈座胺或万古霉素耐药。（2）过去，将对青霉素酶稳定的青霉素类（见术语表I）耐药称为“耐甲氧西林”或“耐苯座西林”，MRSAs是指表达mecA或具有另一种甲氧西林耐药机制，如青霉素结合蛋白与苯座西林的亲和力改变（修饰的金黄色葡萄球菌MOD-SA菌株）的金黄色葡萄球菌。（3）对于

8、耐苯座西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌（MRS）,被认为对其它县内酰胺类药物，即，青霉素类、P-内酰胺/R内酰胺酶抑制剂复合物，头抱类（新的“具有抗-MRSA活性的头抱菌素”例外）和碳青霉烯类等是耐药。这是因为大多数文献报道了MRS（4）在大部分葡萄球菌中，苯座西林耐药是由mecA基因介导，此基因编码青霉素结合蛋白2a（PBP2a,也称为PBP2'）o测试分离菌株mecA或PBP2a阳性应报告苯座西林耐药。通过苯座西林MIC、头抱西丁MIC或头抱西丁纸片法测试分离菌株为耐药，应报告苯座西林耐药。非mecA介导的耐药机制较罕见，包括新的mecA同系物mecC1。具有mecC菌株的头

9、抱西丁和/或苯座西林MICs典型地落在耐药范围；通过直接检测mecA或PBP2a不能检测出mecC介导的药。（5）由于对常规用于治疗急性、无并发症的泌尿道感染的抗菌药物（如，吠喃妥因、甲氧苇咤璇胺甲恶座或一种氟唾诺酮）在尿液中可达到浓度的治疗反应是敏感的，因此，不建议对尿液中分离的腐生葡萄球菌进行常规试验。（6）对于某些细菌/抗菌药物组合，尚不存在或罕见耐药菌株，因此，除了“敏感”以外没有标明任何其他药敏类型。如果菌株的结果提示“非敏感”，应确证菌株鉴定和抗菌药物敏感性试验结果。（见附录A）o（7）6内酰胺酶、苯哇西林耐药性、使用头抱西丁检测mecA-介导的苯唾西林耐药性、万古霉素敏感性减低、

10、诱导型克林霉素耐药和高水平莫匹罗星耐药（仅金黄色葡萄球菌）等筛选试验，金黄色葡萄球菌查阅表2c补充表1和2,凝固酶阴性葡萄球菌查阅表2c补充表3。另外，使用头抱西丁预报mecA介导的苯座西林耐药性的进一步解释参见M07-A9第12青霉素酶不稳定青霉素类（8）青霉素敏感葡萄球菌也对葡萄球菌感染有临床疗效的其他伊内酰胺类药物敏感。青霉素耐药葡萄球菌对青霉素酶不稳定青霉素耐药，包括氨节西林、阿莫西林、阿洛西林、竣节西林、美洛西林、哌拉西林和替卡西林。（9）青霉素可被用于测试葡萄球菌对所有青霉素酶不稳定青霉素类的敏感性。青霉素耐药葡萄球菌产生片内酰胺酶。当青霉素对葡萄球菌分离株MIC*0.12ug/m

11、L抑菌圈直径。29mm在报告青霉素结果为敏感前，应对葡萄球菌执行3内酰胺酶试验。罕见葡萄球菌含p内酰胺酶基因而B内酰胺酶试验结果为阴性。因此，对需青霉素治疗的严重感染，从相同患者随后分离的所有菌株，实验室应测定青霉素MIC和执行诱导的内酰胺酶试验。也可考虑用PCR测试分离菌株blaZ日内酰胺酶基因。见表2c后的表2c补充表1和3（10）苯隆西林耐药葡萄球菌应报告对青霉素耐药或不报告。青霉素酶稳定青霉素类（11）苯嘎西林（或头抱西丁）结果可应用于其他青霉素酶稳定青霉素类（邻氯西林、双氯西林、氟氯西林、甲氧西林和蔡夫西林）。具有确切临床疗效的抗菌药物，考虑感染部位和适当的剂量，苯睡西林（头抱西丁）

12、敏感葡萄球菌可考虑对下列抗菌药物也敏感：肉内酰胺/B内酰胺酶抑制剂复合物（阿莫西林-克拉维酸、氨节西林-舒巴坦、哌拉西林-他嘎巴坦、替卡西林-克拉维酸）；口服头抱烯类（头抱克罗、头抱地尼、头抱泊肠、头抱丙烯、头抱吠辛、氯碳头抱）；注射用头胞烯类包括I、II、III和IV代头抱菌素（头抱孟多、头抱嘎咻、头抱叱肠、头抱美嘎、头抱尼西、头抱哌酮、头抱曝肠、头抱替坦、头抱嘎肠、头抱曲松、头抱吠辛、头抱曝吩、头抱洛林、拉氧头抱）；和碳青霉烯（多利培南、厄他培南、亚胺培南、美罗培南）。除了新的具有抗MRSA活性的头抱菌素外，耐苯嘎西林葡萄球菌对目前所有白内酰胺类药物耐药。因此，对各种R内酰胺类抗菌药物敏感

