石蜡切片(paraffin section)是组织学常规制片技术中应用最为广泛的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，所以广泛地适用于许多学科领域的研究中。

活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易区分；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败，失去原有正常结构，因此，组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤制成片子，才能在镜下清晰辨认其形态结构。

石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与贴片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等繁多步骤；其中切片是决定片子质量好坏的最重要的环节之一。因而影响石蜡切片的因素比较多，本期文章我们归纳了常见切片问题有哪些，以及该如何进行补救。

  

1、刀口锋利不一，局部产生差异导致。

优化措施：可移动刀片，改用新刀口。

2、发现切片刀未覆盖到整个蜡块。

优化措施：调整刀口位置至刀片能切到整个蜡块。

3、如果蜡块左右硬度不一致。

优化措施：尽量使用锋利的新刀口，减轻干扰。

4、如果组织未居蜡块正中/央。

优化措施：用刀片切去部分石蜡，使组织居中或重新包埋。

  

1、如果空气干燥。

优化措施：通过加湿器；哈气解决。

2、切片机回缩功能未开启？

优化措施：开启回缩功能。

3、材料边缘留蜡太少？

优化措施：重新包埋，注意组织尽量在正中央。

4、刀的角度不合适？

优化措施：调整余隙角/倾角。

  

1、蜡块冷冻过度？

优化措施：适度升温，用毛笔将蜡片摊开压住，切2至3片即成带。

2、石蜡过硬？

优化措施：加软蜡。

3、刀口太钝？

优化措施：换新刀口。

4、刀的倾角太大？

优化措施：减小倾角。

  

1、蜡块温度偏高？

优化措施：适度降温。

2、石蜡过软？

优化措施：加强冷冻。

3、刀口上留有一层石蜡？

优化措施：清扫刀片，刀片刮蜡，二甲/苯擦拭刀口。

4、刀口钝？

优化措施：换新刀口。

5、含脂肪多？

优化措施：前期脱脂处理，包埋挤压脂肪。

1、刀有缺口？

优化措施：移动刀口。

2、石蜡中含有杂质？

优化措施：清除杂质，更换高质量石蜡。

3、刀口留有碎屑或细丝？

优化措施：清洁刀口。

4、组织太硬？

优化措施：蜡块入水浸泡软化。

5、组织内有止血钉？

优化措施：抠出止血钉。

  

1、锁杆或零件松动？

优化措施：拧紧锁杆或零件。

2、刀口倾角偏大？

优化措施：适度减小倾角。

3、标本伸出太长？

优化措施：适度回缩，前移刀架。

4、蜡块没夹紧？

优化措施：清洁蜡块，夹头。

5、组织偏硬？

优化措施：表面脱钙，缓慢切片。

6、切片机内部磨损？

优化措施：维护更换新机。

  

1、切片机磨损？

优化措施：维护或更换切片机。

2、用力不当？

优化措施：调整用力。

3、锁杆或零件松动？

优化措施：拧紧锁杆或零件。

4、蜡块过硬？

优化措施：将石蜡块浸泡在水中。

5、温度变化？

优化措施：重新冷冻蜡块。

  

1、脱水处理不当？

优化措施：重新脱水。

2、有透明剂残留？

优化措施：增加浸蜡时间，重新包埋。

3、由于脱水机和透明剂的影响，使组织变硬发脆？

优化措施：调整脱水程序。

4、材料太硬或太大？

优化措施：脱钙，分开包埋。

L型CaV1.2通道在细胞兴奋、增殖、基因表达和肌肉收缩中起关键作用。CaV1.2通道的一个基本特性是它们内在的功能耦合能力，例如“合作门控”（cooperative gating）。CaV1.2的这种协同作用导致Ca2+内流放大，这种门控模式能够调节癌细胞、心肌细胞、神经元和动脉肌细胞的功能。在动脉肌细胞中，大约50%的Ca2+内流依赖于CaV1.2的合作门控，这对于动脉功能至关重要，因为Ca2+通过CaV1.2流入，将膜电位的变化与动脉肌细胞收缩耦合，从而影响动脉的直径、血流量和血压。然而，CaV1.2的合作门控是如何被调节的，目前的研究仍然知之甚少。

