1、实验二动物实验基本操作技术、实验目的、掌握:常用实验动物的捕获、固定和给药方法实验动物的麻醉方法、气管插管方法、动静脉插管方法、输尿管插管方法、输尿管插管方法。 熟悉:常用颈部和腹部手术操作的基本技术、器械设备和手术器械的使用方法、实验动物血液采集法和死刑方法。 理解:常用实验动物的主要生物科学特性和应用动物的除毛、编号、除毛、采血、死刑的方法。操作练习、全麻家兔气管插管颈总a插管、哺乳动物手术器材清单、药品、戊巴比妥酸钠金属钍(1.5% )为中效巴比妥酸类药物。 是最常用的麻醉药,需要保存在阴凉处。 一般的作用时间可以维持2-4h。 使用量为2ml/kg,使用方法为静脉注射(iv.)或腹腔注
2、射(ip.)。 生理盐溶液肝素(1:10000 )是一种酸性粘粒粗多糖,主要由肥大细胞和嗜盐化学基粒细胞产生。 在肺、心、肌肉等组织中含量丰富,在大姨妈血浆中含量非常少。 无论在体内还是体外,肝素的抗凝血作用都很强,在临床上被广泛用作抗凝血。 肝素在动物体内的抗凝血剂接触剂量一般为3-10mg/kg,体外血液抗凝血剂浓度为0.1-0.2mg/ml。家兔全身麻醉,麻醉剂: 1.5%戊巴比妥钠2ml/kg,给药方法:边缘静脉注射,麻醉剂应用原则:根据动物体重修订麻醉剂接触剂量的动物生命体征变化控制给药速度,制定不太多,阶段性给药方式。 每种动物选择不同的麻醉药,实施不同的麻醉方法。 家兔耳缘静脉注
3、射麻醉的具体操作、准备。 用手指轻轻弹动血管,充满耳缘静脉。 用左手食指和中指夹住静脉近心端,用大拇哥和小拇指夹住边缘部分,用左手无名指和小拇指放在耳下制作垫子。 右手拿注射器将针尖从静脉末端刺入30,在血管方向前进约1-1.5cm,放松左手的大拇哥和食指对血管的压迫,右手尝试注射器的针尖,说明如果注射阻力大或出现局部肿胀,针尖没有刺入静脉,如果注射阻力不大,则慢慢注入药物, 注射结束后抽出针尖,给药速度,最初的2/3快速压入,使动物能够顺利且迅速地度过兴奋期后1/3的速度慢,一边注射一边注意观察动物的生命体征变化,确定达到麻醉效果后,停止给药,留下麻醉成功标记,眼角膜反射迟钝,肢体肌肉松弛,
4、皮肉之苦反射消失,呼吸变浅,动物实验常用插管技术,气管插管术颈动脉插管术颈静脉插管术,插管技术的基本步骤,1 .动物重量,麻醉,固定。 2 .插管部位的皮肤脱毛、皮肤准备。 3 .皮肤切开。 4 .皮下组织结构的分离。 5 .目的器官或组织架构的游离。 6 .插入或固定导管。 在家兔颈部神经和血管的解剖位置、迷走神经交感神经、减压神经、气管插管术、1、麻醉固定、颈部皮肤除毛、皮肤准备、2、颈前区正中形成约5-7cm的切口,3、将皮下组织、肌肉缓慢分离,游离气管,4、在甲状软骨下的第3-4软骨环上形成“t”字状切口。 颈动脉插管技术,1 .从颈正中切开约5-7cm口,钝性分离皮下筋膜(略)。 2
5、 .振膜式传感器和插管的准备。 振膜式传感器与三通管、动脉插管相连,灌注1:10000生理盐溶液肝素,关闭三通管。三通管的使用,3、用玻璃分针分离一颈总动脉,血管暴露2-3cm,用双重线预备。 4、扎颈总动脉远心端,近心端夹动脉。 5、在靠近扎线的表兄弟附近眼科切除“v”形切口,切口大小约为动脉口径的1/31/2。6 .将充满肝素的动脉插管插入近心端,用线双重扎扎,固定在插管栓大头针处(二次固定)。 进入BL410/420系统。 选择“输入信号”,选择“通道”“压力”,喀呖声“星空卫视”实验按钮,在画面上可观察到正常的血压曲线。 选择“实验项目”,选择“循环实验”“兔动脉血压调节”实验模组。 7、打开生物功能实验系统,观察和记录动脉血压。 小心放松动脉回形针,确认间一般无二后再取。 如果发生渗血、血液倒流等事故,可立即点击大头针定进