13、或耐药结果，可以通过只检测青霉素和头抱西丁或苯嘎西林而推测得到。除不建议常规测试其他P-内酰胺类药物，具有抗-MRSA活性药物除外。见注释（4）。苯隆西林用于金黄色葡萄球菌和路登葡萄球菌（12）苯嘎西林纸片试验不可靠，当使用头抱西丁作为替代试验报告苯嘎西林纸片试验结果时见头抱西丁和注释（13）。（13）头抱西丁可被用作苯嘎西林的替代品；r根据头抱西丁结果来报告苯嘎西林敏感或耐药。（14）如果用头抱西丁和苯睡西林测试金黄色葡萄球菌或路登葡萄球菌，二种药物中有任一结果为耐药，则应报告受试菌株对苯睡西林耐药。苯睡西林用于除路登葡萄球菌外的凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS）（15）对于某些CoNS,由于某

14、些非表皮葡萄球菌苯嘎西林MIC为0.52ug/ml而缺乏me（A基因，因此，苯嘎西林MIC解释标准可能高估了耐药性。除表皮葡萄球菌外，对于苯嘎西林MIC为0.52ug/mlCoNSn起的严重感染，适合于测试分离菌株me(A基因或PBP2a或头抱西丁纸片扩散法敏感性。.万古霉素用于金黄色葡萄球菌。(18)测定所有葡萄球菌分离株对万古霉素敏感性应执行MIC试验。纸片扩散法既不能区别万古霉素敏感与中介金黄色葡萄球菌，也不能区分万古霉素敏感、中介和耐药凝固酶阴性葡萄球菌，对所有分离菌株给出相似大小抑菌圈。(19)除了下述情况外，葡萄球菌纸片扩散法抑菌圈直径大小与万古霉素MIC不存在相关性。30闻万古霉

15、素纸片试验可检测含vanA基因的万古霉素耐药金黄色葡萄球菌(VRSA)。上述菌株在纸片周围表现无抑菌圈(直彳5=6mm)。应确证无抑菌圈分离菌的鉴定结果。对未测定万古霉素MIC,而万古霉素抑菌圈直径>7mm葡萄球菌分离株，不能报告其对万古霉素敏感。(20)检测到万古霉素MIC>8国/mL的任何金黄色葡萄球菌，应送到参考实验室。见附录A。(VRSA)耐万古霉素金黄色葡萄球菌(21)检测到万古霉素MIC至32的/mL的任何凝固酶阴性葡萄球菌，应送到参考实验室。(23)分离于呼吸道的菌株不报告达托霉素结果。(24)对试验敏感的葡萄球菌，可使用氨基糖甘类与试验敏感的具有活性的其他药物一起进

16、行联合。大环内酯类(25)对泌尿道分离的菌株不常规报告。四环素类(26)对四环素敏感的菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。然而，某些对四环素中介或耐药菌株可对多西环素、米诺环素或二者敏感。氟唾诺酮类(27)用唾诺酮类治疗葡萄球菌引起的感染，在延长治疗期间，葡萄球菌敏感株可发展为耐药株。因此，起初敏感菌株在开始治疗后34天内可发展为耐药株。应对重复分离菌株进行敏试验。(29)诱导型克林霉素耐药性可用D-抑菌圈纸片扩散试验和使用单一孔含红霉素和克林霉素的肉汤稀释法进行检测。当前建议见表2c补充表2和3,以及M02-A11第12节和M07-A9第13节总建议。(30)磺胺异嗯睡可代表当前使用的任何

17、磺胺药制剂。(31) Rx:利福平不能单独用于抗菌治疗。*2c补充衰1.用于衰1C产内融胺，蕈甚西林耐药和使用具疱西丁检，ewM介导荤理西林耐药金黄色葡萄球苜蛆的箫选试验4内田蕈西苏用头庖E丁检，仙介寻蕈嚏百尊藉假生物盥布黄色聋苗E*泡有有由MICd与SUH14ML空脚两圈H精之热刖工色狎色的品理有"川路金劭每球苗卜青毒素也以或插后图直村>24mnt至黄色甘曹理菊去黄色H需尊拘如腾也勤聘邛苗旅片犷做法«吊邙索仲申圈.早值试制Nimcefi*试聆踪聒翰亭泣BI片扩散接肉苗微量幡科斌培养演MHANA舍MHAMHACAMHB抗衡痴制度10U者卑塞植片NA6|1脑力1.革噬曲

18、样30Px头面RiJpg/mL头袍的J建盟标格凯升犷触法灌才生及(呷.IRMHAA血平度忖声泰山为祖龙断片周国抑的殿边峰的塔张物卜直接苗活屈曲暖时也$左氏浊憧.佗阳卬L推杵耳域以菌油，在平阪上渝成口桂KM$ee应点+替代方法.HI用杭髓皿曲液漫底奘阴大小W.也.或谓同分上一区遇照为帝根片犷眼法注胤神布的点海怖打法”条忤或：空气环境空设L3JWC：空气环境(KI璃度射于WT不施检出MRSA)n.is-T：空气环携一t试曲温度岛F3，七不能；试会温咙岛于“口亡不能构出MRSA)耳才忖阊16-IShmtmwftri试城需1h或接产岛说明书近疗24h；用透射光利注占16-20h案2c样充表1fflWI