2022年12月2日，UC Davis分校的Manuel F. Navedo 和Madeline Nieves-Cintrón团队在Circulation Research杂志上发表题为“Spatiotemporal Control of Vascular CaV1.2 by α1C S1928 Phosphorylation”的研究论文。该研究证实，PKA依赖的pS1928（CaV1.2 α1C亚基S1928位点磷酸化）作为一个关键起始步骤，促进了糖尿病高血糖期间血管α1C亚基的空间重组，形成“超簇”，从而增加CaV1.2的活性和合作门控，直接影响血管反应性。因此，作者提出α1C亚基的pS1928是血管CaV1.2功能和血管反应性的变阻器，也是糖尿病高血糖期间血管并发症的危险因素。这一结果可能为开发纠正糖尿病高血糖时期CaV1.2和动脉功能的治 疗方法奠定了基础。

CaV1.2通道是由成孔的α1C亚基和辅助的β、α2δ亚基组成。先前的研究表明，α1C亚基长羧基端是CaV1.2合作门控所必需的，两个或多个相邻α1C亚基羧基端之间的相互作用促进了CaV1.2合作门控。新的证据表明，蛋白激酶可以刺激CaV1.2的协同作用。α1C亚基可以形成有利于α1C亚基功能相互作用的簇，α1C亚基的磷酸化可能是诱导和促进α1C亚基聚集以及CaV1.2合作门控的关键起始步骤。最近的研究显示，高血糖（hyperglycemia, HG）和糖尿病引起的血管CaV1.2通道活性增加依赖于S1928磷酸化的增强（pS1928）。尽管初步的研究表明HG和糖尿病可增加血管CaV1.2的合作门控，但pS1928是否会介导这种门控模式尚不清楚。阐明这其中的机制十分重要，因为它可以确定pS1928作为一个关键事件，可以通过α1C亚基的重新排布形成更大的簇来介导CaV1.2的合作门控，这可能是糖尿病高血糖等病理条件下血管功能改变的基础。

在该研究中，作者首先利用膜片钳技术检测了2型糖尿病患者动脉肌细胞的CaV1.2通道特性，结果显示，糖尿病患者动脉肌细胞内CaV1.2通道的活性和协同性增强。CaV1.2协同性增加意味着α1C亚基必须在物理上接近，为此作者利用超分辨率纳米显微镜对α1C亚基的空间排布进行了观察，结果观察到糖尿病人动脉肌细胞中质膜α1C亚基重组成更大的簇，这可能是CaV1.2通道活性和协同性增强的基础。考虑到已有研究认为糖尿病高血糖引起的血管CaV1.2通道活性增加依赖于pS1928，作者进一步探讨了pS1928在高糖诱导的动脉肌细胞CaV1.2合作门控中的作用。利用野生型或者S1928A小鼠（1928丝氨酸位点突变为丙氨酸以防止其磷酸化）的动脉肌细胞，作者证实：高糖刺激引起的CaV1.2合作门控需要PKA依赖的pS1928，此外，高糖刺激能够诱导P2Y11/PKA依赖的pS1928，并导致α1C亚基的寡聚化/聚集增加。这些数据支持以下假设：高糖刺激诱导的pS1928能够促进动脉肌细胞α1C亚基空间重排成更大的簇，从而使动脉肌细胞CaV1.2的协同作用增强。

图1. pS1928介导了高糖诱导的动脉肌细胞α1C聚集增加

随后，作者进一步探讨了高糖环境下ps1928介导α1C聚集和CaV1.2协同性增加的生理效应。利用钙离子指示剂，作者观察到pS1928是高糖诱导的胞内Ca2+增加所必需的，并导致了动脉肌细胞的收缩。为了证实高糖环境下pS1928在体内的生理作用，作者利用激光散斑成像技术测量了麻醉小鼠的脑动脉肌源性张力和血流量（作者采用了RWD激光散斑血流成像系统）。在野生型小鼠中，用20 mmol/L D -葡萄糖向颅窗灌注导致动脉直径减小，进而转化为肌源性张力增加和血流量减少，而S1928A小鼠未见此情况。这些结果表明，高糖诱导的脑动脉肌源性张力和血流的改变需要依赖pS1928。考虑到高血糖与糖尿病的联系，作者利用链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）诱导的1型糖尿病小鼠模型进一步验证了动脉肌细胞CaV1.2的结构和功能重塑是否需要pS1928。结果表明，糖尿病高血糖促进了ps1928依赖的动脉肌细胞内α1C的聚集，以及CaV1.2通道活性和协同性的增加。利用激光散斑血流成像技术，作者观察到，STZ诱导的野生型糖尿病小鼠脑血管的肌源性张力增加，血流量减少，而STZ诱导的S1928A小鼠脑血管的肌源性张力和血流量则与对照组无明显差异。这些结果表明，糖尿病高血糖诱导小鼠血管收缩张力和血流量的改变需要依赖pS1928。

