是新朋友吗?记得先点蓝字关注我哦~
组织通过固定、脱水、透明、浸蜡环节才能包埋切片,组织块硬、脆、软时都会影响切片质量,采用对特殊组织蜡块不同的处理方法可以得到较好效果。
1. 操作方法:
(1)硬、脆组织:切片时易跳刀、易破碎、皱褶,多不易展平,通过在冰盒中加一些自来水(水量以高出冰面0.1cm为宜),升高蜡块的冷冻温度,将粗修好的蜡块置于冰盒的0℃冰面上,冷冻时间同常规。
(2)软的组织呈白色棉絮状,组织凹陷、切片空洞、无法切完整的片,强行加厚切片组织多在染色过程中掉片。可将切不好的棉絮状蜡块置于包埋机65℃恒温的蜡缸中3~4小时,再包埋切片,可使切片完整。
(3)结果:经处理后的硬、脆组织切片平整,无皱褶;脂肪等较软的组织切片细胞完整,切片质量明显提高。
2.注意事项:
(1)组织硬、脆:往往是由于脱水、透明过度,浸蜡和包埋温度过高或由于脱水机故障组织留在高浓度乙醇或二甲苯液中,有的是因为组织本身的特点所致(如子宫等含纤维多的组织较硬,脑、甲状腺、淋巴结等组织较脆),传统的方法是切片时用嘴对蜡块哈热气,然后轻轻地慢慢摇切片机,这样的切片较厚(特別是淋巴组织)会影响诊断。
(2)将暴露切面的蜡块用5mol/L盐酸处理15分钟,使组织软化,这样能使切片质量有所提高。通过在冰盒中加水来升高蜡块的冷冻温度,使蜡块不致冷冻得太硬,按常规切片法将蜡块直接放在冰面上就会被冻得太硬,因为冰块尚未达到熔点之前还是固体,冰块达到0℃开始出现融化(冰水混合物), 用30cmx20cmx5cm大小的冰盒冷冻(夏季要20~30分钟,冬季则需40〜60分钟),通过在冰盒中加一些水,冰块很快达到熔点,粗修好的硬、脆组织放在经冰水混合的冰面上,按常规冻约25分钟,这样蜡块与冰块之间隔着少量冰水,冰水既有冷冻作用又有湿润蜡块减少切片静电吸附的作用。在冰块开始 融化到完全融化之前的这段时间内,温度始终为0℃,冰块除吸收蜡块的热,还能达到冷冻蜡块的作用。
(3)实验证明,冰块刚开始融化,蜡块与冰块之间只有少量冰水且蜡块还能接触到冰块的一段时 间是蜡块的最佳冷冻温度,如果冰水量多蜡块浮在水面未接触到冰块则效果较差,且冷冻时间要长,此 方法也适用于含凝血块多的组织(如于宫内膜、宫外孕的输卵管及其血块),通过应用此法使含凝血块 组织的切片质量得到明显提高。
(4)组织软往往是由于固定不好引起脱水、透明、浸蜡不佳或脱水液使用过久等所致,这种现象多见于脂肪或含脂肪多的组织、肝、脾及各种未及时切开固定的大体标本等。
(5)传统方法是将组织蜡块熔解,二甲苯脱蜡,再由高到低浓度的梯度乙醇水化,再重新脱水、 透明、浸蜡。这样处理后组织由于过度脱水、透明,虽然切片完整了,但切片时组织硬、脆,也会引起 组织细胞形态结构变化(特别是淋巴组织)、严重收缩、体积变小,间隙变宽,影响诊断。如果重新入脱水机处理,又须等第二天才能包埋出蜡块,延长了出报告单时间。
(6)也有人将蜡块置于电炉加热的热蜡杯中浸泡到组织无气泡冒出为止,这种方法温度难控制, 蜡的温度太卨容易烫伤组织,导致切片硬、脆,染色不良。
(7)脂肪或含脂肪多的组织常出现软的现象是由于油脂太多,试剂较难渗透,容易引起脱水、透明、浸蜡不足。将组织块石蜡熔解,趁组织微热将组织放在纱布中轻度均匀用力挤压,将残留油脂挤出后再浸蜡10~20分钟重新包埋,这种方法能使切片完整,但力度较难掌握,容易用力过度引起细胞挤压变形。
(8)将发软的蜡块融化取出组织,放入二甲苯中超声(石蜡快速超声仪)脱水处理30分钟,然后投人无水乙醇中超声置换二甲苯约30分钟,更换无水乙醇,超声处理1小时,在石蜡中浸透,超声处理1小时,后进行包埋,组织有明显改善。
(9)通过将蜡块置于包埋机恒温的蜡缸中浸泡3〜4小时,蜡温的设置以比蜡的熔点高出3~5℃为宜,包埋机具有恒温的功能,此温度不会使组织烫伤,又能使蜡保持融化状态。温度太髙,组织会收缩 变硬变脆,影响切片和着色。
(10)脱水不足的组织通过一定的温度使水分慢慢蒸发,蜡渗透进组织内,使组织具有一定的硬度和弹性,不管是固定不好还是脱水不好造成的“软”组织,经这样的处理切片均能切完整。但是染色 效果方面,实验证明,若是固定不好造成组织细胞坏死、干涸引起染色发灰、核轮廓不清,是任何方法都无法补救的,若是脱水不好造成"软"的组织经这样处理其染色效果与处理正常组织无明显差异,大大提高了制片的质量。
秀威C型包埋机
型号:XWM-C型包埋机
大容量 6.5升熔蜡缸;6.25升保存盒可放222个组织盒
一体化 本机配有修蜡仪
分区独立控温 在室温~85℃范围内可调
流量控制 具有石蜡流量调节功能
便捷开关 全自动开/关机,手动/脚踏控制开关
广州秀威|病理海
电话:020-34795899
秀威贸易:www.gzxiuwei.com
秀威科技:www.xiuweikeji.com
长按扫码可联系我们
点击“阅读原文”可进入“病理海”网站