19、ETWI介莘星Mill*MX皎可谓断搏前置地缥C卡里胖快内H快尚押潮阳动量广薛胃样。餐内就MMIH性AitriM1忖口-试验：从黄色堂底H或凿打色=为内鼠俄前即也用透时光灯捆唐西1个前清盟件花派的鞭情T代>1个偏前=年”西幅斛眄<21mEn."jai«rARJft>22mmHierA用性>4-iwecARJ性£4pg/mL-McA时性P内帆或端邮杵弋中尊靖科占生杀.，推.检率*M仄存鼻聚川西M荒畔冷林寄中讨曲t所市内收阳去箝物蚪ft,其他P内蛀眩炎酊病应隹批去制眄或小报方尖曲行I帏川？0斌mn*八*苏畔西林IH药的If代岛*mA用校芾鹿应以

20、3甘於用西阿安布西J闺的士If他命内陆嵌义国物日被挨言叨用或4整行111f-Y她北E“A介手的*四库时拓机*，mA相性他呆阱府味WE是iHMn谢也.w抠,工酢内杵川科椎算W务黄色匍甸季面星亡广2例”*<片挂I.K台出色的苗肆曲ATCV*2MSfflfl育东某1«曲Nh通华试嗯*1性1地望情鞫一,彳抨。,旭用朴先阜J里修CJ：ATCC*稣试或ffirhiii”忸+-ft喻门金黄色将库商ATCC'JMD-fttf1”表金黄色用耳殍国ATtE”Q却mjnka转门mk-a眺性a-4w加uQ*-vst'叠Kft""AILC*mu-S住i"胃*

21、M抵寝厂常诳卜金黄色UiI1他二上1mm|i金黄色kTC.RttIMC>4加LJa.检测金黄色葡萄球菌是否产生&内酰胺酶，青霉素纸片扩散法抑菌圈-边缘试验比nitrocefin-试验敏感。假如实验室只使用一种检验伊内酰胺酶试验，则推荐青霉素抑菌圈-边缘试验。然而，某些实验室可选择先执行nitrocefin-试验，如果此试验阳性，报告为内酰胺酶结果阳性（或青霉素耐药）。假如nitrocefin试验是阴性，且必须用青霉素治疗的情况下（如，心内膜炎），在报告青霉素为敏感前，应执行青霉素抑菌圈-边缘试验。b.3个实验室共研究测试了168株临床分离的路登葡萄球菌，结果表明使用CLSI参考肉

22、汤微量稀释法（MIC法）和纸片扩散法测试为耐药菌株均产生,内酰胺酶，并且所有菌株是诱导nitrocefin试验为内酰胺酶阳性。青霉素纸片扩散法抑菌圈-边缘试验相比诱导nitrocefin试验要差些，因此，不用于路登葡萄球菌3内酰胺酶的检测。假如实验室使用的是一种非CLSI推荐的参考方法，并且不确定这种方法是否能可靠检出路登葡萄球菌对青霉素耐药性，则在报告分离菌株为青霉素敏感前，实验室应执行诱导nitrocefin衰新补充衰之用于我就万古景NIC阳濡导型克林鼻素留苗和高水平其四晕星耐药金黄色球组的箫选富藐van万古X】举WeL育水平睡，生一会黄包能物博的出再前耐马利克畀煮败博翼中介的金西色中金膝

23、胸相路会西球t金黄色帝喃睡他IU趣琉购福斡征地片寸盘法in拌芒试3）阳的潮量将祥隗肉济武同料样法ftSHHI理肝MBA风卅十100峥的.山<!AMHBMHACAMHB6pgfuiL”为森症H川红需富城片和工.兑林需案氟片向距施用T中却4iirnlfi：窜加立&pSmL克体而意力叫卬克兀制品蚯片皆朝一转四罗星”2WLKM»*«且找国箫息酒过衣町D.S曼氏性度*性川徽n吸管叫m帕也前裱点井于垣篇T国灰面.瞥R“处，用梯就以他派.挤去多交匿液.把甲款上探成直径14-15mm风点迪自留分区地制混栈部避就W值的1损片F前法承苏晶灌播种中板花避黑舟津的肉汤蒲母怖裸徒遵照对

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25、【卜抑偏Bl任何生长=谓牙克"再拿用化阳性无生长谓导克林“拿耐用阴性用透射光仔掴检心抑倒留内行古X«t生长无抻曲际=商生平央兀9HMK行抻前*高水平失兀罗星耐的含单一256/SnL试验小生长=俞小平央兀罗星耐药无生长,*高水平臾匹零星胡自嫌eat报告在BHI万古U宗篇选球的平板上生长的金黄色售球禽.快川一认的MIC方法检费万古今拿MIC在上送行试验，不能可靠检泅万占街案中介金黄色他豺球前.某些万古*KM1C»4.秋2*+将不生长.询导克林毒案耐药试验用性.应报合分离料“克林禽素耐药在报告中可加入“根期谤克林察索前用试验,推测他菌株对克林等拿耐用注徉无和闰阳簿夙报也