图2.糖尿病引起的动脉收缩张力增加和血流量减少需要依赖pS1928

综上，在糖尿病高血糖期间，pS1928的增加是对血管CaV1.2进行时空调控的基础，以此可以调节胞内Ca2+浓度和动脉肌细胞的收缩张力。这一研究成果揭示了糖尿病高血糖时期血管反应性改变的新机制，强调了开发纠正CaV1.2功能的治 疗方法在疾病治 疗中的潜力，对于临床疾病的治 疗具有重要价值。

图3.糖尿病高血糖时期CaV1.2合作门控的调节机制和血管反应变化示意图

该研究结果可为开发纠正糖尿病高血糖期间CaV1.2和动脉功能的治 疗方法奠定基础。本研究采用了膜片钳电生理学、超分辨率纳米显微镜、邻近结扎测定、钙成像和激光散斑血流成像等技术。瑞沃德深耕生命科学研究领域20年，一直致力于为客户提供可信赖的解决方案和服务。在该研究中，研究人员采用了瑞沃德激光散斑血流成像系统，为实验的顺利开展提供了助力。此外，瑞沃德还可提供该研究所涉及的脑立体定位手术、化学遗传学、在体钙成像、免疫组化以及行为学评估等实验的完整解决方案。

论文原文链接：https://www.ahajournals.org/doi/suppl/10.1161/CIRCRESAHA.122.321479

十二要素微气象仪——一款质量上优的大气污染环境监测仪【TH-WQX12】十二要素气象仪能够对大气环境中的12要素进行分析和监测，能够监测到该区域内的气象环境数据，能够针对于工厂和矿工等粉尘比较多的地区进行控制质量的监测。

二、产品特点
1.顶盖隐藏式超声波探头，避免雨雪堆积的干扰，避免自然风遮挡
2.原理为发射连续变频超声波信号，通过测量相对相位来检测风速风向
3.PM2.5、PM10、CO、SO2、NO2、O3、温度、湿度、风速、风向、大气压力、光学雨量十二要素一体式（实用新型专利，专利号ZL 2020 2 3215649.5）☆
4.采用先进的传感技术，实时测量，无启动风速☆
5.抗干扰能力强，具有看门狗电路,自动复位功能,保证系统稳定运行
6.高集成度，无移动部件，零磨损
7.免维护，无需现场校准
8.采用ASA工程塑料室外应用常年不变色
9.产品设计输出信号标配为RS485通讯接口（MODBUS协议）；可选配232、USB、以太网接口，支持数据实时读取☆
10.可选配无线传输模块，最小传输间隔1分钟
11.探头为卡扣式设计，解决了运输、安装过程松动不准的问题☆
三、技术参数
1.风速：测量原理超声波，0～60m/s（±0.1m/s）分辨率0.01m/s；
2.风向：测量原理超声波，0～360°（±2°）；分辨率：1°；
3.空气温度：测量原理二极管结电压法，-40-60℃（±0.3℃），分辨率0.01℃；（北京市气象局校准证书）
4.空气湿度：测量原理电容式，0-100%RH（±3%RH）,分辨率：0.1%RH；（北京市气象局校准证书）
5.大气压力：测量原理压阻式，300-1100hpa（±0.25%），分辨率0.1hpa；（北京市气象局校准证书）
6.PM2.5：0-1000ug/m3（±10%）
7.PM10：0-1000ug/m3（±10%）
8.光学雨量：0-4mm/min（≤±4%）
9.一氧化碳：0-10ppm（±5%F.S）
10.二氧化硫：0-5PPM（±5%F.S）
11.二氧化氮：0-5PPM（±5%F.S）
12.臭氧：0-5PPM（±5%F.S）
13.功率:0.84W
四、产品尺寸图

五、产品结构图

1.光学雨量传感器
2.控制电路
3.指北箭头
4.超声波风速、风向
5.百叶箱PM2.5、PM10、一氧化碳、二氧化硫、二氧化氮、臭氧
6.温度、湿度、气压监测位置
7.底部固定法兰
六、产品接线定义