26、为高水平快匹罗能用晶“冲南IB菌殊报告为善高水平笑网罗星耐用256Mg/mL认验孔生长猴告为高水平英匹罗能刷药2S6pg/mLiXa/l不生长报告为畲高水平莫匹罗KMffoc推荐-朝«*KUiWATCC*29212-依猿令苗但1奇域质ATCC*”923阳F常短缸，窗和克松|拿很片法QC金黄色韵防球造ATCCS292B或金黄色!向球的ATCC*BAA-976-*生长3>K0.«CUaATCC，25923(20Q-|ig纸片LAPjm獐曲Uh校M3*mm)3>B0«fiUr»ATCC*292”-皿伊阴性(MIC0.064)3pg/mL>.爽

27、的球倒人”:厂29212-mupWft(MIC16-128pg/mL)QC*-M*aATCCSli-tff兄衰3A*充QC株的应用金K色MWATCC*BAA-977-生长金黄色卿1ATCC*BAA-l7tS-a"A阳性，动m）金黄色“卿IATCCBAA-ntg-zpA阳性(在256-jiWrnl孔生长)衰2c补充豪3.用于豪2c产作内»、使用头相西丁检测也"4介导莘”西林耐药和谈导克林冬索耐药凝固阴性球（除路叠球外）的代选试收传选试验内MSB用头fll西丁检eaA介导荤晚西林时为诱导量克林索，药京生青霉素MICsf0.12Mg/mL或抑的圈口侬29mmCoNSBC

28、oNS1红霉案耐药和克林霉素成第缆中介的CoNS4试险方法Nitrocdin试脸锻片犷散法抵片扩散法（力抑茜网试验）肉汤做量稀齐法培养茶NAM11AMHA或用于MiC试验的平板CAMHB筑药物浓度NA30.pg头华西r簸片B|ig红有素和2叩8克环莅索纸片间距15-26mm在同代内加4pg/mL力毒素和0.5vg/mL克林布索诱导生长（即.取在MHA或平板Bfln61*hk；»务累或头也西丁纸片周用抑的WI边壕的珞养物）遵照标准抵片旷®（法遵照标准抵片扩散法或浓我液接种平板遵照标准肉汤危55格料法%肓条件空温33-35°C：空气环境（试睢温度岛于35P不能检出MR

29、S）3S空气环境35±2*C：空气环境wwitmNitroccftn试脸倚lh或按产品说明书进行24h（假如I8h后即表现酎色则可以报由）I6-I8h18-24h姑果Nitrocdin试脸：从黄色变成缸或给红色仇内版胺版阳性<24mm-mfcA阳性s>25mm/furA阴性。打得索相如倒抑菌网边缘出现被平”（称作d抑嬴用）诱号克林毒泰耐药阳性即使无D抑两网出现，在克林玲素纸片周围抑俏网内在陆次雾状生K,克林霉案耐药任何生长谓号克林哥索酎为阳性无生长诱导克林百素用的阴性用头虚或丁拗V介导荤嚏国林一药前导。克环罐药过方兴KflTEe,由试验噩片扩期法忖片批他油国W选扇稀秫法遂

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32、.5麦氏标准孵育：35+2°C;空气环境纸片扩散法：16-18h稀释法：16-20h所有方法：测试万古霉素需24h纸片扩散法，直彳仝150-mm平板最大放置12只纸片，直彳仝100-mm平板放置5只纸片（见M02第9.2节）。测量抑菌圈直径（用肉眼判读），包括纸片直径。保持平板在反射光照明、非反射黑的背景上方几英寸，但万古霉素需用透射光阅读（平板正对光源），肉眼观察无明显可见生长的地区作为抑菌圈边缘。在抑菌圈边缘借助放大镜才能观察到的微小菌落生长可忽略不计。在抑菌圈内任何可辨别的菌落生长提示万古霉素耐药。（2）警告：对于肠球菌属，头抱菌素、氨基糖甘类（除外高水平耐药筛选卜克林霉素和复

33、方新诺明可以在体外显示活性但临床上治疗无效，因此，对于分离菌株这些药物不应报告为敏感。（3）应用高水平的氨基糖甘类（庆大霉素和链霉素）筛选试验，能够预测氨苇西林、青霉素或万古霉素与一种氨基糖甘类抗生素之间的协同效应。其它的氨基糖普类不需进行测试，因为它们对肠球菌的活性并不优于庆大霉素和链霉素。（4）对于某些微生物/抗菌药物组合，尚不存在或罕见耐药株，因此，除了“敏感”以外没有标明任何其他类型。如果菌株的结果提示“非敏感”，应确证菌株鉴定和抗菌药物敏感性试验结果（见附录A）o氨苇西林是氨苇西林和阿莫西林的代表药。氨苇西林的结果可用于预报不产3内酰胺酶的肠球菌对阿莫西林/克拉维酸、氨苇西林/舒巴坦

34、、哌拉西林、哌拉西林/他座巴坦敏感性。假如菌株被确认为粪肠球菌，氨节西林敏感性能用于预报对亚胺培南的敏感性。（6）对青霉素敏感非产&内酰胺酶肠球菌可预报其对氨苇西林、阿莫西林、氨苇西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林和哌拉西林/他唾巴坦敏感。然而，对氨节西林敏感肠球菌不能推定其对青霉素敏感。假如需要青霉素结果，必须对青霉素进行试验。（7）Rx:对严重的肠球菌感染，如心内膜炎，需要氨苇西林、青霉素或万古霉素（敏感株）加一种氨基糖普类药物进行联合治疗，除非证明其对庆大霉素和链霉素高水平耐药，上述药物联合对肠球菌可起到协同杀菌效果。（8）在肠球菌中，因产日内酰胺酶导致的对青霉素或氨士西

35、林耐药较少报道。用常规纸片法或稀释法不能可靠检测出因产日内酰胺酶而致青霉素或氨苇西林耐药，但可使用直接的头抱硝曝吩舁内酰胺酶试验进行检测。由于罕见日内酰胺酶阳性肠球菌，常规不需要做此试验，但可用于选择性病例。及内酰胺酶试验阳性预报菌株对青霉素、氨基和月尿基青霉素耐药（见术语表I）。万古霉素（9）当测试肠球菌对万古霉素敏感性时，为准确检测耐药性，应将平板孵育24ho使用透射光检测抑菌圈；在抑菌圈内出现雾状或任何生长表示耐药。具中介抑菌圈菌株应根据CLSI文件M07-A9描述进行MIC试验。对万古霉素MICs8-16内/mL菌株，执行生化试验来鉴别表2D后的表2D补充表1中“万古霉素耐药”栏下列出

36、的菌种。（10）分离于呼吸道的菌株不报告达托霉素结果。红霉素（11）分离于泌尿道菌株不常规报告。四环素类（12）对四环素敏感菌株也被认为对多西环素和米诺环素敏感，但是，对四环素中介或耐药的某些株可以对多西环素或米诺环素或二者敏感。（14） Rx:利福平不能单独用于抗菌治疗。.磷霉素（15）仅用于泌尿道分离的粪肠球菌。（16）认可的MIC试验方法是琼脂稀释法。琼脂培养基中应补充25（!g/ml6-磷酸葡萄糖。不能使用肉汤稀释法。（17）200-他磷霉素纸片中含50内6磷酸葡萄糖。瞿3口补充款L用于靠2D高水平始奥耐药tHLAK涮万吉康耐丽号球附黄旭庆大*hlahUS*HLAH万古！（V”,士,阳

37、WnL域H犷依法幕mu卸法断将犷抹由漏看鼻法欢鼾韩陆法卑脂苗脚法H«r内语MIHAhht肉话BH1BMHur琼帝1啊.虞人毒晶准所支KjK500muAuL成人喜新5»idMID00+而I.ttVKKKOaUAnL万古京畜fruftTmL蔻板林依喙片/靠法19aH他伸浦用陆法WpLdS4：氏注说旧轻点畅在fM*jfllfl斥率图片时法避肘怅青的萧味H征iouLfk,麦氏我慢m阜检占计#:甲画承立1，而皿仆.3夏氏立概懦悬液内件住¥亚庭.支机诧的状户圈入的茂中里IM+西后在履面上方播起想:学的两裱较平帆上潮141，皿理五曲曲&国oz工astTT,至弋坏良ist

38、2-r.LI境”一，,二”也=,尸'：对城15±2T-,左，耳履”型AC空气瘁生33NT,中阡<肓时h24h：41:工hiRiA"h坳星.曹或时自2mh幅kDg24h用速，字墟*f育|2411.梁后出西=耐利17-flimu=干*电iMIC用美性工RhBSW产岁eLS=<5D0M/mL任何快忙=耐招>|个fflh£=用药&1mm=耐药；"*m0=不11定1>l<JITUT1F城号L*相景th而Ife、=/，.,”“：1I因M>匚上，川_”：鸟,EFM生食=耐药>1个精湛=师曷>1个*箫=懵1

39、万占本耐药用荷，）什剧1*融不含成柄在（如.百”*和Ji占'H»幽淳;。柞固于胞Q弁医.N1H也足岫号的田种（制-气节曲网.有茶率加力A芭聿，值外出提粉H作用.加里酰片个发淡X小事定1快h班喟鹏肝区出浦揖矫M祺强L需证.着万黑和目力试立及色京产生将由岫尸区别”占京演割性耐莉1付LEXfURw固柱W*.Fflwfh牌如毫阳粉球窗卸粕黄崎单背在川占餐*鼻通T就上裁pfl-K-与耳他IdE曲相t匕司眄特例超血地离联球前不占苏率MICb-1巾uniL1中介N忸用f惠幽般Mn的蛆万古京附苗KUEMuVRL'l.医大宣I1LAR*HLAR万吉鼻青刈匚“国iMflLQT置*Airr

40、"贵*朗曲h21工_幽考2MI.I-WLBHWifftATCT*2?ffl2l2：il4-2Dmm我瞬仪商atBATTC*29212Jftg*崎耳酬arcLa:h-ft冉MWVaTCC1JWHOCC-以醇-urn»n1丁丁unsw-hwmuntire'qjw-Bis府1方,LCr玉M用咒用件餐工而：BHI.EIL.号串午为莅时角MHA.M«lk»EliniiXlSIfiMK.虹押西常.魔：UC.流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基：纸片扩散法：嗜血杆菌试验培养基（HTM）肉汤稀释法：HTM肉汤接种物：直接菌落悬液法

41、：相当于0.5麦氏标准，从孵育过液(20-24h更适宜)巧克力平板上挑取菌落进行制备见注释孵育：35+2°C纸片扩散法：5%CO2；16-18h肉汤稀释法：空气环境；20-24h(1)此表中使用的嗜血杆菌仅包括流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌。其他嗜血杆菌试验和报告建议见CLSI文件M45。0.5McFarland菌悬液近似14X108CFU/mL。由于高接种物浓度可致某些3内酰胺类药物出现假耐药结果，尤其试验产3内酰胺酶流感嗜血杆菌，建议使用者仔细练习制备菌悬液。(3)对于纸扩散法，直径150-mm平板最大放置9只纸片，直径100-mm平板放置4只纸片进行试验。测量抑菌圈直径(用肉眼判

42、读)，包括纸片直径。保持平板在反射光照明、非反射黑的背景上方几英寸。肉眼观察无明显可见生长的地区作为抑菌环边缘。在抑菌环边缘借助放大镜才能观察到的微小菌落生长可忽略不计。由于培养基中可能存在拮抗剂，甲氧苇咤和磺胺类药物抑菌环内可允许出现菌株轻微生长；因此，在测量抑菌环直径时可忽视轻微生长(20%或较少的菌苔)而测量较明显抑制的边缘。(4)从CSF中分离的流感嗜血杆菌，常规只测试氨苇西林、一种三代头抱菌素、氯霉素和美罗培南的药敏结果并适当报告。(5)阿莫西林/克拉维酸、阿奇霉素、克拉霉素、头抱克罗、头抱丙烯、氯碳头抱、头抱地尼、头抱克的、头抱泊的、头抱味辛和泰利霉素均是口服药物，可用于嗜血杆菌引

43、起的呼吸道感染的经验治疗。这些抗菌药物的药敏试验结果对个体患者的管理用处不大，但是，适用于对嗜血杆菌属耐药性监测及流行病学调查。(6) HTM制备：首先把50mg氯化血红素粉溶解在100mL0.01mol/LNaOH溶液中，加热搅拌至完全溶解，制成新鲜的氯化血红素原液。再将30mL氯化血红素原液加到1L含5g酵母粉的Mueller-Hinton琼脂(MHA)中，高压灭菌并冷却后，无菌手续加入3mLNAD原液(50mgNAD溶解在10mL蒸储水中，过滤除菌)。(7)对于某些微生物/抗菌药物组合，尚不存在或罕见耐药株，因此，除了“敏感”以外没有标明任何其他类型。如果菌株的结果提示“非敏感”，应再确

44、证微生物鉴定和抗菌药物敏感性试验结果。(8)氨节西林敏感性试验结果可用于预报阿莫西林的活性。大部分耐氨节西林和阿莫西林的流感嗜血杆菌可产生TEM-型0内酰胺酶。大多数情况下，直接B内酰胺酶试验可以快速检测对氨节西林和阿莫西林的耐药性。(9)BLNAR流感嗜血杆菌罕见，这类菌应当被认为对阿莫西林/克拉维酸、氨节西林/舒巴坦、头抱克罗、头抱孟多、头抱他美、头抱尼西、头抱丙烯、头抱吠辛、氯碳头抱和哌拉西林/他嘎巴坦耐药，即使某些BLNAR菌株对上述药物在体外显示为敏感。四环素类(12)对四环素敏感的菌株也被认为对多西环素和米诺环素敏感。氯霉素(13)从泌尿道分离菌株不常规报告。(14)利福平仅适用于

45、接触者预防。此解释标准不适用于流感嗜血杆菌侵袭性疾病患者的治疗。淋病奈瑟菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基：纸片扩散法：GC琼脂基础十1%特定的生长添加剂。(纸片扩散法不需要使用无半胱氨酸的生长添加剂)。琼脂稀释法：GC琼脂基础十1%特定的生长添加剂。(琼脂稀释法测碳青霉烯类和克拉维酸时需要使用无半胱氨酸的生长添加剂。含半胱氨酸的生长添加剂对稀释法测定其他药物结果影响不显著)。接种物：直接菌落悬液法，在MHB或0.9%磷酸缓冲盐水(pH7.0)中，使用巧克力琼脂平板5%CO2环境孵育过夜(20-24h)生长的菌落制备，浊度相当于0.5麦氏标准。孵育：36+1°C(不超过37&

46、#176;C);5%CO2;所有方法，20-24h(1)对于纸片扩散法，直径150-mm平板最大放置9只纸片，直径100-mm平板放置4只纸片进行试验。对某些药物，如，唾诺酮类或头抱菌素类，每只平板只能放置23只纸片进行测试。测量抑菌圈直径(用肉眼判读)，包括纸片直径。保持平板在反射光照明、非反射黑的背景上方几英寸，肉眼观察无明显可见生长的地区作为抑菌环边缘。在抑菌环边缘借助放大镜才能观察到的微小菌落生长可忽略不计。(2)用体外试验呈现产生“中介”结果的头抱美座、头抱替坦、头抱西丁和大观霉素治疗淋病瑟奈菌感染的临床疗效是未知的。(3)纸片扩散法测试淋病瑟奈菌，某种抗菌药物试验结果是“中介”，提

47、示或是技术问题，需要重复试验，或者是在处理具有上述抑菌圈的菌株时缺乏临床经验。对于头抱美唾、头抱替坦、头抱西丁和大观霉素以外的药物产生“中介”的菌株，已有文献报道其临床治愈率(85%-95%)低于敏感菌株治愈率(>95%)o(4)推荐的测试淋病奈瑟菌的培养基是含1%特定的生长添加剂的GC琼脂。此添加剂(1升水中加入1.1gL-半胱氨酸、0.03g盐酸鸟口§吟、3mg盐酸硫胺、13mg对氨基苯甲酸(PABA)、0.01g维生素B12、0.1g辅竣酶、0.25gNAD、1.0g腺嗯吟、10gL-谷氨酰胺、100g葡萄糖和0.02g硝酸铁)是在GC琼脂高压灭菌后加入。(5)对于某些微

48、生物/抗菌药物组合，尚不存在或罕见耐药株，因此，除了“敏感”以外没有标明任何其他类型。如果菌株的结果提示“非敏感”，应确证菌株鉴定和抗菌药物敏感性试验结果(见附录A)o(7) 6内酰胺酶阳性可预报分离菌株对青霉素、氨节西林和阿莫西林耐药。(8) 6内酰胺酶试验可检测淋病奈瑟菌对青霉素的一种耐药机制，也可以提供流行病学信息。染色体介导的耐药仅可通过纸片扩散法或琼脂稀释MIC法检测出来。(8)淋病奈瑟菌对10单位的青霉素纸片抑菌圈直径V19mm很可能是产生3内酰胺酶的菌株。但由于3内酰胺酶试验可快速、准确检出这种质粒介导的青霉素耐药性，所以优于其它敏感性试验方法。(10)淋病奈瑟菌对30内四环素纸

49、片抑菌圈直径与9mm,常提示这是一株质粒介导的四环素耐药的淋病奈瑟菌(TRNG)。此菌株的耐药性应用稀释试验(MIC之16因/mL)来确证。肺炎链球菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基：纸片扩散法：含5%绵羊血MHA肉汤稀释法：含LHB(2.5-5%v/v)CAMHB(见M07-A9LHB制备说明)琼脂稀释法：含绵羊血(5%v/v)MHA;药敏试验分委会近期未对琼脂稀释法进行研究和评估。接种物：直接菌落悬液法，相当于0.5麦氏标准，使用绵羊血平板上过夜(18-20h)生长菌落制备。孵育：35+2°C纸片扩散法：5%CO2;20-24h稀释法：空气环境；20-24h(琼脂稀释法需

50、要放CO2环境)(1)对于纸片扩散法，直径150-mm平板最大放置9只纸片，直径100-mm平板放置4只纸片进行试验。测量抑菌圈直径(用肉眼判读)，包括纸片直径。肉眼观察无明显可见生长的地区作为抑菌环边缘。不测量溶血抑制圈。移去平板盖反射光照明琼脂平板，从平板表面上方测量抑菌环直径。在抑菌环边缘借助放大镜才能观察到的微小菌落生长可忽略不计。由于培养基中可能存在拮抗剂，甲氧苇咤和磺胺类药物抑菌环内可允许出现菌株轻微生长；因此，在测量抑菌环直径时可忽视轻微生长(20%或较少的菌苔)而测量较明显抑制的边缘。(2)阿莫西林、氨苇西林、头抱叱曲、头抱睡脚、头抱曲松、头抱吠辛、厄他培南、亚胺培南和美罗培南

51、可用于肺炎链球菌引起感染的治疗；然而，对这些药物纸片扩散法敏感试验检测结果不可靠。最好用MIC方法测定这些药物的体外活性。（3）从脑脊液中分离的肺炎链球菌应当使用可靠的MIC方法（如CLSIM07-A9文件所描述）测试青霉素、头抱展的或头抱曲松、美罗培南，并常规报告。对万古霉素的敏感性可使用MIC或纸片法来测定。（4）对于某些微生物/抗菌药物组合，尚不存在或罕见耐药株，因此，除了“敏感”以外没有标明任何其他类型。如果菌株的结果提示“非敏感”，应确证菌株鉴定和抗菌药物敏感性试验结果（见附录A）o青霉素类（5）对于非脑膜炎分离株，青霉素MICV0.0/mL（或苯嘎西林抑菌圈直径20mm能预报对下列

52、3内酰胺类药物的敏感性：氨羊西林（口服或注射）、氨节西林-舒巴坦、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、头抱克罗、头抱地尼、头抱托仑、头抱叱肠、头抱曝肠、头抱泊肠、头抱丙烯、头抱洛林、头抱嘎肠、头抱曲松、头抱吠辛、多利培南、厄他培南、亚胺培南、氯碳头抱、美罗培南和青霉素（口服或注射）。（6）苯嘎西林抑菌圈直径20mm肺炎链球菌对青霉素是敏感的（MIC£0.06图/mL）。苯嘎西林抑菌圈直径19mm分离株，应测定青霉素和头抱曝肠或头抱曲松或美罗培南MICs。由于抑菌圈直径v19mm可发生在青霉素耐药、中介或某些敏感菌株中。苯睡西林抑菌圈直径V19mm离株，未测定青霉素MIC,则不报告青霉素耐药

53、。青霉素注射剂（非脑膜炎）（7）Rx:青霉素MIC*2ug/mL肺炎链球菌引起的非脑膜炎感染的治疗，肾功能正常成年人每4h静脉给药至少200万单位（每天1200万单位）。MIC为4ug/mL中介株，每天需1800-2400万单位青霉素剂量。(9) CSF外分离的所有菌株，应按脑膜炎和非脑膜炎解释标准报告结果。青霉素注射剂（脑月I炎）（9）Rx:使用青霉素治疗脑膜炎，需用最大剂量静脉给药进行治疗（如，肾功能正常成年人每4h静脉给药至少300万单位）。（15） Rx:使用头抱曝曲和头抱曲松治疗脑膜炎需用最大剂量。大环内酯类（18）测试红霉素可以预报菌株对阿奇霉素、克拉霉素和地红霉素的敏感和耐药性。

54、（19）从泌尿道分离的菌株不常规报告。四环素类（20）对四环素敏感菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。（21）对左氧氟沙星敏感肺炎链球菌分离株可预报其对吉米沙星和莫西沙星敏感。然而，对吉米沙星和莫西沙星敏感肺炎链球菌不能推定其对左氧氟沙星敏感。表2G补充表I.用于充2G肺炎鞋球爆冷型克林素耐药的僻透试嗡注解；假如韵试肺炎整球苜对克林鼻素耐药性,应包括善导整克林零素耐药篇选试验.怵琏试晚语型克林舞索耐药索生物群对红鼻素耐药和对克林鼻素触感或中介的肺炎整球餐试验方法城片犷粒法小邦苗试由前微量稀祥法培舞基料充第羊血（5%¥%画MHA城朴充铺羊血（5%的的TSA含JIB(J.5%-5%v/

55、v)CAMUB抗苜药物波度1S-HK红事素氟片和工陛克林霉素地片.第片间距11mm在同一孔中含l|iE/mL红番素和0.5口e/mL克林素接种物遵照标准蛾片犷散法建谀道腐标推肉询微量带律法建谀褥育条件5%COjJ5±l：空气环境静育时间20-24h20-24h结果与缸峨片相里循抑9边餐出现“4K平”（称为D抑网）=错寻克林素耐药阳性*即使无D-抑出现.荏克林木素抑内出现模物生长=克林鼻素耐药.任何生愠=诲导克杯索耐药阳性1无生长二请导克林第耐药阴性进一步试噬和推告诲导克林鼻素耐药试验阳性苗株，鹿报告-克林茅寮耐蓟）报告中可包括一个据择性注窘：“根据瞽导克林素耐蔚试腕，推楣此株对克林素

56、酎药”.肺炎雒球菌ATt<*J9619用于常境蛾片犷做法QC;见附录（:补充QC-株的应用.肺炎链球菌如19或金黄色H球首ATC（*BAA-W?6-不生长QC推荐-诲旅也装山金黄色葡者球ATCC4BA4方7-生我金黄色葡球菌ATC（*BAA-977-堂隹缩写：ATCgCAMHB,UI节过阳育子的Mutlkr-Hinton惋的fLHE,穆需马血fMHA,Mudkr-HimonQC,质控制：l$A,腴大豆琼脂*,溶血链球菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基：纸片扩散法：含5%绵羊血MHA肉汤稀释法：含LHB（2.5%to5%v/v）CAMHB;CAMHB需补充50（g/mL钙用于达托霉素（见M07-A9LHB制备说明）琼脂稀释法：含绵羊血（5%v/v）MHA;药敏试验分